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色谱技术在抗体分离纯化中的应用进展 被引量：5
1
作者 刘家玮 唐长伟 +1 位作者 夏一然 白泉 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期533-543,共11页
抗体作为一类重要的生物药物,在疾病诊断和治疗等方面拥有广阔的前景。抗体药物的需求逐年上升,生产规模不断扩大,下游抗体纯化已经成为抗体药物生产的瓶颈。色谱技术具有选择性好、分离效率高等优点,在抗体纯化领域占据主导地位。抗体... 抗体作为一类重要的生物药物,在疾病诊断和治疗等方面拥有广阔的前景。抗体药物的需求逐年上升,生产规模不断扩大,下游抗体纯化已经成为抗体药物生产的瓶颈。色谱技术具有选择性好、分离效率高等优点,在抗体纯化领域占据主导地位。抗体分离纯化流程一般包括样品的粗提、粗提物精制和抗体精纯3个步骤,每个步骤都涉及色谱分离技术。目前已有多种色谱技术(如亲和色谱、离子交换色谱、疏水作用色谱、混合模式色谱以及新型的温敏色谱等)应用于抗体的分离纯化。本文介绍了近年来国内外各种色谱技术在抗体分离纯化方面所取得的研究进展,并对抗体色谱分离技术的未来发展趋势进行了展望。 展开更多
关键词 抗体 色谱技术 分离纯化 亲和色谱 混合模式色谱 温敏色谱 综述
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二氧化硅微球精准制备最新研究亮点
2
作者 白泉 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期1103-1104,共2页
高效液相色谱(HPLC)被广泛用于生物、化工、制药、食品分析、环境保护等领域,是复杂样品分离分析的重要工具。众所周知,色谱分离的核心是色谱填料。二氧化硅微球具有机械强度高、比表面积大和表面易于修饰等优点,已成为应用最广泛的色... 高效液相色谱(HPLC)被广泛用于生物、化工、制药、食品分析、环境保护等领域,是复杂样品分离分析的重要工具。众所周知,色谱分离的核心是色谱填料。二氧化硅微球具有机械强度高、比表面积大和表面易于修饰等优点,已成为应用最广泛的色谱填料基质。目前,高性能的二氧化硅微球大多依赖进口,价格昂贵,且其制备技术多为商业机密。因此,开发简单、经济的HPLC级二氧化硅微球成为研究热点。 展开更多
关键词 二氧化硅微球 商业机密 色谱填料 样品分离 机械强度 色谱分离 研究热点
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嵌段共聚温敏亲和色谱固定相的制备及其对抗体的分离纯化 被引量：3
3
作者 郭冬梅 夏一然 +3 位作者 Mujeeb ur RAHMAN 王建忠 刘家玮 白泉 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1045-1051,共7页
抗体药物在癌症治疗和免疫诊断中起着重要作用,但抗体的分离纯化通常采用酸性洗脱,易导致抗体聚集失活等问题。本研究以硅胶为基质,以温敏嵌段聚合物聚[(N-异丙基丙烯酰胺)-b-4-乙烯基吡啶](P[NIPAM-b-4VP])为间隔臂,以4-巯基乙基吡啶(M... 抗体药物在癌症治疗和免疫诊断中起着重要作用,但抗体的分离纯化通常采用酸性洗脱,易导致抗体聚集失活等问题。本研究以硅胶为基质,以温敏嵌段聚合物聚[(N-异丙基丙烯酰胺)-b-4-乙烯基吡啶](P[NIPAM-b-4VP])为间隔臂,以4-巯基乙基吡啶(MEP)为配基,制备了一种嵌段共聚温敏亲和色谱固定相SiO_(2)-P[NIPAM-b-4VP]-MEP,并以牛血清白蛋白(BSA)和γ-球蛋白为模型蛋白,对制备的温敏亲和色谱固定相的色谱性能进行了表征。分别考察了流动相盐浓度和温度对二者分离性能的影响。结果表明,在40℃时该固定相只选择性保留γ-球蛋白,而不保留BSA;在5℃时采用含0.6 mol/L NaCl的Tris-HCl(pH 8.0)缓冲溶液进行洗脱,γ-球蛋白的质量回收率为92.7%。该固定相对γ-球蛋白的吸附量为(71.5±2.1)mg/g(n=3),是传统温敏亲和色谱固定相SiO_(2)-PNIPAM-MEP的2倍。将该固定相用于人血清中IgG的分离纯化,仅通过改变流动相温度和盐浓度即可一步实现对抗体的分离纯化,纯度大于97.4%±0.7%。上述结果表明该温敏亲和色谱固定相不仅对抗体具有特异的选择性,而且洗脱条件温和,绿色环保,从根本上解决了传统亲和色谱采用酸性洗脱易使抗体蛋白变性失活的难题。该技术在抗体药物的分离纯化和工业生产中具有重要的应用价值。 展开更多
关键词 温敏色谱 亲和色谱 抗体分离 聚(N-异丙基丙烯酰胺) 4-乙烯基吡啶
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核壳型二氧化硅色谱填料的研究进展 被引量：16
4
作者 夏红军 刘家玮 白泉 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期372-382,共11页
复杂样品的高效快速分离分析是分离科学家所面临的挑战。近年来,核壳型二氧化硅色谱填料以其高效、快速和低背压的特点被广泛用于小分子、大分子和复杂样品的快速分离分析。该文系统综述了二氧化硅核壳色谱固定相快速分离的机理,制备方... 复杂样品的高效快速分离分析是分离科学家所面临的挑战。近年来,核壳型二氧化硅色谱填料以其高效、快速和低背压的特点被广泛用于小分子、大分子和复杂样品的快速分离分析。该文系统综述了二氧化硅核壳色谱固定相快速分离的机理,制备方法及其在小分子、多肽和生物大分子快速分离分析方面的应用,同时对核壳型色谱固定相的发展进行了展望。 展开更多
关键词 核壳型色谱固定相 高效液相色谱 快速分离分析 综述
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反相高效液相色谱法测定康肾颗粒中的葛根素 被引量：8
5
作者 陈曼 史键 +1 位作者 王骊丽 耿信笃 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期489-491,共3页
建立了反相高效液相色谱分离、质谱定性、紫外检测定量测定康肾颗粒中葛根素含量的方法。采用YMC．ODS色谱柱（4．6mmi．d．×100mm，10μm），选用甲醇（含0．1％三氟醋酸）和水（含0．1％三氟醋酸）体系为流动相，非线性梯度洗脱... 建立了反相高效液相色谱分离、质谱定性、紫外检测定量测定康肾颗粒中葛根素含量的方法。采用YMC．ODS色谱柱（4．6mmi．d．×100mm，10μm），选用甲醇（含0．1％三氟醋酸）和水（含0．1％三氟醋酸）体系为流动相，非线性梯度洗脱分离，流速1．0mL／min，检测波长250nm；用基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱（MALDI—TOFMS）分析鉴定对照品和样品的馏分，在确定目标峰后进行紫外检测定量测定。结果表明，葛根素在0．132～1．32μg范同内其峰面积与进样量呈良好的线性关系（r=0．9997），平均加标回收率高于103％，相对标准偏差低于2．0％（n=6）。应用该方法测定康肾颗粒中葛根素，其平均含量为3．09mg／g。该方法简单、快速、重现性好. 展开更多
关键词 反相高效液相色谱法 基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱 紫外检测 葛根素 康肾颗粒
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