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山羊胚胎小脑皮质的形成和发育被引量：7: 1; 作者徐永平张涌 +3 位作者郑月茂卿素珠赵慧英蒲鹏《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2004年第2期87-90,共4页; 　对山羊胚胎小脑皮质形成及其神经元发育的形态学变化进行了研究。结果表明:(1)山羊胚胎小脑形成于第6周末,小脑皮质的外颗粒层、分子层首先形成。(2)发育过程中,山羊胚胎小脑的外颗粒层呈现出非常复杂的变化趋势:第7～10周外颗粒层达... 展开更多; 关键词山羊胚胎小脑皮质形成发育中枢神经形态学; 在线阅读下载PDF 职称材料

绵羊精子提取物对卵母细胞的孤雌激活作用被引量：5: 2; 作者赛务加甫张立 +6 位作者彭新荣郭志林杨丽李向臣何宽军安志兴张涌《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2006年第7期9-12,16,共5页; 研究了绵羊精子提取物对绵羊卵母细胞的孤雌激活作用，确定了绵羊精子提取物的最佳注射剂量，并将其孤雌激活效果与离子霉素联合6-DMAP法的激活效果进行了比较。结果表明，绵羊精子提取物对绵羊卵母细胞有孤雌激活作用，最佳注射剂量为... 展开更多; 关键词绵羊精子提取物卵母细胞孤雌激活显微注射; 在线阅读下载PDF 职称材料

5-Aza-CdR联合TSA对牛核移植胚胎体外发育及表观遗传状态的影响被引量：6: 3; 作者胡广卫苏建民 +3 位作者曹泽磊丁向彬王勇胜张涌《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2009年第12期1-5,10,共6页; 【目的】探讨5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-2-′Deoxycytidine,5-Aza-CdR)联合曲古抑菌素A(Trichosta-tin A,TSA)对牛核移植胚胎体外发育及其表观遗传状态的影响。【方法】以体外受精胚胎作为对照组,将部分体细胞、核移植胚胎以及体细胞... 展开更多; 关键词体细胞核移植克隆胚胎 5-氮杂2’-脱氧胞苷曲古抑菌素A 牛体外发育表现遗传状态; 在线阅读下载PDF 职称材料

小鼠卵母细胞化学去核及手工构建核移植胚胎被引量：5: 4; 作者赵禹刘军 +3 位作者王保垒张拓刘根胜张涌《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第10期102-106,共5页; 为优化脱羰秋水仙碱(DC)诱导去核程序,研究以DC去核卵母细胞为核受体的、无透明带体细胞核移植方法在小鼠体细胞核移植中的应用,试验比较了乙醇、SrCl2两种激活方法及脱羰秋水仙碱处理开始时间对小鼠MⅡ期卵母细胞去核效率的影响;将DC... 展开更多; 关键词小鼠化学去核无透明带手工克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

亮甲酚蓝染色法筛选卵母细胞对牛体细胞克隆胚体外发育的影响被引量：3: 5; 作者曹泽磊苏建民 +3 位作者胡广卫王勇胜唐爽张涌《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第9期24-28,共5页; 为探索用亮甲酚蓝染色法筛选卵母细胞是否有利于牛体细胞克隆胚的体外发育,将采集的卵母细胞分成3组:对照组,采集后的卵母细胞直接放入成熟液培养,不用亮甲酚蓝处理;控制对照组,卵母细胞于PBS中放置90 min后放入成熟液中培养;试验组,将... 展开更多; 关键词亮甲酚蓝牛卵母细胞体细胞核移植; 在线阅读下载PDF 职称材料

出生前山羊小脑皮质神经元超微结构的观察被引量：1: 6; 作者徐永平郑月茂 +3 位作者赵慧英张涌蒲鹏卿素珠《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2004年第11期1-5,共5页; 　应用超薄切片技术研究了第6周到出生前山羊小脑皮质神经元超微结构发育的变化。结果表明:(1)出生前山羊小脑皮质内颗粒层细胞在第10周龄以前一直处于未分化状态,第10周龄以后开始分化,但直到出生前山羊小脑皮质内颗粒层细胞内细胞器... 展开更多; 关键词山羊小脑皮质神经元超微结构发育; 在线阅读下载PDF 职称材料

pEGFP-hTERT真核表达载体的构建及转染牛乳腺细胞方法的优化被引量：6: 7; 作者闫晶贺小英 +2 位作者潘春留兰志刚张涌《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第5期14-19,共6页; 针对牛乳腺细胞体外培养存活周期短、转染效率低等特点,分别采用Ⅰ型、Ⅱ型胶原酶消化培养法及组织贴壁培养法,比较了牛乳腺细胞的生长、迁移、分化和凋亡等一系列特征。同时构建了携带绿色荧光蛋白报告基因的端粒酶融合表达载体pEGFP-h... 展开更多; 关键词牛乳腺上皮细胞胶原酶表达载体转染; 在线阅读下载PDF 职称材料

人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因对山羊胎儿成纤维细胞的影响被引量：3: 8; 作者鲍珣张拓张涌《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第8期42-46,共5页; 利用包含人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的真核表达载体pCI-neo-hTERT转染山羊胎儿成纤维细胞,筛选阳性克隆扩大培养,并对转染阳性细胞分别进行RT-PCR检测,倍性分析,细胞周期检测和细胞凋亡检测,以观察该基因对山羊胎儿成纤维细胞的影响... 展开更多; 关键词 HTERT 山羊胎儿成纤维细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名山羊胚胎小脑皮质的形成和发育被引量：7: 1; 作者徐永平张涌郑月茂卿素珠赵慧英蒲鹏; 机构西北农林科技大学动物科技学院生物工程研究所; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2004年第2期87-90,共4页; 基金国家自然科学基金项目(39830280); 文摘　对山羊胚胎小脑皮质形成及其神经元发育的形态学变化进行了研究。结果表明:(1)山羊胚胎小脑形成于第6周末,小脑皮质的外颗粒层、分子层首先形成。(2)发育过程中,山羊胚胎小脑的外颗粒层呈现出非常复杂的变化趋势:第7～10周外颗粒层达到一定厚度,第11～12周开始变薄,此后外颗粒层又开始变厚,直到第15～16周又变薄,17～18周再次增厚,此后再次变薄,直到出生前1周外颗粒层已经较薄,仅有4～5层细胞。(3)山羊胚胎的蒲肯野氏细胞可能在第8周以前就已聚集定位,第14周以后,蒲肯野氏细胞内部结构逐渐发育成熟,这说明蒲肯野氏细胞虽然发生较早,但其开始发育的时间较晚。; 关键词山羊胚胎小脑皮质形成发育中枢神经形态学; Keywords cerebellum goat fetus central nerves morphology; 分类号 S827 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名绵羊精子提取物对卵母细胞的孤雌激活作用被引量：5: 2; 作者赛务加甫张立彭新荣郭志林杨丽李向臣何宽军安志兴张涌; 机构西北农林科技大学动物科技学院生物工程研究所; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2006年第7期9-12,16,共5页; 基金国家"863"高技术研究发展计划项目(2001AA213081); 文摘研究了绵羊精子提取物对绵羊卵母细胞的孤雌激活作用，确定了绵羊精子提取物的最佳注射剂量，并将其孤雌激活效果与离子霉素联合6-DMAP法的激活效果进行了比较。结果表明，绵羊精子提取物对绵羊卵母细胞有孤雌激活作用，最佳注射剂量为每个绵羊卵母细胞注入2～4pL浓度5～6mg／mL的绵羊精子提取物；绵羊精子提取物的孤雌激活效果与离子霉素联合6-DMAP法的激活效果差异不显著。; 关键词绵羊精子提取物卵母细胞孤雌激活显微注射; Keywords sheep sperm extract oocyte parthenogenetic activation micro injection; 分类号 S826 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名5-Aza-CdR联合TSA对牛核移植胚胎体外发育及表观遗传状态的影响被引量：6: 3; 作者胡广卫苏建民曹泽磊丁向彬王勇胜张涌; 机构西北农林科技大学动物医学院生物工程研究所; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2009年第12期1-5,10,共6页; 基金国家高技术研究发展计划"863"计划项目(2001AA213081); 文摘【目的】探讨5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-2-′Deoxycytidine,5-Aza-CdR)联合曲古抑菌素A(Trichosta-tin A,TSA)对牛核移植胚胎体外发育及其表观遗传状态的影响。【方法】以体外受精胚胎作为对照组,将部分体细胞、核移植胚胎以及体细胞联合核移植胚胎用5-Aza-CdR+TSA(5-Aza-CdR:20 nmol/L,72 h;TSA:50 nmol/L,12 h)进行处理,统计核移植胚胎体外发育率,并对2-细胞、8-细胞和囊胚阶段胚胎进行DNA甲基化和组蛋白乙酰化检测,研究5-Aza-CdR+TSA处理对核移植胚胎体外发育及其表观遗传状态的影响。【结果】与对照组相比,5-Aza-CdR+TSA单独处理供体细胞和核移植胚胎均可以显著提高克隆胚胎的囊胚发育率和囊胚细胞数(P<0.05);供体细胞和核移植胚胎均用5-Aza-CdR+TSA处理后,核移植胚胎体外发育能力进一步提高,囊胚发育率显著高于单独处理供体细胞或核移植胚胎组(P<0.05)。免疫荧光检测发现,体细胞和核移植胚胎均用5-Aza-CdR+TSA处理,不但显著降低了2-细胞和8-细胞阶段DNA甲基化水平,而且也显著增加了组蛋白乙酰化水平(P<0.05),使核移植胚胎附植前各发育阶段的表观遗传状态更接近于体外受精胚胎。【结论】5-Aza-CdR联合TSA处理供体细胞和核移植胚胎可以更明显地提高克隆胚胎的体外发育能力,改变核移植胚胎的DNA甲基化和组蛋白乙酰化水平,使它们的表观遗传状态及体外发育率更接近于体外受精胚胎。; 关键词体细胞核移植克隆胚胎 5-氮杂2’-脱氧胞苷曲古抑菌素A 牛体外发育表现遗传状态; Keywords somatic cell nuclear transfer cloned embryo 5-Aza-2＇-Deoxycytidine Trichostatin A bovine in witro development epigenetic status; 分类号 S823.36 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小鼠卵母细胞化学去核及手工构建核移植胚胎被引量：5: 4; 作者赵禹刘军王保垒张拓刘根胜张涌; 机构西北农林科技大学动物医学院生物工程研究所; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第10期102-106,共5页; 基金国家高技术与发展计划项目(863)资助(2004AA213072); 文摘为优化脱羰秋水仙碱(DC)诱导去核程序,研究以DC去核卵母细胞为核受体的、无透明带体细胞核移植方法在小鼠体细胞核移植中的应用,试验比较了乙醇、SrCl2两种激活方法及脱羰秋水仙碱处理开始时间对小鼠MⅡ期卵母细胞去核效率的影响;将DC诱导去核成功的卵母细胞去除透明带,与胎儿成纤维细胞粘合、电融合和SrCl2激活后,体外培养重构胚。结果显示,7%乙醇激活后0 min起始DC处理可得到最高的诱导去核率(66.4%);而在8 mmol/L SrCl2中激活15 min后用DC处理可得到最高的诱导去核率(64.3%);目前重构胚可以体外发育到8-细胞。试验结果首次证明了SrCl2在小鼠卵母细胞DC诱导去核中的作用效果与乙醇相当,初步证明了将DC诱导去核技术与无透明带技术相结合手工克隆生产小鼠重构胚的可能性,它的成功将大大简化核移植程序。; 关键词小鼠化学去核无透明带手工克隆; Keywords mouse chemical enucleation zona free handmade cloning（HMC）; 分类号 Q492 [生物学—生理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名亮甲酚蓝染色法筛选卵母细胞对牛体细胞克隆胚体外发育的影响被引量：3: 5; 作者曹泽磊苏建民胡广卫王勇胜唐爽张涌; 机构西北农林科技大学动物医学院生物工程研究所; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第9期24-28,共5页; 基金国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2001AA213081); 文摘为探索用亮甲酚蓝染色法筛选卵母细胞是否有利于牛体细胞克隆胚的体外发育,将采集的卵母细胞分成3组:对照组,采集后的卵母细胞直接放入成熟液培养,不用亮甲酚蓝处理;控制对照组,卵母细胞于PBS中放置90 min后放入成熟液中培养;试验组,将采集的卵母细胞在含有26μmol/L亮甲酚蓝的PBS中放置90 min。然后将处理过的卵母细胞根据着色情况分为两组,即BCB+(胞质呈蓝色,成熟卵母细胞)和BCB-(胞质未着色,生长期卵母细胞)。各组卵母细胞24 h体外成熟培养,统计各组卵母细胞成熟率。分别用成熟后的各组卵母细胞用于细胞核移植,统计体细胞核移植的卵裂数、囊胚数和囊胚细胞数。结果表明,BCB+组卵母细胞的成熟率明显高于BCB-组卵母细胞的成熟率(74.0%,53.4%),差异显著(P<0.05)。BCB+组的囊胚率(45.0%)与对照组、控制对照组和BCB-组的囊胚率(34.9%,36.4%和5.2%)相比差异显著(P<0.05)。另外BCB+组的囊胚细胞总数(114.5±7.5)较其他组差异显著(P<0.05)。表明通过亮甲酚蓝染色法筛选出成熟的高质量牛卵母细胞用于体细胞核移植,可以获得更高的克隆囊胚率。; 关键词亮甲酚蓝牛卵母细胞体细胞核移植; Keywords BCB bovine oocytes SCNT; 分类号 S813.7 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名出生前山羊小脑皮质神经元超微结构的观察被引量：1: 6; 作者徐永平郑月茂赵慧英张涌蒲鹏卿素珠; 机构西北农林科技大学动物科技学院生物工程研究所; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2004年第11期1-5,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(39830280); 文摘　应用超薄切片技术研究了第6周到出生前山羊小脑皮质神经元超微结构发育的变化。结果表明:(1)出生前山羊小脑皮质内颗粒层细胞在第10周龄以前一直处于未分化状态,第10周龄以后开始分化,但直到出生前山羊小脑皮质内颗粒层细胞内细胞器的种类和数量都增加缓慢。(2)小脑浦肯野氏细胞在第7周龄以前处于未分化状态;在第7周龄开始分化,第7～14周龄处于不成熟期;第15～18周龄浦肯野氏细胞处于发育成熟期,细胞内各种细胞器均出现并充满整个胞体,细胞核膜趋于成熟,核内常染色质发达,中央核仁发育成熟;浦肯野氏细胞自第19周龄开始进入成熟期,细胞内尼氏小体开始形成并发育,但其体积较小,界限不明显,这表明浦肯野氏细胞在出生前尚未完全成熟,出生后仍存在一个较长生后发育过程。; 关键词山羊小脑皮质神经元超微结构发育; Keywords ultrastructure development neuron cerebellar cortex prenatal goat; 分类号 S827.1 [农业科学—畜牧学] Q421 [生物学—神经生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名pEGFP-hTERT真核表达载体的构建及转染牛乳腺细胞方法的优化被引量：6: 7; 作者闫晶贺小英潘春留兰志刚张涌; 机构西北农林科技大学动物医学院生物工程研究所; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第5期14-19,共6页; 基金国家高技术研究与发展计划(863)项目(2001AA213081); 文摘针对牛乳腺细胞体外培养存活周期短、转染效率低等特点,分别采用Ⅰ型、Ⅱ型胶原酶消化培养法及组织贴壁培养法,比较了牛乳腺细胞的生长、迁移、分化和凋亡等一系列特征。同时构建了携带绿色荧光蛋白报告基因的端粒酶融合表达载体pEGFP-hTERT,采用脂质体分别转染两种真核表达载体pEGFP-hTERT、pEGFP-C1,通过比较载体不同浓度、传代细胞转染适合密度及生长活力、转染后的荧光强度等检测转染效率。结果表明,第3代细胞接种密度大约70%,浓度为350 ng/μL的载体适合于牛乳腺细胞的转染,转染效率大约为25%。试验结果为牛乳腺细胞体外转基因研究奠定了技术基础。; 关键词牛乳腺上皮细胞胶原酶表达载体转染; Keywords bovine mammary epithelial cell collagenase expression vector transfection; 分类号 Q291 [生物学—细胞生物学] S813.3 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因对山羊胎儿成纤维细胞的影响被引量：3: 8; 作者鲍珣张拓张涌; 机构西北农林科技大学动物医学院生物工程研究所; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第8期42-46,共5页; 基金转基因生物新品种培育重大专项课题研究计划(2008ZX08007-004); 文摘利用包含人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的真核表达载体pCI-neo-hTERT转染山羊胎儿成纤维细胞,筛选阳性克隆扩大培养,并对转染阳性细胞分别进行RT-PCR检测,倍性分析,细胞周期检测和细胞凋亡检测,以观察该基因对山羊胎儿成纤维细胞的影响。试验结果表明,筛选出的阳性细胞现已传至第50代;RT-PCR检测,端粒酶基因成功整合到山羊胎儿成纤维细胞并持续表达;倍性分析结果显示,转基因第50代细胞呈正常二倍体;对细胞周期进行分析,结果显示转基因第50代细胞较未转染第30代细胞有较高的S期,说明该细胞DNA合成旺盛,具有很强的增殖能力;细胞凋亡检测结果发现,转基因第50代细胞中凋亡细胞的比例明显少于转染第30代山羊胎儿成纤维细胞。这些试验结果均表明,hTERT能增加山羊胎儿成纤维细胞体外培养的代数,并保持细胞良好的形态及较强的增殖能力。; 关键词 HTERT 山羊胎儿成纤维细胞; Keywords hTERT goat fetal fibroblast; 分类号 S188 [农业科学—农业基础科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	山羊胚胎小脑皮质的形成和发育	徐永平张涌郑月茂卿素珠赵慧英蒲鹏	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2004	7	在线阅读下载PDF 职称材料
2	绵羊精子提取物对卵母细胞的孤雌激活作用	赛务加甫张立彭新荣郭志林杨丽李向臣何宽军安志兴张涌	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2006	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	5-Aza-CdR联合TSA对牛核移植胚胎体外发育及表观遗传状态的影响	胡广卫苏建民曹泽磊丁向彬王勇胜张涌	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2009	6	在线阅读下载PDF 职称材料
4	小鼠卵母细胞化学去核及手工构建核移植胚胎	赵禹刘军王保垒张拓刘根胜张涌	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2009	5	在线阅读下载PDF 职称材料
5	亮甲酚蓝染色法筛选卵母细胞对牛体细胞克隆胚体外发育的影响	曹泽磊苏建民胡广卫王勇胜唐爽张涌	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2009	3	在线阅读下载PDF 职称材料
6	出生前山羊小脑皮质神经元超微结构的观察	徐永平郑月茂赵慧英张涌蒲鹏卿素珠	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2004	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	pEGFP-hTERT真核表达载体的构建及转染牛乳腺细胞方法的优化	闫晶贺小英潘春留兰志刚张涌	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2009	6	在线阅读下载PDF 职称材料
8	人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因对山羊胎儿成纤维细胞的影响	鲍珣张拓张涌	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2009	3	在线阅读下载PDF 职称材料