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动物乳腺生物反应器研究进展 被引量：3
1
作者 舒建洪 刘津 +2 位作者 胡先春 杨瑞锋 张涌 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2004年第12期149-153,共5页
　针对利用动物乳腺生物反应器技术生产重组蛋白,具有生产效率高和经济效益明显的特点。综述了制备乳腺生物反应器时表达载体构建和基因转移两个关键环节的研究现状,并就基因打靶和体细胞克隆技术的结合探讨了乳腺生物反应器的发展趋势。
关键词 乳腺生物反应器 表达载体 转基因 基因打靶 体细胞克隆
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禽流感分子生物学诊断技术研究进展 被引量：3
2
作者 陈思怀 乔宪凤 +1 位作者 魏庆信 张涌 《饲料工业》 2005年第24期54-57,共4页
禽流感不但造成养禽业的巨大经济损失,而且也严重威胁着人类公共卫生安全。检测禽流感病毒是诊断的关键。分子生物学检测技术较常规检测方法快速、准确、灵敏。通过对核酸杂交技术、常规RT-PCR技术、实时RT-PCR技术、PCR-ELISA技术、核... 禽流感不但造成养禽业的巨大经济损失,而且也严重威胁着人类公共卫生安全。检测禽流感病毒是诊断的关键。分子生物学检测技术较常规检测方法快速、准确、灵敏。通过对核酸杂交技术、常规RT-PCR技术、实时RT-PCR技术、PCR-ELISA技术、核酸依赖的扩增技术(NASBA)、环介导的等温扩增技术(LAMP)以及基因芯片等诊断技术的基本原理、检测优点以及应用现状进行综述,为禽流感的诊断提供参考。 展开更多
关键词 禽流感 PCR NASBA LAMP 基因芯片
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哺乳动物体细胞核移植中供体细胞的研究进展 被引量：1
3
作者 王超 安志兴 +2 位作者 李向臣 张涌 马莉萍 《黄牛杂志》 2003年第3期23-25,共3页
本文对哺乳动物核移植供体细胞的研究进展进行了综述。主要涉及细胞类型、细胞年龄和细胞所处的周期时相对核移植胚胎发育的影响 。
关键词 哺乳动物 体细胞核移植 供体细胞 细胞类型 细胞年龄
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哺乳动物核移植技术研究进展 被引量：1
4
作者 温叶飞 侯正录 +1 位作者 蓝贤勇 安志兴 《黄牛杂志》 2003年第4期27-31,共5页
随着多种克隆动物的相继诞生,人们越来越关注哺乳动物核移植技术的发展。随着核移植技术的逐步成熟,必将给畜牧业和医学等研究领域带来深远影响。本文综述了哺乳动物核移植技术的研究现状、相关机理及方法的研究,并就存在的问题和应用... 随着多种克隆动物的相继诞生,人们越来越关注哺乳动物核移植技术的发展。随着核移植技术的逐步成熟,必将给畜牧业和医学等研究领域带来深远影响。本文综述了哺乳动物核移植技术的研究现状、相关机理及方法的研究,并就存在的问题和应用前景进行了阐述。 展开更多
关键词 哺乳动物 核移植技术 机理 现状 “檀香山”技术 应用前景 生产效率 端粒 克隆动物年龄
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体外培养的山羊乳腺上皮细胞形态研究 被引量：20
5
作者 郑月茂 彭新荣 +2 位作者 徐永平 石玉强 张涌 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2004年第3期37-41,共5页
　通过有效的细胞培养方法获得山羊乳腺上皮细胞系,对这些细胞形态进行光镜观察,结果发现,细胞可形成闭合型和开放型细胞群,闭合型细胞群边界清晰,细胞之间结合紧密;开放型细胞群边界不清,细胞相互分散存在于一局限的范围内。乳腺上皮... 　通过有效的细胞培养方法获得山羊乳腺上皮细胞系,对这些细胞形态进行光镜观察,结果发现,细胞可形成闭合型和开放型细胞群,闭合型细胞群边界清晰,细胞之间结合紧密;开放型细胞群边界不清,细胞相互分散存在于一局限的范围内。乳腺上皮细胞与成纤维细胞混生时分区生长,界线明显;细胞之间形成许多腔状结构。纯化的乳腺上皮细胞通过单细胞悬浮后传代,部分细胞形成岛屿状聚集,部分细胞以贴壁的自由单个细胞散在形式存在。上皮细胞增殖可形成圆顶型结构,呈乳头状(称之为乳球体);乳腺上皮细胞可产生并分泌乳汁,分泌到细胞外的乳汁流动形成网状结构。山羊乳腺上皮细胞含不同的细胞类型,大多数上皮细胞呈短梭形或多角形,细胞之间紧密相靠,互相衔接,连接成片,呈蜂窝状;细胞核呈圆形或椭圆形,核仁2～4枚;部分细胞呈圆饼状,体积较大;出现部分长形细胞;部分细胞表面出现绒毛状突起;接触抑制的上皮细胞形态不均一。 展开更多
关键词 体外培养 山羊 乳腺上皮细胞 细胞形态
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山羊胎期肺发育的形态学研究 被引量：7
6
作者 郑月茂 徐永平 +2 位作者 卿素珠 蒲鹏 张涌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期158-165,共8页
对3～22周龄山羊胎儿肺进行了肉眼、光镜和透射电镜观察,结果表明:1.7～22周龄山羊胎儿肺的外部形态与胎龄无关,肺的外部形态以左二右四叶者为多见,肺的叶间裂和右肺副裂常不完整,以浆膜、肺组织或混合性组织(肺组织及浆膜)融合;2. 山... 对3～22周龄山羊胎儿肺进行了肉眼、光镜和透射电镜观察,结果表明:1.7～22周龄山羊胎儿肺的外部形态与胎龄无关,肺的外部形态以左二右四叶者为多见,肺的叶间裂和右肺副裂常不完整,以浆膜、肺组织或混合性组织(肺组织及浆膜)融合;2. 山羊胎儿肺的发育分为5个时期:胚胎期(3～5周) 肺芽分支形成主支气管,主支气管长度不断增长并萌芽出叶支气管,均衬以假复层柱状上皮.腺状期(6～12周) 以支气管树发育为主,小支气管衬以假复层和/或单层柱状上皮;终蕾呈腺状,上皮细胞由假复层柱状逐渐变为单层柱状,胞核向细胞顶端移行;终蕾上皮细胞游离面可见短小的微绒毛;线粒体、粗面内质网及核糖体随着胎龄增加而逐渐增多,它们均位于细胞顶部.小管期(13～14周) 以呼吸部发育为主,原始肺泡开始形成,呼吸性细支气管衬以未分化的立方上皮;终蕾腺状结构逐渐消失,终蕾上皮细胞由高矮不等的单层柱状上皮逐渐演变为立方形的原始肺泡上皮;细胞游离面可见较多的微绒毛,胞质内线粒体、粗面内质网及核糖体较发达.囊状期(第15周) 呼吸部发育显著,肺内细支气管及其末端呈现出'充气'状态;部分原始肺泡上皮细胞分化为扁平的肺泡Ⅰ型细胞和立方形的肺泡Ⅱ型细胞;Ⅱ型细胞内出现嗜锇小体.肺泡期(16～22周) 以肺泡的形成和分化为主,更多的肺泡上皮分化为扁平的肺泡Ⅰ型细胞和立方形的肺泡Ⅱ型细胞.此期,毛细血管内皮与部分肺泡上皮贴近,可将肺泡上皮细胞区分为3种:Ⅰ型细胞,呈矮柱状或椭圆形,胞质中有较明显的核糖体、扩张内质网及变性线粒体;形成了由Ⅰ型细胞-基膜-内皮细胞组成的气血屏障.Ⅱ型细胞,胞质内含丰富的嗜锇板层小体和核糖体,内质网扩张呈大小不一的泡状,多泡体出现,线粒体膨大变性,细胞游离面可见少数微绒毛.Ⅲ型细胞,为未分化细胞,呈立方形,胞体较小,胞核相对较大,呈圆或椭圆形,胞质少,呈带状,电子密度低,细胞器少. 展开更多
关键词 羊胎 上皮细胞 上皮 内质网 线粒体 核糖体 胎儿 胞质 山羊 周龄
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优化山羊体细胞核移植方案的研究 被引量：6
7
作者 刘凤军 安志兴 +5 位作者 高立功 张玉玲 张晶晶 何小宁 郑月茂 张涌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期972-976,共5页
以乳腺细胞、胎儿成纤维细胞和颗粒细胞为供体细胞进行核移植,比较了供体细胞类型、细胞冷冻及核移植的重建方法(胞质内注射、电融合)对重构胚早期发育的影响。结果:(1)乳腺细胞支持重组胚的发育能力(囊胚率7.14%)显著低于成纤维细胞(16... 以乳腺细胞、胎儿成纤维细胞和颗粒细胞为供体细胞进行核移植,比较了供体细胞类型、细胞冷冻及核移植的重建方法(胞质内注射、电融合)对重构胚早期发育的影响。结果:(1)乳腺细胞支持重组胚的发育能力(囊胚率7.14%)显著低于成纤维细胞(16.19%)和颗粒细胞(19.01%)(P<0.05),卵裂率无显著差异(P>0.05);(2)乳腺上皮细胞构建重组胚时电融合法的效率(69.52%)极显著高于胞质注射法(59.20%)(P<0.01);成纤维细胞的重组成功率、卵裂率和囊胚率在两种方法间均无显著差异(P>0.05);在颗粒细胞,胞质注射法重组成功率(82.17%)显著高于电融合法(50.99%)(P<0.05),其囊胚率也稍高于电融合法,但无显著差异(P>0.05);(3)上述3种供体细胞在冻融后支持重组胚发育力方面无显著差异(P>0.05)。结论:在山羊体细胞核移植中,上述3种细胞支持重组胚的发育力以成纤维细胞和颗粒细胞较好;细胞冷冻对其无显著影响;在构建重组胚方法上,乳腺细胞以电融合法为宜,颗粒细胞是胞质注射法优于电融合法,而成纤维细胞两种方法均可。 展开更多
关键词 核移植 体细胞 山羊 胞质内注射 电融合
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脱羰秋水仙碱(DM)辅助去牛卵母细胞核的研究 被引量：6
8
作者 李向臣 吴月红 +2 位作者 马毅 山灵 张涌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期537-541,共5页
受体细胞去核是核移植关键步骤之一。利用脱羰秋水酰碱(Demecolcine,DM)显示牛卵母细胞染色体的位置进行去核,主要从以下几个方面进行了试验:卵母细胞在DM中孵育浓度、卵母细胞在DM中孵育时间及卵母细胞成熟时间对显示效果的影响。结果... 受体细胞去核是核移植关键步骤之一。利用脱羰秋水酰碱(Demecolcine,DM)显示牛卵母细胞染色体的位置进行去核,主要从以下几个方面进行了试验:卵母细胞在DM中孵育浓度、卵母细胞在DM中孵育时间及卵母细胞成熟时间对显示效果的影响。结果表明:(1)成熟牛卵母细胞用离子霉素激活5 min,DM孵育2 h完全诱导去核,结果没有见到完全去核的卵母细胞;(2)挑选有第一极体的成熟牛卵母细胞,在浓度为0.5μg/mL的DM中孵育2 h显示率可达76.54%;(3)牛卵母细胞在成熟18 h可以获得73.86%的显示效果。(4)在没有去卵丘细胞的卵母细胞中添加DM取得了更好的显示效果(80.82%),囊胚的发育率也较其它组高,可达18.60%,说明未去卵丘细胞的卵母细胞添加DM更有利于显示染色体的位置,而且更有利于囊胚的发育。利用DM显示染色体的位置不仅可以高效快速的去核,同时也避免了传统去核时荧光对卵母细胞的照射。 展开更多
关键词 牛 显示去核 脱羰秋水仙碱(Demecolcine DM) 核移植 卵母细胞
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体细胞核移植法获得转人乳铁蛋白基因克隆山羊妊娠的研究 被引量：8
9
作者 刘凤军 张玉玲 +4 位作者 杨自军 陈兴启 孙达权 王国华 张涌 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第29期12720-12723,共4页
[目的]探讨供体细胞类型、移植胚胎发育阶段、数量及部位对山羊转基因克隆效率的影响。[方法]利用体细胞核移植技术将转染人乳铁蛋白基因hLF的山羊胎儿成纤维细胞（GFF）和乳腺上皮细胞（GMGE）移植到MII期去核卵母细胞内，经电融合、... [目的]探讨供体细胞类型、移植胚胎发育阶段、数量及部位对山羊转基因克隆效率的影响。[方法]利用体细胞核移植技术将转染人乳铁蛋白基因hLF的山羊胎儿成纤维细胞（GFF）和乳腺上皮细胞（GMGE）移植到MII期去核卵母细胞内，经电融合、激活、体外培养后，2-8细胞期克隆胚被移植到同期发情山羊的输卵管内，囊胚被移植到子宫角内。[结果]GFF与GMGE的妊娠率相近（输卵管移植妊娠率分别为26.47%及20.00%）；在GFF，输卵管移植的妊娠率与子宫角内移植妊娠率接近（分别为26.47%及25.00%），输卵管移植胚胎平均数为21.2组的妊娠率显著高于5.93组和9.64组（40.00%及26.67%，21.43%）。[结论]供体细胞类型、移植胚胎的发育阶段及移植部位对山羊转基因克隆效率的影响不大，但对于输卵管移植，受体羊移植胚胎数量对妊娠率有明显的影响。此外，该研究还提示了利用成年羊乳腺上皮细胞制作转基因动物的可行性。 展开更多
关键词 体细胞核移植 转基因 人乳铁蛋白基因 山羊胎儿成纤维细胞 乳腺上皮细胞
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GnRH的研究进展 被引量：8
10
作者 王强 侯正录 +1 位作者 权富生 安志兴 《生物学杂志》 CAS CSCD 2003年第5期40-41,共2页
主要对促性腺激素释放激素的种类、合成与降解,调控机制及应用等方面的最新研究动态作了简要综述。
关键词 GNRH 种类 调控机制 降解 合成 促性腺激素释放激素 神经生理学
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体外培养的牛乳腺上皮细胞形态研究 被引量：9
11
作者 彭新荣 郑月茂 张涌 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2005年第1期13-17,共5页
　通过有效的细胞培养方法获得了牛乳腺上皮细胞系,并系统观察了乳腺上皮细胞的长出、贴壁、聚集、迁移、分裂、分化、凋亡等一系列形态变化。结果发现,原代培养的乳腺上皮细胞大多数呈卵圆形,细胞之间连接成片,单层生长,如鹅卵石铺过路... 　通过有效的细胞培养方法获得了牛乳腺上皮细胞系,并系统观察了乳腺上皮细胞的长出、贴壁、聚集、迁移、分裂、分化、凋亡等一系列形态变化。结果发现,原代培养的乳腺上皮细胞大多数呈卵圆形,细胞之间连接成片,单层生长,如鹅卵石铺过路面,乳腺上皮细胞和成纤维细胞混生时分区生长,界线明显。传代的乳腺上皮细胞呈岛屿状聚集生长,细胞核呈圆形或椭圆形,核仁2～4枚;在含雌激素的培养液中,细胞出现双核或多核现象,但仍表现一定的接触抑制现象。多次传代后的乳腺上皮细胞含不同的细胞类型,通过光镜观察,部分细胞仍保持较快的分裂增殖能力;部分细胞渐渐分化,出现长形细胞、三角形细胞。上皮细胞增殖分化可形成圆顶型结构,乳腺上皮细胞可产生并分泌乳汁,分泌到细胞外的乳汁流动形成网状结构。 展开更多
关键词 体外培养 牛 乳腺上皮细胞 细胞形态
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人乳铁蛋白基因乳腺特异性表达载体的构建及转染研究 被引量：4
12
作者 张晶晶 刘凤军 +2 位作者 彭淑英 宋红卫 张涌 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2007年第1期29-32,共4页
构建了携带人乳铁蛋白(LTF)基因、绿色荧光蛋白(GFP)基因的乳腺特异性表达载体(pEBL),用脂质体法转染泌乳期莎能奶山羊乳腺上皮细胞,转染后于荧光显微镜下观察GFP表达情况。用G 418对转染细胞进行筛选,获得抗性细胞克隆,并对转染细胞进... 构建了携带人乳铁蛋白(LTF)基因、绿色荧光蛋白(GFP)基因的乳腺特异性表达载体(pEBL),用脂质体法转染泌乳期莎能奶山羊乳腺上皮细胞,转染后于荧光显微镜下观察GFP表达情况。用G 418对转染细胞进行筛选,获得抗性细胞克隆,并对转染细胞进行PCR检测。结果显示,pEBL构建成功,转染6 h后可观察到细胞有GFP表达,PCR检测阳性克隆细胞转有LTF基因。表明pEBL载体已转染山羊乳腺上皮细胞,为进一步建立转基因动物乳腺生物反应器奠定了基础。 展开更多
关键词 山羊乳腺上皮细胞 人乳铁蛋白 绿色荧光蛋白 特异性载体
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脱羰秋水仙碱诱导昆明白小鼠卵母细胞去核的研究 被引量：3
13
作者 王强 安志兴 +3 位作者 顾玲 马利兵 郑月茂 张涌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期653-657,共5页
在已有的demecolcine(以下简称Deme)诱导去核技术路线的基础上,以昆明白小鼠卵母细胞为实验材料,对影响去核率的几个因素(包括Deme浓度、Deme处理起始时间和作用时间、卵母细胞的卵龄)逐次进行实验。结果表明:(1)激活卵母细胞在浓度为0 ... 在已有的demecolcine(以下简称Deme)诱导去核技术路线的基础上,以昆明白小鼠卵母细胞为实验材料,对影响去核率的几个因素(包括Deme浓度、Deme处理起始时间和作用时间、卵母细胞的卵龄)逐次进行实验。结果表明:(1)激活卵母细胞在浓度为0 4μg/mL和0 5μg/mLDeme KSOM液中处理60min均能有效去核,但0 5μg/mL组获得更高的去核率(33 3%)。(2)卵母细胞在激活后0～5min之内迅速放入0 5μg/mLDeme KSOM液中,处理60～180min得到了相对较高的去核率(31 9%～24 5%)。(3)昆明白小鼠hCG注射后17～18h收集的卵母细胞更有利于Deme诱导去核,去核率为27 1%。经比较分析,建立了优化的Deme诱导去核程序。 展开更多
关键词 小鼠 诱导去核 脱羰秋水仙碱(Demecolcine) 核移植 卵母细胞
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无角道塞特绵羊超数排卵技术研究 被引量：3
14
作者 权富生 赵晓娥 +5 位作者 张志平 安志兴 刘风军 李裕强 李相臣 张涌 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2005年第12期1-5,12,共6页
采用国内不同厂家生产的促卵泡刺激素(FSH)和加拿大进口的FSH,进行了无角道塞特母羊超排 处理,对不同给药方式、首次超排与重复超排、经产羊与青年羊、春季超排与秋季超排、自然发情与诱导发情及未知 发情周期的超排效果进行了对比研究... 采用国内不同厂家生产的促卵泡刺激素(FSH)和加拿大进口的FSH,进行了无角道塞特母羊超排 处理,对不同给药方式、首次超排与重复超排、经产羊与青年羊、春季超排与秋季超排、自然发情与诱导发情及未知 发情周期的超排效果进行了对比研究,同时研究了母羊卵巢黄体退化、有无卵泡及推迟发情对超排效果的影响。结 果表明,加拿大进口FSH的超排效果最好,国产FSH以宁波+中科院激素组合的超排效果较好;重复超排对超排 效果无显著影响;经产羊的超排效果优于青年羊;自然发情母羊的超排效果优于诱导发情母羊和未知发情周期母 羊;黄体退化母羊回收可用胚的数量明显较低;卵巢上有无卵泡对超排效果无影响;推迟发情母羊的超排效果明显 低于正常发情母羊。 展开更多
关键词 无角道塞特绵羊 促卵泡刺激素 超数排卵 胚胎移植
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多重RT-PCR快速检测禽流感病毒的研究 被引量：10
15
作者 陈思怀 乔宪凤 +3 位作者 华文君 郑新民 魏庆信 张涌 《湖北农业科学》 北大核心 2006年第1期20-23,共4页
参考H1-H15亚型禽流感病毒(AIV)的核蛋白(NP)基因序列以及H5、H6、H9亚型AIV血凝素(HA)基因,共设计4对引物,建立了2对引物扩增AIV的NP、HA基因的多重RT-PCR方法。应用此法分别对H5、H6、H9亚型AIV尿囊液RT-PCR,电泳,回收预期片段进行测... 参考H1-H15亚型禽流感病毒(AIV)的核蛋白(NP)基因序列以及H5、H6、H9亚型AIV血凝素(HA)基因,共设计4对引物,建立了2对引物扩增AIV的NP、HA基因的多重RT-PCR方法。应用此法分别对H5、H6、H9亚型AIV尿囊液RT-PCR,电泳,回收预期片段进行测序,并同Genebank的注册序列进行同源性分析。也对NDVI、BVI、BDV尿囊液以及3种亚型AIV尿囊液的2倍系列稀释样品进行检测。结果表明,3种亚型AIV尿囊液均出现2条特异性条带,经测序确证为目的扩增片段,BLAST的同源性初步判断3种AIV的亚型为H5N1、H6N2、H9N20对NDVI、BVI、BDV的RNA扩增未见2条目的条带,判断为阴性,说明该法特异性强;能对3种亚型AIV尿囊液64～128倍稀释的样品检测出AIV,表明其灵敏度高。该检测法检测的整个过程仅需4h,实现了AIV的快速检测。 展开更多
关键词 禽流感 反转录聚合酶链式反应:诊断
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大鼠心肌细胞体外培养特性研究 被引量：3
16
作者 刘俊平 曹鸿国 +3 位作者 安志兴 赵慧英 温叶飞 张涌 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2005年第1期9-12,17,共5页
　对采用组织块法分离培养的大鼠心肌细胞进行了鉴定及相关的生物学特性研究,以进一步用于心脏细胞工程、组织工程的种子细胞及其他方面的研究。结果显示,分离培养出的心肌细胞呈多种形态,整体形如铺路石样,生长中的心肌细胞常伸出伪足... 　对采用组织块法分离培养的大鼠心肌细胞进行了鉴定及相关的生物学特性研究,以进一步用于心脏细胞工程、组织工程的种子细胞及其他方面的研究。结果显示,分离培养出的心肌细胞呈多种形态,整体形如铺路石样,生长中的心肌细胞常伸出伪足,形状为星形,培养至第4天的心肌细胞常可相互交织形成细胞簇,出现节律性的搏动;心肌细胞的PAS糖原染色呈阳性,胞浆内大量的糖原颗粒被染成品红色;细胞凋亡-Hoechst检测试剂盒荧光染色显示,心肌细胞核内荧光物质分布均匀一致,没有出现细胞凋亡时所特有的荧光致密浓染或碎块状致密浓染现象;对第1代和第6代心肌细胞生长曲线测定显示,心肌细胞生长曲线呈"S"型,2代心肌细胞生长曲线趋于一致;心肌细胞α-sarcomaricactin(α-SA)免疫组化鉴定显示,心肌细胞呈强阳性且具有较高纯度。上述结果表明,利用该方法培养的心肌细胞具有较高的增殖能力和纯度,可作为种子细胞用于心脏的细胞工程和组织工程及其他方面的研究。 展开更多
关键词 SD大鼠 心肌细胞 生物学特性
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克服小鼠早期胚胎体外培养发育阻滞的研究 被引量：3
17
作者 山灵 王勇胜 +2 位作者 高立功 丛银峰 张涌 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期4-7,共4页
为探讨不同培养基及共培养对克服小鼠早期胚胎体外发育阻滞的影响，用不同成分组成的5种常用培养液对小鼠早期胚胎进行体外培养，后以KSOM作为基础培养基，KSOMFBS为对照，分别与小鼠输卵管上皮细胞（MOEC）和卵丘细胞（CC）进行共培养... 为探讨不同培养基及共培养对克服小鼠早期胚胎体外发育阻滞的影响，用不同成分组成的5种常用培养液对小鼠早期胚胎进行体外培养，后以KSOM作为基础培养基，KSOMFBS为对照，分别与小鼠输卵管上皮细胞（MOEC）和卵丘细胞（CC）进行共培养，观察从2细胞发育到4细胞的胚胎数和囊胚数的变化。结果发现5种培养液中从2-细胞发育到4-细胞的胚胎率为30．5％～43．5％，差异不显著。KSOM组囊胚率为40．9％，显著高于其他各组（27．9％～30．0％）。共培养后，各组中克服发育阻滞的胚胎数和囊胚数均有显著提高，其中添加胎牛血清组4细胞胚胎数和囊胚数显著高于不添加组，输卵管上皮细胞组显著高于卵丘细胞组。结果显示共培养对克服小鼠2-细胞发育阻滞作用明显，添加胎牛血清效果明显好于不添加，输卵管上皮细胞共培养效果好于卵丘细胞。 展开更多
关键词 小鼠 早期胚胎 体外培养 发育阻滞
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卵泡颗粒细胞维持山羊卵母细胞减数分裂抑制状态的研究 被引量：2
18
作者 刘利杰 权富生 +3 位作者 刘军 张东 刘根胜 张涌 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2008年第4期119-123,共5页
通过在卵母细胞体外成熟过程中添加不同浓度的卵丘细胞或其外围壁层颗粒细胞进行共培养,对山羊卵母细胞成熟过程中卵泡颗粒细胞对卵母细胞减数分裂抑制作用及作用机制进行了探索。结果表明,成熟液中添加105和106个/mL卵丘细胞或外围壁... 通过在卵母细胞体外成熟过程中添加不同浓度的卵丘细胞或其外围壁层颗粒细胞进行共培养,对山羊卵母细胞成熟过程中卵泡颗粒细胞对卵母细胞减数分裂抑制作用及作用机制进行了探索。结果表明,成熟液中添加105和106个/mL卵丘细胞或外围壁层颗粒细胞的卵母细胞体外成熟率与对照组相比差异不显著(p>0.05),但添加5×106个/mL(41.2%)和107个/mL(24.6%)卵丘细胞或外围壁层颗粒细胞组的成熟率显著降低(p<0.05);添加5×106和107个/mL卵丘细胞组和颗粒细胞组卵丘不能正常扩展,卵母细胞核状态观察,停留在GV期;Rp-cAMP(Rp-cyclicadenosine monophosphothioate)膜渗透性cAMP对抗剂,诱导了107个/mL的卵丘细胞组(71.6%)和外围壁层颗粒细胞组(71.3%)的卵母细胞体外成熟率与对照组(72.0%)差异不显著(p>0.05)。在山羊卵母细胞体外成熟过程中,添加一定浓度的卵丘细胞及其外层的颗粒细胞可以提高卵母细胞胞质内的cAMP的水平,抑制卵母细胞减数分裂的启动,使卵母细胞停留在GV期。 展开更多
关键词 山羊 卵泡颗粒细胞 卵母细胞 减数分裂 抑制
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维生素E提高牛孤雌胚胎的体外发育研究 被引量：2
19
作者 李瑞文 李向臣 +1 位作者 安志兴 张涌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1135-1138,共4页
体外生产的牛孤雌胚胎用添加了VE,VE+VC的CR1aa培养液,置38.5℃、5%CO2,饱和湿度的培养箱中进行培养。通过荧光染料Hoechst 33342对胚泡进行荧光染色,检测孵化囊胚的总细胞数。结果表明,当培养基中添加100μmol/L VE时,与对照组相比,扩... 体外生产的牛孤雌胚胎用添加了VE,VE+VC的CR1aa培养液,置38.5℃、5%CO2,饱和湿度的培养箱中进行培养。通过荧光染料Hoechst 33342对胚泡进行荧光染色,检测孵化囊胚的总细胞数。结果表明,当培养基中添加100μmol/L VE时,与对照组相比,扩张囊胚发育率和胚泡的细胞总数显著提高(P<0.01);当VE与VC联用时,发育到早期囊胚、扩张囊胚、孵化囊胚的数量和胚泡的总细胞数均低于单独使用VE的培养组。 展开更多
关键词 VITAMIN E 牛 孤雌胚 体外发育
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卵泡生长发育及其调控的研究进展 被引量：1
20
作者 舒建洪 哈利 +2 位作者 石玉强 郑月茂 张涌 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2004年第6期49-53,共5页
　综述了卵泡生长发育的动态模式,即卵泡经原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和窦腔卵泡发育至排卵卵泡的过程,着重阐述了卵泡生长发育过程中的调控机制,为进一步研究卵泡的生长、发育和排卵机制提供了理论基础。
关键词 卵泡 生长发育 动态模式 调控机制 哺乳动物 胚胎时期
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