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陕西杨凌某蛋鸡场禽戊型肝炎病毒的检测
被引量：
4
1
作者
拓晓玲
刘宝元
+3 位作者
陈宜阳
孙亚妮
赵钦
周恩民
《动物医学进展》
北大核心
2017年第7期120-123,共4页
2014年-2015年陕西杨凌地区部分商品蛋鸡场产蛋量下降了10%~40%,剖检部分鸡只发现肝脏肿大出血。为确诊该疫情的病因,从发病的6个蛋鸡场采集了337份血清和268份粪便,利用间接ELISA和套式RT-PCR分别对血清中的禽戊型肝炎病毒(HEV)抗体和...
2014年-2015年陕西杨凌地区部分商品蛋鸡场产蛋量下降了10%~40%,剖检部分鸡只发现肝脏肿大出血。为确诊该疫情的病因,从发病的6个蛋鸡场采集了337份血清和268份粪便,利用间接ELISA和套式RT-PCR分别对血清中的禽戊型肝炎病毒(HEV)抗体和粪便中的禽HEV RNA进行了实验室检测。ELISA检测结果发现,168份血清为禽HEV抗体阳性,阳性率为49.85%;套式RT-PCR检测结果发现,63份粪便为禽HEV RNA基因片段阳性,阳性率为23.51%。基因片段的序列同源性分析发现,杨凌地区的禽HEV分离株与国内的同源性为93.0%~99.2%;进化树分析表明,其与国内其他地区的分离株在同一进化分支上,同属禽HEV基因3型。
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关键词
禽戊型肝炎病毒
酶联免疫吸附试验
套式RT—PCR
序列分析
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职称材料
双峰驼血清IgG纯化及其抗血清制备
2
作者
贾存瑜
韩熙梦
+5 位作者
聂佳琪
张欣
焦韵洁
刘宝元
周恩民
穆杨
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第11期1584-1590,共7页
纯化双峰驼血清IgG并制备兔抗骆驼IgG抗血清,为制备针对特定蛋白的特异性纳米抗体储备材料,利用Protein G纯化双峰驼血清IgG,并用纯化的IgG免疫成年家兔后采用ELISA方法检测抗血清效价;采用间接ELISA方法,利用制备的抗血清检测PCV2 Cap...
纯化双峰驼血清IgG并制备兔抗骆驼IgG抗血清,为制备针对特定蛋白的特异性纳米抗体储备材料,利用Protein G纯化双峰驼血清IgG,并用纯化的IgG免疫成年家兔后采用ELISA方法检测抗血清效价;采用间接ELISA方法,利用制备的抗血清检测PCV2 Cap蛋白免疫双峰驼血清中抗Cap蛋白的抗体水平,Western blot技术检测制备的抗血清与从噬菌体纳米抗体库中筛选到的针对不同蛋白的纳米抗体的反应性,以确定抗血清的适用性。结果显示,从双峰驼血清中纯化到骆驼IgG,SDS-PAGE分析显示纯化的骆驼IgG包括3条链,约50ku的传统重链IgG1,约43ku缺失CH1的重链IgG3和约30ku的传统轻链;3次免疫后兔抗骆驼IgG抗血清效价达1∶512 000;应用制备的抗血清检测PCV2 Cap蛋白免疫5次的双峰驼血清中抗Cap蛋白的抗体效价达1∶1 024 000;制备的抗血清可以与原核表达的针对不同病毒蛋白的纳米抗体反应;说明制备的兔抗骆驼IgG抗血清可用于免疫骆驼血清和表达的纳米抗体的检测。研究结果为目标蛋白免疫骆驼后抗体效价检测及纳米抗体文库构建提供关键材料。
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关键词
骆驼
亲和层析
IGG
抗血清
纳米抗体
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职称材料
题名
陕西杨凌某蛋鸡场禽戊型肝炎病毒的检测
被引量：
4
1
作者
拓晓玲
刘宝元
陈宜阳
孙亚妮
赵钦
周恩民
机构
西北农林科技大学动物医学院/农业部兽用药物与诊断技术陕西科学观测实验站
出处
《动物医学进展》
北大核心
2017年第7期120-123,共4页
基金
"十三五"国家重点研发计划项目(2016YFD0500800)
国家自然科学基金项目(31372464
+1 种基金
31402233
31672583)
文摘
2014年-2015年陕西杨凌地区部分商品蛋鸡场产蛋量下降了10%~40%,剖检部分鸡只发现肝脏肿大出血。为确诊该疫情的病因,从发病的6个蛋鸡场采集了337份血清和268份粪便,利用间接ELISA和套式RT-PCR分别对血清中的禽戊型肝炎病毒(HEV)抗体和粪便中的禽HEV RNA进行了实验室检测。ELISA检测结果发现,168份血清为禽HEV抗体阳性,阳性率为49.85%;套式RT-PCR检测结果发现,63份粪便为禽HEV RNA基因片段阳性,阳性率为23.51%。基因片段的序列同源性分析发现,杨凌地区的禽HEV分离株与国内的同源性为93.0%~99.2%;进化树分析表明,其与国内其他地区的分离株在同一进化分支上,同属禽HEV基因3型。
关键词
禽戊型肝炎病毒
酶联免疫吸附试验
套式RT—PCR
序列分析
Keywords
Avian hepatitis E virus
ELISA, nested RT-PCR
sequence analysis
分类号
S852.657 [农业科学—基础兽医学]
S858.31 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
双峰驼血清IgG纯化及其抗血清制备
2
作者
贾存瑜
韩熙梦
聂佳琪
张欣
焦韵洁
刘宝元
周恩民
穆杨
机构
西北农林科技大学动物医学院/农业部兽用药物与诊断技术陕西科学观测实验站
出处
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第11期1584-1590,共7页
基金
国家重点研发计划(2016YFD0500706)~~
文摘
纯化双峰驼血清IgG并制备兔抗骆驼IgG抗血清,为制备针对特定蛋白的特异性纳米抗体储备材料,利用Protein G纯化双峰驼血清IgG,并用纯化的IgG免疫成年家兔后采用ELISA方法检测抗血清效价;采用间接ELISA方法,利用制备的抗血清检测PCV2 Cap蛋白免疫双峰驼血清中抗Cap蛋白的抗体水平,Western blot技术检测制备的抗血清与从噬菌体纳米抗体库中筛选到的针对不同蛋白的纳米抗体的反应性,以确定抗血清的适用性。结果显示,从双峰驼血清中纯化到骆驼IgG,SDS-PAGE分析显示纯化的骆驼IgG包括3条链,约50ku的传统重链IgG1,约43ku缺失CH1的重链IgG3和约30ku的传统轻链;3次免疫后兔抗骆驼IgG抗血清效价达1∶512 000;应用制备的抗血清检测PCV2 Cap蛋白免疫5次的双峰驼血清中抗Cap蛋白的抗体效价达1∶1 024 000;制备的抗血清可以与原核表达的针对不同病毒蛋白的纳米抗体反应;说明制备的兔抗骆驼IgG抗血清可用于免疫骆驼血清和表达的纳米抗体的检测。研究结果为目标蛋白免疫骆驼后抗体效价检测及纳米抗体文库构建提供关键材料。
关键词
骆驼
亲和层析
IGG
抗血清
纳米抗体
Keywords
Camelus bactrianus
Affinity chromatography
IgG
Antiserum
Nanobody
分类号
S852.5 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
陕西杨凌某蛋鸡场禽戊型肝炎病毒的检测
拓晓玲
刘宝元
陈宜阳
孙亚妮
赵钦
周恩民
《动物医学进展》
北大核心
2017
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
双峰驼血清IgG纯化及其抗血清制备
贾存瑜
韩熙梦
聂佳琪
张欣
焦韵洁
刘宝元
周恩民
穆杨
《西北农业学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
0
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0
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