牛早期胚胎体外发育条件的研究 被引量：5

1

作者 刘俊平 张琇 +2 位作者 安志兴 徐永平 张涌 《黄牛杂志》 2004年第2期29-31,共3页

本试验研究了精卵共育时间和培养液等因素对牛早期胚胎体外发育的影响。精卵共育6～12h能显著提高受精卵的囊胚发育率,受精卵的囊胚发育率为23.2%～25.3%,共育时间为24h时,囊胚发育率降低,但精卵共育6h时卵裂率较低;TCM199、mBECMaa、mS... 本试验研究了精卵共育时间和培养液等因素对牛早期胚胎体外发育的影响。精卵共育6～12h能显著提高受精卵的囊胚发育率,受精卵的囊胚发育率为23.2%～25.3%,共育时间为24h时,囊胚发育率降低,但精卵共育6h时卵裂率较低;TCM199、mBECMaa、mSOFaa均能支持体外受精卵的发育,其囊胚发育率分别为18%、30.7%和29.2%。试验结果表明:精卵于BM受精液中共育9h后,将其置于添加5%OCS的mBECMaa或mSOFaa中培养,能得到较高的体外生产胚胎的囊胚发育率。 展开更多

关键词 牛 早期胚胎 体外发育 精卵共育时间 培养液 囊胚发育率

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哺乳动物核移植技术研究进展 被引量：1

2

作者 温叶飞 侯正录 +1 位作者 蓝贤勇 安志兴 《黄牛杂志》 2003年第4期27-31,共5页

随着多种克隆动物的相继诞生,人们越来越关注哺乳动物核移植技术的发展。随着核移植技术的逐步成熟,必将给畜牧业和医学等研究领域带来深远影响。本文综述了哺乳动物核移植技术的研究现状、相关机理及方法的研究,并就存在的问题和应用... 随着多种克隆动物的相继诞生,人们越来越关注哺乳动物核移植技术的发展。随着核移植技术的逐步成熟,必将给畜牧业和医学等研究领域带来深远影响。本文综述了哺乳动物核移植技术的研究现状、相关机理及方法的研究,并就存在的问题和应用前景进行了阐述。 展开更多

关键词 哺乳动物 核移植技术 机理 现状 “檀香山”技术 应用前景 生产效率 端粒 克隆动物年龄

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牛β-乳球蛋白基因5′调控成分的分离、克隆及序列分析 被引量：5

3

作者 石玉强 张涌 +2 位作者 郑月茂 刘建忠 张志平 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2003年第3期1-4,共4页

利用 PCR方法克隆了牛 β-乳球蛋白基因 5′调控成分 (1 4 4 9bp) ,其中包括 5′侧翼序列 (6 4 5 bp) ,第一外显子及第一内含子 (80 4 bp)。PCR产物回收纯化后 ,克隆在 p MD1 8- T Vector的 T位点。序列分析表明 ,该序列与牛 β-乳球蛋... 利用 PCR方法克隆了牛 β-乳球蛋白基因 5′调控成分 (1 4 4 9bp) ,其中包括 5′侧翼序列 (6 4 5 bp) ,第一外显子及第一内含子 (80 4 bp)。PCR产物回收纯化后 ,克隆在 p MD1 8- T Vector的 T位点。序列分析表明 ,该序列与牛 β-乳球蛋白 A型基因、牛 β-乳球蛋白 B型基因、山羊和绵羊 β-乳球蛋白基因的同源性分别为 98.5 5 % ,99.79% ,90 .70 %和 90 .0 9%。计算机分析表明 ,此调控成分含有诸多调节因子结合位点或反应元件 ,其中包括视黄酸反应元件 (RARE)、佛波酯反应元件 (TRE)、乳腺特异性因子 (MSBF)和核因子 1 (NF1 )结合位点等 ,提示此调控成分可调控外源基因在乳腺细胞中高效表达 。 展开更多

关键词 牛 Β-乳球蛋白基因 PCR 序列分析 基因调控 乳腺生物反应器 生长激素基因 基因分离 基因克隆

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山羊胚胎脊髓灰质的发育 被引量：3

4

作者 张涌 徐永平 +3 位作者 郑月茂 卿素珠 赵慧英 曹贵方 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2003年第2期13-18,共6页

对山羊胚胎脊髓灰质形成和发育的形态学变化进行了系统研究。结果表明 :山羊脊髓神经管闭合以后 ,其组织发生持续近 2 0 d才形成完整的 3层同心圆结构 ;山羊脊髓神经管的组织发生和脊髓灰质的形成在时间上有很大程度的重叠性 ;脊髓灰质... 对山羊胚胎脊髓灰质形成和发育的形态学变化进行了系统研究。结果表明 :山羊脊髓神经管闭合以后 ,其组织发生持续近 2 0 d才形成完整的 3层同心圆结构 ;山羊脊髓神经管的组织发生和脊髓灰质的形成在时间上有很大程度的重叠性 ;脊髓灰质各结构形成和发育的规律也不完全一致 ,有些结构发生早 ,而神经元分化较晚 ,如侧角、胶状质 ;有些结构发生虽然晚 ,但其中的神经元胞体分化和发育则较早 ,如 Clarke氏背核 ;有些结构发生早 ,神经元发育也早 ,如腹角运动神经元。 展开更多

关键词 山羊 胚胎 脊髓灰质 形成 发育 形态学 组织发生 中枢神经系统

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人骨形成蛋白3基因cDNA部分序列的RT-PCR克隆 被引量：3

5

作者 张涌 戴博 +1 位作者 刘建忠 郑月茂 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2003年第2期1-5,共5页

针对人骨形成蛋白 3基因的 c DNA序列设计引物 ,通过反转录 PCR技术 ,从人骨纤维肉瘤组织中扩增出目的片段。从胶中回收目的片段 ,将其与 p MD18- T载体连接 ,转化大肠杆菌 DH 5α后 ,经 H ind 酶切鉴定 ,进行测序。结果显示所得到的片... 针对人骨形成蛋白 3基因的 c DNA序列设计引物 ,通过反转录 PCR技术 ,从人骨纤维肉瘤组织中扩增出目的片段。从胶中回收目的片段 ,将其与 p MD18- T载体连接 ,转化大肠杆菌 DH 5α后 ,经 H ind 酶切鉴定 ,进行测序。结果显示所得到的片段大小为 84 5 bp,与所设计的序列同源性为 10 0 % ,说明已经成功地扩增、克隆了人骨形成蛋白 3(h BMP- 3)基因 c DNA的大部分序列。 展开更多

关键词 人骨形成蛋白3基因 CDNA序列 RT-PCR 基因克隆 骨形成蛋白 转基因动物乳腺

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山羊胚胎肝脏组织发生的形态学观察 被引量：4

6

作者 蒲鹏 徐永平 +3 位作者 卿素珠 郑月茂 张涌 刘方正 《动物医学进展》 CSCD 2002年第6期86-88,共3页

运用常规光镜技术对关中奶山羊胚胎期肝脏的发育进行了组织学研究 ,结果表明 :早在 50日胚龄的肝组织中 ,就已经形成血管、窦状隙、幼稚型血细胞和成熟的红细胞。随着胎龄的增长 ,窦状隙先增大 ,然后减小。小叶间胆管在大约 6 0日胚龄... 运用常规光镜技术对关中奶山羊胚胎期肝脏的发育进行了组织学研究 ,结果表明 :早在 50日胚龄的肝组织中 ,就已经形成血管、窦状隙、幼稚型血细胞和成熟的红细胞。随着胎龄的增长 ,窦状隙先增大 ,然后减小。小叶间胆管在大约 6 0日胚龄形成。小叶间动脉在大约 6 6日胚龄形成 ,并且此时造血灶的数量最多。肝板在 1 0 展开更多

关键词 山羊 胚胎 脏脏组织发生 形态学

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由体外受精囊胚获得ICR小鼠ES细胞 被引量：3

7

作者 时伟红 安志兴 +3 位作者 董婉维 秦英 王碌增 王太一 《动物医学进展》 CSCD 2002年第4期97-99,共3页

收集鼠卵母细胞和精子 ,采用体外受精技术 ,获得早期胚胎。体外培养胚胎至囊胚 ,分离内细胞团 ,获得 ICR小鼠的 ES细胞。结果不但获得了来自体外受精囊胚的 ICR小鼠 ES细胞 ,而且表明用体外受精方法获得的小鼠早期胚胎的数量明显大于常... 收集鼠卵母细胞和精子 ,采用体外受精技术 ,获得早期胚胎。体外培养胚胎至囊胚 ,分离内细胞团 ,获得 ICR小鼠的 ES细胞。结果不但获得了来自体外受精囊胚的 ICR小鼠 ES细胞 ,而且表明用体外受精方法获得的小鼠早期胚胎的数量明显大于常规方法 ,且比较稳定。ICR小鼠 ES细胞的获得 ,为研究小鼠的 ES细胞分化提供了条件。 展开更多

关键词 体外受精囊胚 ES细胞 小鼠 胚胎干细胞

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猪传染性胃肠炎病毒S与M基因融合表达载体及IRES连接双基因共表达载体的构建 被引量：3

8

作者 贺小英 彭树英 +1 位作者 杨瑞锋 张涌 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2006年第6期34-37,共4页

目的:研究如何提高猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)中主要抗原基因S与M基因对猪传染性胃肠炎的免疫调节作用,进一步探究基因疫苗的有效开发途径。方法:通过两种方法应用牛β酪蛋白启动子构建S和M融合基因表达载体以及构建IRES连接M和S双基因... 目的:研究如何提高猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)中主要抗原基因S与M基因对猪传染性胃肠炎的免疫调节作用,进一步探究基因疫苗的有效开发途径。方法:通过两种方法应用牛β酪蛋白启动子构建S和M融合基因表达载体以及构建IRES连接M和S双基因共表达核酸疫苗载体。结论:成功构建好M和S融合基因表达载体及IRES连接的M和S双基因真核共表达载体,并为利用乳腺生物反应器生产可食性疫苗提供有效措施。 展开更多

关键词 核酸疫苗 IRES 融合基因 共表达载体

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人胰岛素样生长因子Ⅱ基因的克隆与表达 被引量：2

9

作者 王保莉 王凤泽 +1 位作者 张涌 郭蔼光 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2003年第5期133-135,共3页

　采用RT-PCR方法成功地从人胎盘组织扩增出hIGF- 基因。将其连入表达载体pET30a(+)质粒中,SDS-PAGE结果证明,pET30a(+)-hIGF- 在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,目的蛋白占总菌体蛋白35%左右。

关键词 人胰岛素样 生长因子 基因克隆 基因表达 RT—PCR方法 表达载体 质粒

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山羊胎期肺的组织发生 被引量：3

10

作者 张涌 郑月茂 《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第2期6-12,共7页

研究了山羊胎期肺的组织发生 ,将肺的发育分为 5个时期 :1胚胎期 (3～ 5周 ) ,肺芽分支形成主支气管 ,主支气管长度不断增长并萌芽出叶支气管 ,均衬以假复层柱状上皮 ;2腺状期 (6～ 12周 ) ,以支气管树发育为主 ,小支气管及终蕾衬以假... 研究了山羊胎期肺的组织发生 ,将肺的发育分为 5个时期 :1胚胎期 (3～ 5周 ) ,肺芽分支形成主支气管 ,主支气管长度不断增长并萌芽出叶支气管 ,均衬以假复层柱状上皮 ;2腺状期 (6～ 12周 ) ,以支气管树发育为主 ,小支气管及终蕾衬以假复层和 /或单层柱状上皮 ;3小管期 (13～ 14周 ) ,以呼吸部发育为主 ,原始肺泡开始形成 ,呼吸性细支气管和原始肺泡衬以未分化的立方上皮 ;4囊状期 (第 15周 ) ,呼吸部发育显著 ,肺内细支气管及其末端呈现出“充气”状态 ;5肺泡期 (16～ 2 2周 ) ,以肺泡的形成和分化为主 ,肺泡上皮分化为扁平的肺泡 型细胞和立方形的肺泡 展开更多

关键词 胎期肺 组织发生 山羊 发生程序 囊状期

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人SOD基因的克隆与原核表达 被引量：3

11

作者 宋凯 宋继梅 《动物医学进展》 CSCD 2006年第12期91-94,共4页

超氧化物歧化酶(SOD)是机体内超氧自由基的天然清除剂,在抗衰老、抗辐射、抗逆境,消炎、抑制肿瘤和癌症,以及自身免疫疾病的治疗方面有很重要的作用。我国目前主要从血液中提取SOD,有关重组人SOD的研究较少。文章通过RT-PCR方法克隆得到... 超氧化物歧化酶(SOD)是机体内超氧自由基的天然清除剂,在抗衰老、抗辐射、抗逆境,消炎、抑制肿瘤和癌症,以及自身免疫疾病的治疗方面有很重要的作用。我国目前主要从血液中提取SOD,有关重组人SOD的研究较少。文章通过RT-PCR方法克隆得到人SOD基因,并成功构建其原核表达载体pET-16b-SOD,为通过基因重组技术生产人SOD创造了条件。 展开更多

关键词 人超氧化物歧化酶 基因克隆 原核表达

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山羊有腔卵泡中TGFβ2基因表达 被引量：1

12

作者 王保莉 张涌 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2001年第5期1-4,共4页

采用 RT- PCR技术对关中奶山羊不同大小的有腔卵泡的卵泡膜细胞、颗粒细胞和卵丘卵母细胞复合体中转化生长因子 β2 (TGFβ2 )的基因表达进行了测定。结果表明 ,在有腔卵泡的各个时期都有 TGFβ2 基因表达 ;在卵泡膜、颗粒细胞和卵丘卵... 采用 RT- PCR技术对关中奶山羊不同大小的有腔卵泡的卵泡膜细胞、颗粒细胞和卵丘卵母细胞复合体中转化生长因子 β2 (TGFβ2 )的基因表达进行了测定。结果表明 ,在有腔卵泡的各个时期都有 TGFβ2 基因表达 ;在卵泡膜、颗粒细胞和卵丘卵母细胞复合体中也检测到了该生长因子的 m RNA。推测 TGFβ2 展开更多

关键词 山羊 有腔卵泡 TGFΒ2 基因表达

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添加不同发情时期山羊血清对牛胚胎体外发育的影响 被引量：3

13

作者 张志平 安志兴 +2 位作者 李向臣 王超 张涌 《黄牛杂志》 2003年第1期16-18,共3页

为了提高牛体外胚胎囊胚发育率 ,添加不同发情时期山羊血清对牛胚胎进行体外培养。分别采集发情周期 D0、D2、D4和 D7山羊血清 (发情当天为 D0 ) ,灭活除菌备用。结果表明不同发情时期羊血清对孤雌激活胚胎卵裂率影响差异不显著 ,囊胚... 为了提高牛体外胚胎囊胚发育率 ,添加不同发情时期山羊血清对牛胚胎进行体外培养。分别采集发情周期 D0、D2、D4和 D7山羊血清 (发情当天为 D0 ) ,灭活除菌备用。结果表明不同发情时期羊血清对孤雌激活胚胎卵裂率影响差异不显著 ,囊胚发育率分别为 2 9.5 %、32 .4%、33.9%和41 .3% ,D7血清能显著提高囊胚发育率 ( P<0 .0 5 ) ,且扩张和孵化胚出现较早。添加 D0血清体外受精胚胎卵裂率较高 ,但对囊胚发育率影响差异不显著。说明孤雌激活和体外受精胚胎发育有差异 ,D7血清对胚胎后期发育有利。受精胚无血清培养 3d后添加 D7血清 ,囊胚发育率为 42 .9% ,是较为理想的培养方法。 展开更多

关键词 山羊血清 牛胚胎 胚胎发育 体外培养 孤紫激活 体外受精 胚胎培养

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山羊胚胎肝脏发育的超微结构观察

14

作者 蒲鹏 郑月茂 +2 位作者 卿素珠 徐永平 张涌 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2003年第2期19-21,24,共4页

运用透射电子显微镜对山羊胚胎期肝脏进行了超微结构观察。结果表明 ,山羊肝细胞在胚胎早期就有明暗之分。胆小管在胚胎早期已经形成 ,胆管由肝母细胞演化而来 ;窦状隙随机发生 ;肝脏造血以红细胞为主 ,且随胚胎的发育 ,造血功能逐渐降低。

关键词 山羊 胚胎期 肝脏发育 超微结构 胆小管 胆管 窦状隙

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山羊胎儿肺泡上皮的电镜观察

15

作者 郑月茂 张涌 +2 位作者 徐永平 卿素珠 蒲鹏 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2002年第3期6-8,共3页

对山羊胎儿肺泡上皮进行透射电镜观察 ,结果表明 :腺状期 (第 6～ 12周 ) ,终蕾上皮细胞胞质内线粒体、粗面内质网及核糖体随着胎龄增加而逐渐增多 ,胞核向细胞顶端移行 ;小管期 (第 13～ 14周 ) ,终蕾上皮由单层柱状上皮逐渐演变为立... 对山羊胎儿肺泡上皮进行透射电镜观察 ,结果表明 :腺状期 (第 6～ 12周 ) ,终蕾上皮细胞胞质内线粒体、粗面内质网及核糖体随着胎龄增加而逐渐增多 ,胞核向细胞顶端移行 ;小管期 (第 13～ 14周 ) ,终蕾上皮由单层柱状上皮逐渐演变为立方形的原始肺泡上皮 ,胞质内线粒体、粗面内质网及核糖体较发达 ;囊状期 (第 15周 ) ,肺泡上皮细胞开始分化为 型细胞和 型细胞 ,嗜锇小体首次出现 ,气血屏障开始建立 ;肺泡期 (第 16～ 2 2周 ) ,以肺泡的形成和分化为主 , 型细胞的超微结构特征为嗜锇小体出现 ,核糖体显著增多 ,粗面内质网池扩张 ,线粒体膨大 ,出现多泡体。 展开更多

关键词 山羊 胎儿 肺泡上皮 电镜观察

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山羊胚胎脊髓胶状质的形成和发育

16

作者 徐永平 郑月茂 +1 位作者 卿素珠 张涌 《动物医学进展》 CSCD 2002年第3期95-98,共4页

对山羊胚胎脊髓胶状质发育的形态学变化进行了系统研究 ,结果表明 :1山羊脊髓胶状质在胚胎第 1 7周以后逐渐出现较多的神经元胞体和较大的淡染的神经元细胞核 ,提示胚胎第 1 7周龄是山羊脊髓胶状质神经元发育的关键时期 ;2山羊脊髓胶状... 对山羊胚胎脊髓胶状质发育的形态学变化进行了系统研究 ,结果表明 :1山羊脊髓胶状质在胚胎第 1 7周以后逐渐出现较多的神经元胞体和较大的淡染的神经元细胞核 ,提示胚胎第 1 7周龄是山羊脊髓胶状质神经元发育的关键时期 ;2山羊脊髓胶状质内神经纤维在胚胎第 1 1周时就已出现 ,而有髓神经纤维的髓鞘则在胚胎第 1 5周时形成 ,以后逐渐发育成熟 ;3山羊脊髓胶状质的胶质细胞发育较早 ,在胚胎第 6周末胶状质原基刚形成时 ,胶质细胞核已经开始分化 ,到胚胎第 1 8～ 1 9周时 。 展开更多

关键词 山羊胚胎 脊髓 胶状质 形成 发育

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山羊TGFβ_2部分cDNA的扩增和序列分析

17

作者 王保莉 张涌 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2001年第4期1-4,共4页

在人和小鼠等的 TGFβ2 基因序列基础上 ,选用 1对同源性引物 ,采用反转录 -聚合酶链反应 (RT-PCR)技术从山羊卵泡总 RNA中扩增出 2 73bp的 TGFβ2 c DNA片段 ,进行序列测定 ,由此 c DNA序列推出了相应的 TGFβ2 蛋白分子的氨基酸排列... 在人和小鼠等的 TGFβ2 基因序列基础上 ,选用 1对同源性引物 ,采用反转录 -聚合酶链反应 (RT-PCR)技术从山羊卵泡总 RNA中扩增出 2 73bp的 TGFβ2 c DNA片段 ,进行序列测定 ,由此 c DNA序列推出了相应的 TGFβ2 蛋白分子的氨基酸排列。比较了山羊与人、小鼠、大鼠的 TGFβ2 部分 c DNA核苷酸的同源性和氨基酸的相似性 ,核苷酸同源性分别为 91.9% ,87.5 %和 88.6 % ;氨基酸相似性分别为 97.8% ,96 .7%和 96 .7%。 展开更多

关键词 TGFΒ2 CDNA 山羊 RT-PCR 序列分析 转化生长因子

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人溶菌酶基因cDNA的克隆和序列分析 被引量：3

18

作者 何晓宁 彭树英 +3 位作者 杨瑞锋 刘凤军 郑月茂 张涌 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第11期2333-2335,共3页

根据GenBank中的人溶菌酶(hLYZ)mRNA序列设计引物,以人胎盘组织总RNA为模板,通过RT-PCR方法扩增出长度为0.85 kb的hLYZ cDNA序列,经过序列测定表明所克隆的片段与已发表的hLYZ cDNA序列的同源性为99%。推导的氨基酸序列经blastp分析与... 根据GenBank中的人溶菌酶(hLYZ)mRNA序列设计引物,以人胎盘组织总RNA为模板,通过RT-PCR方法扩增出长度为0.85 kb的hLYZ cDNA序列,经过序列测定表明所克隆的片段与已发表的hLYZ cDNA序列的同源性为99%。推导的氨基酸序列经blastp分析与人溶菌酶蛋白质前体的同源性为97%,成熟肽的同源性为99%,为进一步构建人溶菌酶基因乳腺特异性表达载体奠定了基础。 展开更多

关键词 人溶茵酶 CDNA 克隆 序列分析

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