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鸡传染性支气管炎病毒H120疫苗株全长cDNA感染性克隆的构建
被引量:
12
1
作者
周生
戴亚斌
+3 位作者
唐梦君
刘梅
程旭
吕晓娟
《中国家禽》
北大核心
2010年第23期22-26,共5页
根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗株的全基因组序列设计引物,采用RT-PCR方法对其基因组分10个片段进行扩增,并克隆至pMD19-T载体中进行测序。经BsaⅠ限制性内切酶酶切后,采用优化的连接策略将各DNA片段进行连接,获取H120株的基因...
根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗株的全基因组序列设计引物,采用RT-PCR方法对其基因组分10个片段进行扩增,并克隆至pMD19-T载体中进行测序。经BsaⅠ限制性内切酶酶切后,采用优化的连接策略将各DNA片段进行连接,获取H120株的基因组全长cDNA,其5′端具有完整的T7RNA聚合酶启动子的核心序列,3′端具有polyA尾巴结构。通过T7RNA聚合酶体外转录系统合成病毒基因组RNA,转染BHK-21细胞并进行病毒拯救。采用RT-PCR、测序及鸡胚传代对拯救出的病毒株进行鉴定。结果表明成功地从H120株的基因组全长cDNA拯救出病毒H120-R株,为进一步开展该病毒的分子致病机理研究、新型疫苗的研制等奠定了基础。
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关键词
传染性支气管炎病毒
H120疫苗株
感染性克隆
病毒拯救
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职称材料
题名
鸡传染性支气管炎病毒H120疫苗株全长cDNA感染性克隆的构建
被引量:
12
1
作者
周生
戴亚斌
唐梦君
刘梅
程旭
吕晓娟
机构
中国农业科学院
家禽
研究所
衣业
部
家禽
品质
监督
检验
测试中心
(
扬州
)
出处
《中国家禽》
北大核心
2010年第23期22-26,共5页
基金
江苏省自然科学基金(BK2008203)
江苏省家禽科学研究所科研基金(S015)
文摘
根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗株的全基因组序列设计引物,采用RT-PCR方法对其基因组分10个片段进行扩增,并克隆至pMD19-T载体中进行测序。经BsaⅠ限制性内切酶酶切后,采用优化的连接策略将各DNA片段进行连接,获取H120株的基因组全长cDNA,其5′端具有完整的T7RNA聚合酶启动子的核心序列,3′端具有polyA尾巴结构。通过T7RNA聚合酶体外转录系统合成病毒基因组RNA,转染BHK-21细胞并进行病毒拯救。采用RT-PCR、测序及鸡胚传代对拯救出的病毒株进行鉴定。结果表明成功地从H120株的基因组全长cDNA拯救出病毒H120-R株,为进一步开展该病毒的分子致病机理研究、新型疫苗的研制等奠定了基础。
关键词
传染性支气管炎病毒
H120疫苗株
感染性克隆
病毒拯救
Keywords
infectious bronchitis virus
H120 vaccine strain
infectious eDNA clone
virus rescue
分类号
S858.315.3 [农业科学—临床兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸡传染性支气管炎病毒H120疫苗株全长cDNA感染性克隆的构建
周生
戴亚斌
唐梦君
刘梅
程旭
吕晓娟
《中国家禽》
北大核心
2010
12
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