华广虻(Tabanusamaenus Walker)溶纤活性蛋白的纯化及生物活性分析 被引量：6

1

作者 杨星勇 程惊秋 +2 位作者 裴炎 阎光凡 张玉方 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第4期580-584,共5页

经过 ７５％ 饱和度硫酸铵沉淀、 Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ７５ 凝胶过滤层析、 Ｌｙｓ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４ Ｂ 亲和层析和电泳制备洗脱，从华广虻（ Ｔａｂａｎｕｓ ａｍ ａｅｎｕｓ Ｗ ａｌｋｅｒ）腹部组织匀浆液中分离纯化出... 经过 ７５％ 饱和度硫酸铵沉淀、 Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ７５ 凝胶过滤层析、 Ｌｙｓ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４ Ｂ 亲和层析和电泳制备洗脱，从华广虻（ Ｔａｂａｎｕｓ ａｍ ａｅｎｕｓ Ｗ ａｌｋｅｒ）腹部组织匀浆液中分离纯化出分子量约为 ６７ｋ Ｄ 的溶纤活性蛋白 Ｔ Ａ Ｆ Ｐ经纤维蛋白平板测定表明， Ｔ Ａ Ｆ Ｐ 只具有纤溶酶作用，不具有激活纤溶酶原的作用；但 Ｔ Ａ Ｆ Ｐ 能分解纤溶酶原激活剂的生色底物—— Ｃｈｒｏｍ ｏｚｙｍ Ｕ Ｋ 及 Ｓ２２８８还能水解胰蛋白酶专一底物 Ｂｚ Ｐｈｅ Ｖａｌ Ａｒｇ Ｎ Ａ 及 Ｃ Ｂ Ｚ Ｇｌｙ Ｐｒｏ Ａｒｇ Ｎ Ａ，表明 Ｔ Ａ Ｆ Ｐ具有类胰蛋白酶活性，专一水解精氨酸形成的酰胺键（或肽键） Ｔ Ａ Ｆ Ｐ无胰凝乳蛋白酶活性 展开更多

关键词 华广虻 溶纤活性蛋白 纯化 生物活性

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汕优63的DNA分子标记及种子纯度鉴定研究 被引量：9

2

作者 邵启明 裴炎 +6 位作者 侯磊 唐彬 杨光伟 张志 吴敏 苏秀 肖伦 《西南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 1996年第2期148-151,共4页

利用改进了的ＤＮＡ提取方法，从“三系”杂交水稻汕优６３的不育系、保持系、杂种一代和恢复系单株中提取ＤＮＡ，进行特异基因片断的ＰＣＲ基因扩增分析。结果表明：从２００个随机引物和设计的特定引物中筛选出３个引物，能有效地从... 利用改进了的ＤＮＡ提取方法，从“三系”杂交水稻汕优６３的不育系、保持系、杂种一代和恢复系单株中提取ＤＮＡ，进行特异基因片断的ＰＣＲ基因扩增分析。结果表明：从２００个随机引物和设计的特定引物中筛选出３个引物，能有效地从不育系中鉴别出保持系，从汕优６３中分别鉴定出不育系、保持系、恢复系。研究结果表明，利用这些ＤＮＡ分子标记鉴定种子纯度，具有快速、准确、可靠的优点。 展开更多

关键词 杂交 水稻 种子 纯度 脱氧核糖核酸 汕优63

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新型抗真菌多肽APS的抑菌性能研究 被引量：10

3

作者 刘建国 丛威 +1 位作者 欧阳藩 裴炎 《中国生物防治》 CSCD 1999年第3期108-110,共3页

ＡＰＳ是一种由蜡状芽孢杆菌产生的新型抗真菌环状多肽。研究表明，ＡＰＳ具有广谱抗菌性，其对棉花枯萎病等多种病原真菌及黑曲霉的孢子萌发具有强烈的抑制作用，最小的ＭＩＣ达２．５μｇ·ｍｌ－１，对真菌的生长亦具有强烈的抑... ＡＰＳ是一种由蜡状芽孢杆菌产生的新型抗真菌环状多肽。研究表明，ＡＰＳ具有广谱抗菌性，其对棉花枯萎病等多种病原真菌及黑曲霉的孢子萌发具有强烈的抑制作用，最小的ＭＩＣ达２．５μｇ·ｍｌ－１，对真菌的生长亦具有强烈的抑制作用。随着ＡＰＳ处理浓度的增加，菌丝生长速度明显降低，甚至为零。扫描电镜观察表明，经ＡＰＳ处理后，菌丝发生顶端膨大，分支缩短等异常形态学变化。 展开更多

关键词 APS 抗真菌多肽 抑菌作用

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棉花铃重AFLP标记的初步研究 被引量：2

4

作者 方卫国 张正圣 +1 位作者 李先碧 裴炎 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2000年第4期176-179,共4页

本文以陆地棉铃重近等基因系为材料 (大铃≥ 5.4g,小铃≤ 1 .7g) ,构建大小铃两个近等基因池。利用 AFLP标记技术对两基因池进行分析 ,64对引物组合共产生 3840条稳定、清晰扩增带。五条扩增带在两基因池间呈现多态性 ,其中四条差异带... 本文以陆地棉铃重近等基因系为材料 (大铃≥ 5.4g,小铃≤ 1 .7g) ,构建大小铃两个近等基因池。利用 AFLP标记技术对两基因池进行分析 ,64对引物组合共产生 3840条稳定、清晰扩增带。五条扩增带在两基因池间呈现多态性 ,其中四条差异带出现在大铃基因池 ,编号分别为 LB- 1、L B- 2、L B- 3和 LB- 4;一条出现在小铃基因池 ,编号为 SB- 1。模板浓度梯度分析表明 ,在一定范围内 ,酶切模板浓度对 AFL P结果影响较小。利用稍作修改的 CTAB法提取的棉花 DNA可用于AFLP分析。 展开更多

关键词 AFLP 陆地棉 铃重 近等基因系

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小皱蝽抗真菌物质研究 被引量：3

5

作者 杨星勇 何清君 +1 位作者 卢晓风 裴炎 《西南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 1998年第3期246-248,共3页

通过不同诱导方式和提取方法，从小皱蝽中筛选到一种抗真菌和细菌的物质ＡＦＳ，反复冻融对ＡＦＳ抗菌活性无影响，温度稳定性亦好。

关键词 小皱蝽 诱导 提取 抗真菌物质

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22种化学物和紫外线对λDNA的遗传毒性分析 被引量：12

6

作者 曹阳 张林 +4 位作者 刘雁雨 曹佳 杨录军 卓鉴波 许莉萍 《中国环境科学》 EI CAS CSSCI CSCD 北大核心 1994年第2期139-142,共4页

采用具有遗传毒性的受试化学物处理λＤＮＡ后，经体外包装，形成噬菌体颗粒，感染宿主菌ＬＥ３９２，噬菌斑发生率将显著降低。用这一方法对２２种化学物和紫外线测试的结果表明，丝裂霉素Ｃ等１３种受试化学物和紫外线对λＤＮＡ具有... 采用具有遗传毒性的受试化学物处理λＤＮＡ后，经体外包装，形成噬菌体颗粒，感染宿主菌ＬＥ３９２，噬菌斑发生率将显著降低。用这一方法对２２种化学物和紫外线测试的结果表明，丝裂霉素Ｃ等１３种受试化学物和紫外线对λＤＮＡ具有遗传毒性。根据用限制性内切酶消化和凝胶电泳分析的结果认为，丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）、甲基磺酸乙酯（ＥＭＳ）和９－氨基吖啶（９－ＡＡ）对λＤＮＡ的遗传毒作用机理，可能是它们分别造成了λＤＮＡ分子发生随机断裂、ＤＮＡ交联和在碱基热点上结合的移码突变。 展开更多

关键词 λDNA 遗传毒性 化学物质 紫外辐射

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甘蓝型油菜隐性核不育两用系S45AB中与MS2Bnap基因同源片段的克隆及序列分析 被引量：6

7

作者 李德谋 侯磊 +2 位作者 罗小英 裴炎 杨光伟 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期1-5,共5页

以甘蓝型油菜隐性核不育两用系 S4 5 AB的可育株和不育株为材料 ,提取减数分裂期与单核期的花粉 m RNA,反转录合成 c DNA,并以其为模板扩增花粉特异基因 MS2 Bnap。结果减数分裂期能扩出产物 ,而单核期无任何产物。将减数分裂期的扩增... 以甘蓝型油菜隐性核不育两用系 S4 5 AB的可育株和不育株为材料 ,提取减数分裂期与单核期的花粉 m RNA,反转录合成 c DNA,并以其为模板扩增花粉特异基因 MS2 Bnap。结果减数分裂期能扩出产物 ,而单核期无任何产物。将减数分裂期的扩增产物克隆、测序。同源性分析表明 :在 S4 5 AB上克隆的 MS2 Bnap基因与 Gene Bank公布的拟南芥控制核育性基因 MS2和已报道的甘蓝型油菜的 MS2 Bnap基因的同源性分别为 88%和 99%。可育株 S4 5 B与不育株S4 5 A在 MS2 Bnap基因序列上有 4处碱基存在差异 ,其中 3处为同义突变 ,编码氨基酸未发生变化 :1处为错义突变 ,可育株为 AAA,不育株为 AGA。其三联体密码对应的氨基酸也发生了变化 ,AAA编码赖氨酸 ,AGA编码精氨酸。该变化可能与 S4 5 展开更多

关键词 甘蓝型油菜 隐性核不育 序列分析 MS2Bnap基因 基因克隆 花粉发育

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五带虻溶纤活性蛋白的纯化和性质 被引量：10

8

作者 杨星勇 卢晓风 裴炎 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期231-236,共6页

五带虻ＴａｂａｎｕｓｑｕｉｎｑｕｅｃｉｎｃｔｕｓＲｉｃａｒｄｏ腹部匀浆液经硫酸铵沉淀、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５凝胶层析、Ｆｉｂｒｉｎ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析和电泳制备等方法纯化后，获得在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ图谱上... 五带虻ＴａｂａｎｕｓｑｕｉｎｑｕｅｃｉｎｃｔｕｓＲｉｃａｒｄｏ腹部匀浆液经硫酸铵沉淀、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５凝胶层析、Ｆｉｂｒｉｎ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析和电泳制备等方法纯化后，获得在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ图谱上呈现单一区带的溶纤活性蛋白。该蛋白质既具有纤溶酶作用，又具有激活纤溶酶原的作用，其分子量为４０ｋＤ，等电点为４．５，最适作用ｐＨ为９．０，最适作用温度为２８℃，３７℃处理２ｈ活性完全丧失，Ｃａ２＋、Ｍｎ２＋、Ｃｕ２＋、Ｚｎ２＋、Ｈｇ２＋和ＰＭＳＦ能抑制其活性。 展开更多

关键词 五带虻 溶纤活性蛋白 纯化 性质

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豌豆铁蛋白的纯化及其抗血清的制备 被引量：6

9

作者 袁小红 杨星勇 +2 位作者 罗小英 周泽扬 裴炎 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期614-618,共5页

干豌豆种子粗提物经MgCl2 盐析、AcA2 2 凝胶过滤和DEAE 纤维素阴离子交换柱层析等方法进行纯化 ,以邻菲咯啉显色法检测铁蛋白 ,最后获得纯的铁蛋白 .纯化的铁蛋白在PAGE上显示一条带 ,SDS PAGE显示该蛋白仅含 2 8kD一条亚基 .纯化的豌... 干豌豆种子粗提物经MgCl2 盐析、AcA2 2 凝胶过滤和DEAE 纤维素阴离子交换柱层析等方法进行纯化 ,以邻菲咯啉显色法检测铁蛋白 ,最后获得纯的铁蛋白 .纯化的铁蛋白在PAGE上显示一条带 ,SDS PAGE显示该蛋白仅含 2 8kD一条亚基 .纯化的豌豆铁蛋白免疫兔 7周后 ,琼脂糖双扩散法检测抗血清效价达 1∶32 .用分级盐析法纯化抗血清 。 展开更多

关键词 豌豆 铁蛋白 纯化 抗血清 制备

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免疫亲和层析法纯化棕尾别麻蝇(Sarcophagaperegrina)幼虫血淋巴凝集素 被引量：3

10

作者 裴炎 卢晓风 +2 位作者 杨星勇 程惊秋 蒋书楠 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第4期633-636,共4页

报道了利用免疫亲和层析法纯化棕尾别麻蝇幼虫血淋巴凝集素的结果．哺乳动物红细胞能够特异地吸附凝集素．用兔红细胞与麻蝇幼虫血淋巴凝集素形成的复合体免疫供血家兔，得到麻蝇幼虫血淋巴凝集素的抗体．再利用抗体制备亲和吸附柱，通... 报道了利用免疫亲和层析法纯化棕尾别麻蝇幼虫血淋巴凝集素的结果．哺乳动物红细胞能够特异地吸附凝集素．用兔红细胞与麻蝇幼虫血淋巴凝集素形成的复合体免疫供血家兔，得到麻蝇幼虫血淋巴凝集素的抗体．再利用抗体制备亲和吸附柱，通过免疫亲和层析一次性纯化了麻蝇幼虫血淋巴凝集素． Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ结果显示，该凝集素的分子量约为７３ ｋ Ｄ．这一结果，与用对麻蝇幼虫血淋巴凝集素有抑制作用的糖蛋白—胎球蛋白和甲状腺球蛋白为配基，亲和层析纯化的结果完全相同，表明用这种免疫亲和层析法纯化凝集素是可行的．为不清楚专一性识别糖或专一性识别糖不典型，难于用普通亲和层析纯化的凝集素，提供了一种有效的纯化方法． 展开更多

关键词 棕尾别麻蝇 凝集素 分离 纯化 免疫亲和层析

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免疫亲和层析法纯化苦瓜几丁酶 被引量：2

11

作者 裴炎 杨星勇 +2 位作者 卢晓风 夏玉先 李先碧 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第6期953-956,共4页

用扁豆几丁酶免疫家兔，获得抗扁豆几丁酶的抗体，将此抗体与Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ偶联，制备免疫亲和吸附剂，用以纯化苦瓜几丁酶．苦瓜叶片的粗提液经过免疫亲和吸附柱后，可获得电泳纯的几丁酶，其分子量为３５ ｋＤ，与用几丁质... 用扁豆几丁酶免疫家兔，获得抗扁豆几丁酶的抗体，将此抗体与Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ偶联，制备免疫亲和吸附剂，用以纯化苦瓜几丁酶．苦瓜叶片的粗提液经过免疫亲和吸附柱后，可获得电泳纯的几丁酶，其分子量为３５ ｋＤ，与用几丁质凝胶为亲和吸附剂的纯化结果一致．表明利用植物几丁酶在结构上的保守性，用免疫亲和法可纯化不同植物的同类几丁酶．与几丁质凝胶亲和柱相比，免疫亲和法纯化植物几丁酶具有快速、亲和柱可重复使用等的优点．利用免疫亲和层析获得的纯化样品，研究了苦瓜几丁酶对真菌的抑制试验，研究结果表明，苦瓜几丁酶能分解棉花枯萎病菌的菌丝体细胞壁制备物，并对其孢子芽管的伸长有一定抑制作用． 展开更多

关键词 苦瓜 免疫亲和层析 几丁酶 纯化 真菌 抑制作用

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陆地棉体胚发生及再生植株移栽 被引量：9

12

作者 郭余龙 李名扬 +1 位作者 裴炎 蔡应繁 《西南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 1999年第6期514-517,共4页

以体细胞培养难易不同的Corker312，泗棉3号，川棉239为材料，比较研究了它们在不同培养基上愈伤组织诱导和胚性愈伤组织发生的差异，获得了3个品种的再生植株，并对体胚苗移栽适宜基质进行了研究。

关键词 陆地棉 体胚发生 移栽 棉花 愈伤组织

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棉花川239体胚发生和植株再生 被引量：4

13

作者 郭余龙 李名扬 +1 位作者 裴炎 蔡应繁 《棉花学报》 CSCD 北大核心 1999年第5期247-250,共4页

以长江流域棉花新品系川２３９为材料，系统比较了四种激素组合（２，４－ Ｄ＋ ＫＴ，ＮＡＡ＋ ＫＴ，ＩＡＡ＋ ＫＴ， ＺＴ）对愈伤组织诱导和体胚发生的影响，对获得大量再生植株的条件进行了研究，获得了“川２３９”再生植株。

关键词 棉花 体胚发生 植株再生

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黄籽甘蓝原生质体培养再生植株 被引量：4

14

作者 李名扬 罗金华 陈红 《西南农业学报》 CSCD 1995年第4期35-41,共7页

以黄将甘蓝试管苗幼叶为材料分离原生质体，用ＫＭ８Ｐ培养基进行液体浅层培养和薄层漂浮培养。原生质体的培养密度为６×１０３～１０４／ｍｌ。在薄层漂浮培养中，２天后开始第一次分裂；第５天和７天的分裂频率分别达２３％和３... 以黄将甘蓝试管苗幼叶为材料分离原生质体，用ＫＭ８Ｐ培养基进行液体浅层培养和薄层漂浮培养。原生质体的培养密度为６×１０３～１０４／ｍｌ。在薄层漂浮培养中，２天后开始第一次分裂；第５天和７天的分裂频率分别达２３％和３０％。培养１０天后加入稀释培养液，并从暗培养转至弱光照条件下培养，以后每周加一次稀释液。培养１５天后形成小细胞团；３０～３５天形成肉眼可见的小愈伤组织，植板率为３．５％。愈伤组织在含ＩＢＡ０．５～１．０ｍｇ／Ｌ，６—ＢＡ１．５～５．０ｍｇ／Ｌ的分化培养基上，培养约１个月可获得再生无根苗，分化频率可达６８．５％。再生小苗转入合ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ的生根培养基，可获得具根的完整再生小植株。 展开更多

关键词 黄籽甘蓝 原生质体 植株再生 组织培养

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