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现代分离科学理论框架的研究被引量：1: 1; 作者耿信笃张养军《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期433-437,共5页; 分离科学是研究物质在分子水平上的空间分布和移动规律的一门科学。如果这一看法是正确的话,那么,分离科学理论就应该有一个能将各种分离技术原理及支持这些原理的共同理论,即分离科学理论框架。既然分离科学是从分子在空间迁移和分布... 展开更多; 关键词分离科学热力学溶质计量置换保留理论疏水效应分离方法最优化理论骨架; 在线阅读下载PDF 职称材料

人IFN-γ在大肠杆菌中高效表达和色谱复性研究被引量：2: 2; 作者王骊丽耿信笃韩骅《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期540-544,共5页; 从健康人外周血分离单核细胞,经LPS刺激后提取总RNA,用RT-PCR扩增hIFN-γ的cDNA。将扩增产物克隆后进行序列分析证明,克隆的hIFN-γcDNA除存在2个序列多态性位点外,与天然的干扰素氨基酸序列完全一致。利用温控表达系统在大肠杆菌中实现... 展开更多; 关键词人干扰素-γ 反转录聚合酶链反应重组蛋白表达复性与纯化高效疏水色谱; 在线阅读下载PDF 职称材料

α-淀粉酶及α-糜蛋白酶的脲变动力学研究: 3; 作者耿信笃薛卫华卫引茂《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期593-596,共4页; 用疏水色谱(HIC)对8.0mol/L脲变性的α-淀粉酶(α-Amy)和α-糜蛋白酶(α-Chy)的变性动力学进行了研究。结果表明:α-Amy的变性为平缓的渐变过程,其变体数目较多,且绝大多数变体的疏水性都小于天然蛋白;α-Chy是骤变(可能是瞬间变性)过程... 展开更多; 关键词 Α-淀粉酶 Α-糜蛋白酶脲变动力学疏水色谱变性动力学变性机理; 在线阅读下载PDF 职称材料

离子交换色谱流动相组成对溶菌酶复性的影响被引量：4: 4; 作者王彦耿信笃《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期47-51,共5页; 目的　研究了复性缓冲液组成对还原变性溶菌酶复性的影响。方法　用离子交换色谱法对还原变性溶菌酶进行复性。结果　低离子强度的Tris缓冲液比高离子强度的PBS缓冲液能明显提高复性收率;当复性缓冲液中不含其他种类的盐时,脲浓度为2.0m... 展开更多; 关键词离子交换色谱复性缓冲液溶菌酶脲盐; 在线阅读下载PDF 职称材料

摇瓶中重组大肠杆菌生产人γ-干扰素工艺优化: 5; 作者申烨华刘江峰 +1 位作者王骊丽耿信笃《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期571-574,共4页; 目的优化大肠杆菌生产重组人γ-干扰素摇瓶发酵工艺条件，分析摇瓶发酵过程中的制约因素。方法在摇瓶中研究了种子菌龄、接种量和诱导时机等因素对工程菌生产rhlFN-γ和质粒稳定性的影响，及优化条件下工程茵发酵参数。结果最佳条件：... 展开更多; 关键词重组人Γ-干扰素重组大肠杆菌摇瓶发酵; 在线阅读下载PDF 职称材料

突变人GM-CSF基因在大肠杆菌中的表达及纯化: 6; 作者马莉白泉 +1 位作者王骊丽耿信笃《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期63-67,共5页; 目的构建重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的高效表达质粒,将其表达产物用于分离纯化的研究。方法用人外周血单核细胞获得总RNA作为模板和修饰的5′端密码子的引物经RT-PCR反应扩增到人GM-CSF基因,插入温控表达载体pDH构建... 展开更多; 关键词重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子表达大肠杆菌离子交换色谱分离纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名现代分离科学理论框架的研究被引量：1: 1; 作者耿信笃张养军; 机构西北大学现代分离科学研究所/现代分离科学陕西省重点实验室; 出处《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期433-437,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(39880003 20175016); 文摘分离科学是研究物质在分子水平上的空间分布和移动规律的一门科学。如果这一看法是正确的话,那么,分离科学理论就应该有一个能将各种分离技术原理及支持这些原理的共同理论,即分离科学理论框架。既然分离科学是从分子在空间迁移和分布规律的全过程来设计的,该理论必然要涉及到溶质分子在流体中的空间迁移和分布,就必须了解在体系中组分的宏观性质。即1分离过程中的热力学;2溶质的迁移和扩散,因为目前绝大多数组分的分离是在界面(特别是液-固界面)上完成的,这就是3分离过程中发生在界面上的计量置换。然而要从微观上深入了解物质能够被分离的实质便是4平衡分离的分子学基础及5疏水效应。在了解了物质的微观、宏观性质及迁移规律后,如何才能使分离进行得更好,这便是6分离过程中的最优化和选择分离方法时必须对各种分离方法的特点有所了解的,7分离方法的简介和比较。上述七部分内容应当成为现代分离科学的理论骨架。; 关键词分离科学热力学溶质计量置换保留理论疏水效应分离方法最优化理论骨架; Keywords separation science thermodynamics stoichiometric displacement theory for solutes hydrophobic effect separation method optimization theoretical framework; 分类号 TQ028 [化学工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人IFN-γ在大肠杆菌中高效表达和色谱复性研究被引量：2: 2; 作者王骊丽耿信笃韩骅; 机构西北大学现代分离科学研究所/现代分离科学陕西省重点实验室第四军医大学医学遗传学与发育生物学教研室; 出处《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期540-544,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.29675017); 文摘从健康人外周血分离单核细胞,经LPS刺激后提取总RNA,用RT-PCR扩增hIFN-γ的cDNA。将扩增产物克隆后进行序列分析证明,克隆的hIFN-γcDNA除存在2个序列多态性位点外,与天然的干扰素氨基酸序列完全一致。利用温控表达系统在大肠杆菌中实现了hIFN-γ的高效表达,表达的目的蛋白可占菌体总蛋白的55%。用5L和50L发酵罐放量生产的产物,经高效疏水色谱HPHIC直接复性和纯化得到了重组hIFN-γ纯品,其比活性与天然蛋白相近。; 关键词人干扰素-γ 反转录聚合酶链反应重组蛋白表达复性与纯化高效疏水色谱; Keywords hIFN-γ RT-PCR high expression of recombinant protein Hydrophobic interaction chromatography renaturation and purification; 分类号 R318 [医药卫生—生物医学工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名α-淀粉酶及α-糜蛋白酶的脲变动力学研究: 3; 作者耿信笃薛卫华卫引茂; 机构西北大学现代分离科学研究所/现代分离科学陕西省重点实验室; 出处《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期593-596,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(29675017 39880003); 文摘用疏水色谱(HIC)对8.0mol/L脲变性的α-淀粉酶(α-Amy)和α-糜蛋白酶(α-Chy)的变性动力学进行了研究。结果表明:α-Amy的变性为平缓的渐变过程,其变体数目较多,且绝大多数变体的疏水性都小于天然蛋白;α-Chy是骤变(可能是瞬间变性)过程,相对而言α-Chy的变体数目较少,且疏水性均大于天然蛋白。认为两种蛋白不同的脲变动力学行为,可能是因蛋白中α-螺旋含量以及蛋白质自身稳定性不同所致。; 关键词 Α-淀粉酶 Α-糜蛋白酶脲变动力学疏水色谱变性动力学变性机理; Keywords hydrophobic interaction chromatography urea kinetics α-Amylase α-Chymotrypsin; 分类号 Q556.9 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名离子交换色谱流动相组成对溶菌酶复性的影响被引量：4: 4; 作者王彦耿信笃; 机构西北大学现代分离科学研究所/现代分离科学陕西省重点实验室; 出处《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期47-51,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(20175016); 文摘目的　研究了复性缓冲液组成对还原变性溶菌酶复性的影响。方法　用离子交换色谱法对还原变性溶菌酶进行复性。结果　低离子强度的Tris缓冲液比高离子强度的PBS缓冲液能明显提高复性收率;当复性缓冲液中不含其他种类的盐时,脲浓度为2.0mol/L时复性产率最高;当脲浓度低时,复性缓冲液中含有氯化钠和硫酸铵的复性效果均不如不含这些盐的复性效果;当脲浓度高时,硫酸铵能很好地提高溶菌酶的复性回收率。结论　认为Hofmeister效应是造成这些现象的主要原因。; 关键词离子交换色谱复性缓冲液溶菌酶脲盐; Keywords ionexchange chromatography the renaturation buffer lysozyme urea salt; 分类号 TQ028.33 [化学工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名摇瓶中重组大肠杆菌生产人γ-干扰素工艺优化: 5; 作者申烨华刘江峰王骊丽耿信笃; 机构西北大学现代分离科学研究所/现代分离科学陕西省重点实验室; 出处《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期571-574,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(296701739880003); 文摘目的优化大肠杆菌生产重组人γ-干扰素摇瓶发酵工艺条件，分析摇瓶发酵过程中的制约因素。方法在摇瓶中研究了种子菌龄、接种量和诱导时机等因素对工程菌生产rhlFN-γ和质粒稳定性的影响，及优化条件下工程茵发酵参数。结果最佳条件：种子液为OD6000．5—1．5，接种量为6％，培养至OD600为1．5时42℃诱导表达4h。在此条件下，在摇瓶中使用M9II培养基时，质粒无丢失，摇瓶中rhlFN-γ的表达量占菌体总蛋白的43．2％，光密度为3．3。对发酵过程中总糖、还原糖、总氮和pH的分析表明，发酵过程中培养基中碳源、氮源丰富，而溶解氧的不足和pH值偏酸性可能是整个培养过程的限制性因素。结论构建的工程菌发酵的稳定性和重复性良好，为rhlFN-γ的大规模生产提供可靠的放大依据。; 关键词重组人Γ-干扰素重组大肠杆菌摇瓶发酵; Keywords recombinant human interferon-γ recombinant E. Coli fermentation in shaking flash; 分类号 TQ920.6 [轻工技术与工程—发酵工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名突变人GM-CSF基因在大肠杆菌中的表达及纯化: 6; 作者马莉白泉王骊丽耿信笃; 机构西北大学现代分离科学研究所/现代分离科学陕西省重点实验室; 出处《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期63-67,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(20175016); 文摘目的构建重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的高效表达质粒,将其表达产物用于分离纯化的研究。方法用人外周血单核细胞获得总RNA作为模板和修饰的5′端密码子的引物经RT-PCR反应扩增到人GM-CSF基因,插入温控表达载体pDH构建了突变的hGM-CSF表达质粒,并将在E.coli中获得表达的突变rhGM-CSF包含体8 mol/L脲提取液进一步用离子交换色谱柱分离纯化。结果rhGM-CSF在大肠杆菌表达占菌体总蛋白量的22%,用弱阴离子交换色谱对rhGM-CSF的工程菌表达产物8 mol/L脲提取液直接经35 m in分离纯化,所得产物纯度可达95%,质量回收率可达到60%。结论这表明用离子交换色谱可进行rhGM-CSF的复性与同时纯化。; 关键词重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子表达大肠杆菌离子交换色谱分离纯化; Keywords rhGM-CSF expression E. coli weak anion exchange chromatography purification; 分类号 R318 [医药卫生—生物医学工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	现代分离科学理论框架的研究	耿信笃张养军	《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2002	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	人IFN-γ在大肠杆菌中高效表达和色谱复性研究	王骊丽耿信笃韩骅	《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2003	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	α-淀粉酶及α-糜蛋白酶的脲变动力学研究	耿信笃薛卫华卫引茂	《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2002	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	离子交换色谱流动相组成对溶菌酶复性的影响	王彦耿信笃	《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2004	4	在线阅读下载PDF 职称材料
5	摇瓶中重组大肠杆菌生产人γ-干扰素工艺优化	申烨华刘江峰王骊丽耿信笃	《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2006	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	突变人GM-CSF基因在大肠杆菌中的表达及纯化	马莉白泉王骊丽耿信笃	《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2006	0	在线阅读下载PDF 职称材料