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人乳头瘤病毒基因分型液态芯片的应用研究 被引量:5
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作者 党倩丽 陈超 +2 位作者 杜篷 杜艳华 冯捷 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期627-629,共3页
目的:采用人乳头瘤病毒(HPV)液态芯片对HPV感染患者进行基因分型,为早期诊断与治疗HPV感染和宫颈癌提供依据。方法:采用13种HPV基因分型液态芯片,对100例尖锐湿疣及100例宫颈糜烂患者进行HPV基因分型检测。以反向斑点印迹法作为对照检... 目的:采用人乳头瘤病毒(HPV)液态芯片对HPV感染患者进行基因分型,为早期诊断与治疗HPV感染和宫颈癌提供依据。方法:采用13种HPV基因分型液态芯片,对100例尖锐湿疣及100例宫颈糜烂患者进行HPV基因分型检测。以反向斑点印迹法作为对照检测。结果:100例尖锐湿疣患者中感染HPV单一型占78%(其中HPV6占42%,HPV11占36%);混合型占20%,其中高危型占6.3%。宫颈糜烂患者临床标本PCR阳性率为55%;对50例PCR阳性的患者进行HPV分型,其中9例可检出型别,高危型占67%。两种方法检测有较高的一致性,但液态芯片方法更灵敏。结论:HPV基因分型液态芯片可以快速、精确和高通量地对HPV感染标本进行HPV分型检测。 展开更多
关键词 病毒 人乳头瘤 基因分型 芯片 尖锐湿疣 宫颈糜烂
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从猪血中分离纯化高纯度的猪血红蛋白 被引量:12
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作者 周勃 边六交 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期384-387,共4页
为了从猪血中分离纯化高纯度的猪血红蛋白,建立了通过超滤、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换色谱和Sephadex G-75凝胶排阻色谱三步法制备高纯度猪血红蛋白的方法,并通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、高效凝胶排阻色... 为了从猪血中分离纯化高纯度的猪血红蛋白,建立了通过超滤、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换色谱和Sephadex G-75凝胶排阻色谱三步法制备高纯度猪血红蛋白的方法,并通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、高效凝胶排阻色谱和反相高效液相色谱方法,对纯化后的猪血红蛋白进行了鉴定。经三步分离纯化后,猪血红蛋白的纯度大于99%,含量为1.328g/L。 展开更多
关键词 超滤 阴离子交换色谱 凝胶排阻色谱 猪血红蛋白 分离 纯化
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人乳头瘤病毒基因分型液态芯片的构建 被引量:5
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作者 党倩丽 陈超 +2 位作者 杜篷 杜艳华 冯捷 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期461-463,466,共4页
目的:通过构建人乳头瘤病毒基因分型的液态芯片,建立高通量、灵敏和特异的HPV型别检测系统。方法:在LuminexTM平台上,采用国际公认的标准HPV质粒建立13种基因分型HPV芯片,选择引物及探针,将探针有效的偶联到微球上。结果:用LuminexTM平... 目的:通过构建人乳头瘤病毒基因分型的液态芯片,建立高通量、灵敏和特异的HPV型别检测系统。方法:在LuminexTM平台上,采用国际公认的标准HPV质粒建立13种基因分型HPV芯片,选择引物及探针,将探针有效的偶联到微球上。结果:用LuminexTM平台建立了13型HPV芯片,对单一或两种标准质粒混合的样品均可准确分型。对分型检测的阳性标本进行基因测序,经美国NCBI数据库BLAST比对符合其检测型别。结论:利用LuminexTM平台构建了13种HPV型别液相芯片的诊断体系,具有高通量、快速准确等特点,适用于大规模临床样本的HPV基因分型的诊断。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒(HPV) 基因分型 芯片
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人乳头瘤病毒基因分型液态芯片构建中的影响因素 被引量:2
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作者 党倩丽 陈超 +2 位作者 杜篷 杜艳华 冯捷 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期89-91,共3页
目的基于LuminexTM100技术平台,构建人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)基因分型液态芯片;探讨在构建HPV基因分型液态芯片过程中的影响因素。方法在LuminexTM平台上,采用国际公认的标准HPV质粒构建13种基因分型HPV芯片,选择... 目的基于LuminexTM100技术平台,构建人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)基因分型液态芯片;探讨在构建HPV基因分型液态芯片过程中的影响因素。方法在LuminexTM平台上,采用国际公认的标准HPV质粒构建13种基因分型HPV芯片,选择通用引物、探针,将探针有效的偶联到微球上。优化PCR体系和杂交体系,检测反应中PCR浓度、杂交反应时间、微球的时效等对构建芯片的影响,测定标准质粒变异系数(CV)值。结果采用构建的HPV液态芯片,可准确区分HPV基因型。对349例标准样本检测结果进行回代特别函数判别分析,检测准确率在96.7%以上。对构建芯片条件进行分析,杂交反应时间对杂交反应结果在一定的杂交时间内有明显的影响;当PCR产物不同浓度范围时,PCR产物的浓度对荧光值有不同的影响,各型HPV探针CV范围为0.41%~14.69%。结论杂交反应时间、样品PCR反应中的污染、微球的时效和探针的质量等均可以影响液态芯片系统的构建。构建的HPV基因分型液态芯片检测系统,检测性能稳定,具有可重复性,可应用于临床的大量样品的筛查。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 基因分型 芯片
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