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金磁微粒介导的盐酸克伦特罗多克隆抗体的纯化
被引量：
2
1
作者
汪慧蓉
朱宏莉
+3 位作者
惠文利
张志锋
陈超
崔亚丽
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2006年第5期18-22,26,共6页
以重氮化法制备盐酸克伦特罗-牛血清白蛋白(CBL-BSA)抗原并免疫家兔制备多克隆抗体,将表面固定有BSA的金磁微粒(金磁微粒-BSA)与多克隆抗体反应,抗BSA抗体通过抗原抗体反应被吸附在金磁微粒表面,磁性分离,利用ELISA法对纯化前后抗CBL及...
以重氮化法制备盐酸克伦特罗-牛血清白蛋白(CBL-BSA)抗原并免疫家兔制备多克隆抗体,将表面固定有BSA的金磁微粒(金磁微粒-BSA)与多克隆抗体反应,抗BSA抗体通过抗原抗体反应被吸附在金磁微粒表面,磁性分离,利用ELISA法对纯化前后抗CBL及抗BSA抗体的效价进行测定,确定最佳纯化条件,得到高纯度的抗CBL抗体。结果表明,通过一步反应．可实现载体蛋白BSA在金磁微粒表面的固定化,每毫克金磁微粒固定 BSA的容量可达236 μg;在最佳纯化条件(温度4C,反应时间2h,金磁微粒表面BSA质量与抗体质量比为7:1) 下,金磁微粒-BSA可有效地去除偶联物多克隆抗体中的抗BSA抗体,而纯化前后抗CBL抗体的效价基本保持不变,分离纯化效果较好。该方法可方便、快速地去除多克隆抗体中的无关抗体,对小分子半抗原多克隆抗体的纯化具有重要意义。
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关键词
盐酸克伦特罗
金磁微粒
亲和吸附
抗体纯化
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职称材料
纯化组氨酸标签蛋白金属螯合亲和色谱填料的制备与性能
被引量：
3
2
作者
孙永亮
李淑娟
+4 位作者
胡道道
崔亚丽
陈超
杨菊香
沈淑坤
《陕西师范大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期67-71,共5页
以琼脂糖(agarose)凝胶的珠状产品SepharoseCl-6B为基质,以环氧氯丙烷为活化剂,将天冬氨酸固定在琼脂糖凝胶微球上,在经与溴乙酸修饰后,最终得到含有羧甲基天冬氨酸结构的琼脂糖凝胶微球.以凝胶微球负载的多羧基为配体分别与Co2+及Ni2+...
以琼脂糖(agarose)凝胶的珠状产品SepharoseCl-6B为基质,以环氧氯丙烷为活化剂,将天冬氨酸固定在琼脂糖凝胶微球上,在经与溴乙酸修饰后,最终得到含有羧甲基天冬氨酸结构的琼脂糖凝胶微球.以凝胶微球负载的多羧基为配体分别与Co2+及Ni2+配位分别得到两种金属螯合亲和层析介质.依照上述方法制备了具有不同负载羧基含量的色谱介质.以六聚组氨酸融合蛋白为分离样品,研究了所制备的色谱分离介质的分离纯化性能,并与商品化色谱分离介质Agarose-NTA-Ni进行了比较.结果表明,目标介质蛋白结合容量大,与蛋白结合快、易洗脱、选择性高,金属离子不易脱落.
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关键词
金属螯合亲和色谱
羧甲基天冬氨酸配体
多聚组氨酸融合蛋白
纯化
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职称材料
题名
金磁微粒介导的盐酸克伦特罗多克隆抗体的纯化
被引量：
2
1
作者
汪慧蓉
朱宏莉
惠文利
张志锋
陈超
崔亚丽
机构
西北大学生物芯片研发中心暨国家微检测系统工程技术研究中心
陕西西大北美基因股份有限公司
出处
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2006年第5期18-22,26,共6页
基金
国家高技术研究发展计划项目(2003AA2Z2080)
国家自然科学基金项目(20273050)
文摘
以重氮化法制备盐酸克伦特罗-牛血清白蛋白(CBL-BSA)抗原并免疫家兔制备多克隆抗体,将表面固定有BSA的金磁微粒(金磁微粒-BSA)与多克隆抗体反应,抗BSA抗体通过抗原抗体反应被吸附在金磁微粒表面,磁性分离,利用ELISA法对纯化前后抗CBL及抗BSA抗体的效价进行测定,确定最佳纯化条件,得到高纯度的抗CBL抗体。结果表明,通过一步反应．可实现载体蛋白BSA在金磁微粒表面的固定化,每毫克金磁微粒固定 BSA的容量可达236 μg;在最佳纯化条件(温度4C,反应时间2h,金磁微粒表面BSA质量与抗体质量比为7:1) 下,金磁微粒-BSA可有效地去除偶联物多克隆抗体中的抗BSA抗体,而纯化前后抗CBL抗体的效价基本保持不变,分离纯化效果较好。该方法可方便、快速地去除多克隆抗体中的无关抗体,对小分子半抗原多克隆抗体的纯化具有重要意义。
关键词
盐酸克伦特罗
金磁微粒
亲和吸附
抗体纯化
Keywords
clenbuterol hydrochloride
GoldMag particles
affinity adsorption
antibody purification
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
纯化组氨酸标签蛋白金属螯合亲和色谱填料的制备与性能
被引量：
3
2
作者
孙永亮
李淑娟
胡道道
崔亚丽
陈超
杨菊香
沈淑坤
机构
陕西师范
大学
化学与材料科学学院
西北大学生物芯片研发中心暨国家微检测系统工程技术研究中心
出处
《陕西师范大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第2期67-71,共5页
基金
国家重点基础研究发展计划项目(2004CB520802)
文摘
以琼脂糖(agarose)凝胶的珠状产品SepharoseCl-6B为基质,以环氧氯丙烷为活化剂,将天冬氨酸固定在琼脂糖凝胶微球上,在经与溴乙酸修饰后,最终得到含有羧甲基天冬氨酸结构的琼脂糖凝胶微球.以凝胶微球负载的多羧基为配体分别与Co2+及Ni2+配位分别得到两种金属螯合亲和层析介质.依照上述方法制备了具有不同负载羧基含量的色谱介质.以六聚组氨酸融合蛋白为分离样品,研究了所制备的色谱分离介质的分离纯化性能,并与商品化色谱分离介质Agarose-NTA-Ni进行了比较.结果表明,目标介质蛋白结合容量大,与蛋白结合快、易洗脱、选择性高,金属离子不易脱落.
关键词
金属螯合亲和色谱
羧甲基天冬氨酸配体
多聚组氨酸融合蛋白
纯化
Keywords
metal chelate affinity chromatography
carboxyrnethylated aspartate ligand
histidinetagged protein
purification
分类号
O631 [理学—高分子化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
金磁微粒介导的盐酸克伦特罗多克隆抗体的纯化
汪慧蓉
朱宏莉
惠文利
张志锋
陈超
崔亚丽
《西北农林科技大学学报（自然科学版）》
CSCD
北大核心
2006
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
纯化组氨酸标签蛋白金属螯合亲和色谱填料的制备与性能
孙永亮
李淑娟
胡道道
崔亚丽
陈超
杨菊香
沈淑坤
《陕西师范大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2007
3
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职称材料
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