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通过重叠PCR构建2个增强型植物花特异双向启动子
被引量：
2
1
作者
张雄飞
刘雅莉
+2 位作者
娄倩
祁银燕
杜灵娟
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期34-41,共8页
基于植物基因工程要求精确调控的目标,为转基因提供更多可供选择的启动子,使用重叠延伸PCR的方法设计并人工构建了2个增强型植物花特异双向启动子pPCHS-35Senhancer-pLCHS和pPCHS-OCS enhancer-pLCHS。实验中,用本实验室保存的矮牵牛花...
基于植物基因工程要求精确调控的目标,为转基因提供更多可供选择的启动子,使用重叠延伸PCR的方法设计并人工构建了2个增强型植物花特异双向启动子pPCHS-35Senhancer-pLCHS和pPCHS-OCS enhancer-pLCHS。实验中,用本实验室保存的矮牵牛花特异启动子核心序列pPCHS、百合花特异启动子核心序列pLCHS、CaMV 35S增强子序列(35Senhancer)、OCS增强子序列(OCS enhancer)为模板,根据重叠延伸PCR原理,设计并合成了10条引物,进行两轮PCR,产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定,成功拼接出了与设计的双向启动子大小一致的2段序列。使用DAN回收试剂盒回收两段序列,克隆到pGEM-T Easy载体中并导入大肠埃希菌TOP10进行扩繁和保存,扩繁菌液进行测序分析,测序证实得到的两段序列与设计的双向启动子序列完全一致,成功获得2个增强型植物花特异双向启动子。本研究的结果能为今后利用多基因共转化的方法精确调控矮牵牛、百合等重要花卉的观赏性状提供有用的启动子。
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关键词
启动子
增强子
重叠延伸PCR
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职称材料
题名
通过重叠PCR构建2个增强型植物花特异双向启动子
被引量：
2
1
作者
张雄飞
刘雅莉
娄倩
祁银燕
杜灵娟
机构
西北农林科技大学旱区作物逆境生物学国家重点实验室/农业部西北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室
西北农林科技大学
林学院
西北农林科技大学
园艺
学院
出处
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第1期34-41,共8页
基金
国家自然科学基金资助项目(30871734)
文摘
基于植物基因工程要求精确调控的目标,为转基因提供更多可供选择的启动子,使用重叠延伸PCR的方法设计并人工构建了2个增强型植物花特异双向启动子pPCHS-35Senhancer-pLCHS和pPCHS-OCS enhancer-pLCHS。实验中,用本实验室保存的矮牵牛花特异启动子核心序列pPCHS、百合花特异启动子核心序列pLCHS、CaMV 35S增强子序列(35Senhancer)、OCS增强子序列(OCS enhancer)为模板,根据重叠延伸PCR原理,设计并合成了10条引物,进行两轮PCR,产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定,成功拼接出了与设计的双向启动子大小一致的2段序列。使用DAN回收试剂盒回收两段序列,克隆到pGEM-T Easy载体中并导入大肠埃希菌TOP10进行扩繁和保存,扩繁菌液进行测序分析,测序证实得到的两段序列与设计的双向启动子序列完全一致,成功获得2个增强型植物花特异双向启动子。本研究的结果能为今后利用多基因共转化的方法精确调控矮牵牛、百合等重要花卉的观赏性状提供有用的启动子。
关键词
启动子
增强子
重叠延伸PCR
Keywords
promoter
enhancer
overlap extension PCR
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
S68 [农业科学—观赏园艺]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
通过重叠PCR构建2个增强型植物花特异双向启动子
张雄飞
刘雅莉
娄倩
祁银燕
杜灵娟
《浙江大学学报（农业与生命科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2013
2
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