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猪δ冠状病毒(PDCoV)S蛋白的原核表达与鉴定
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作者 陈濛濛 黄嘉瑶 +6 位作者 彭春婷 高翠翠 王婕 唐斯萍 唐青海 胡意 李小申 《猪业科学》 2025年第2期73-80,共8页
猪δ冠状病毒(Porcine Deltacoronavirus,PDCoV)是一种新型猪肠道致病性冠状病毒,具有高度传染性和致病性,可导致仔猪水样腹泻、呕吐和死亡,对养猪业造成重大经济损失。自2012年在中国香港发布第一份报告以来,PDCoV已在美国、加拿大、... 猪δ冠状病毒(Porcine Deltacoronavirus,PDCoV)是一种新型猪肠道致病性冠状病毒,具有高度传染性和致病性,可导致仔猪水样腹泻、呕吐和死亡,对养猪业造成重大经济损失。自2012年在中国香港发布第一份报告以来,PDCoV已在美国、加拿大、韩国、中国内地、泰国、越南和日本被发现,因此,PDCoV最近表现出全球传播趋势,给养猪业带来更大挑战和风险。PDCoV的病毒粒子呈球形或椭圆形等多形性,是一种正义、单链RNA病毒,基因组约为25.4 kb,是现今已知的最小的冠状病毒。PDCoV编码15种成熟的非结构蛋白(nsp 2~nsp 16),四种结构蛋白(纤突(S)蛋白、包膜(E)蛋白、膜(M)蛋白、核衣壳(N)蛋白)和三种辅助蛋白(NS6、NS7和NS7a)。 展开更多
关键词 高度传染性 重大经济损失 水样腹泻 养猪业 非结构蛋白 猪肠道 核衣壳 纤突
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绿原酸与亮氨酸协同对育肥猪胴体性状、肉品质及血清生化指标的影响 被引量:5
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作者 吴青瑶 殷运菊 +5 位作者 王敏 潘俊毅 李凤娜 赵生国 陈国顺 郭秋平 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1060-1068,共9页
【目的】研究饲粮添加绿原酸与亮氨酸对生长育肥猪胴体性状、肉品质、背部脂肪酶活性及血清生化指标的影响,并探究绿原酸与亮氨酸是否存在协同作用效果。【方法】试验选取24头(公母各半)115日龄健康、体重相近(68.3 kg±1.3 kg)的杜... 【目的】研究饲粮添加绿原酸与亮氨酸对生长育肥猪胴体性状、肉品质、背部脂肪酶活性及血清生化指标的影响,并探究绿原酸与亮氨酸是否存在协同作用效果。【方法】试验选取24头(公母各半)115日龄健康、体重相近(68.3 kg±1.3 kg)的杜×长×大三元杂交育肥猪,采用单因子试验设计随机分成3组,每组8个重复,每个重复1头猪。对照组(A组)饲喂基础饲粮,绿原酸组(B组)和亮氨酸+绿原酸组(C组)分别在基础饲粮中添加0.05%绿原酸及0.25%亮氨酸+0.025%绿原酸。试验期25 d。试验结束后称重,统计试验猪生长性能;通过前腔静脉采集血液,检测血清生化指标;试验猪屠宰后进行胴体分割,测定胴体性状、背最长肌肉品质、背部脂肪脂代谢相关酶活性。【结果】与A组相比,B、C组育肥猪生长性能均差异不显著(P>0.05);B组育肥猪屠宰率和瘦肉率均显著提高(P<0.05),C组育肥猪瘦肉率显著提高(P<0.05),背膘厚显著降低(P<0.05);屠宰后45 min,B、C组育肥猪背最长肌pH均显著提高(P<0.05),B组背最长肌红度值显著降低(P<0.05),B、C组股二头肌粗脂肪含量显著增加(P<0.05);B组血清葡萄糖和丙二醛(MDA)含量均显著降低(P<0.05),背部脂肪组织酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶(ACAT)和脂蛋白脂肪酶(LPL)活性均显著增加(P<0.05);C组血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物岐化酶(SOD)活性及总抗氧化能力(T-AOC)均显著增加(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05),ACAT、LPL和激素敏感性脂肪酶(HSL)活性均显著增加(P<0.05)。与B组相比,C组育肥猪屠宰率显著降低(P<0.05),血清GSH-Px和SOD活性及T-AOC水平均显著增加(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05)。【结论】饲粮添加0.05%绿原酸可以提高育肥猪屠宰率及胴体瘦肉率;添加0.25%亮氨酸+0.025%绿原酸可以显著促进肌内脂肪沉积,降低背部脂肪沉积,提高抗氧化能力。 展开更多
关键词 绿原酸 亮氨酸 育肥猪 抗氧化能力 脂质代谢
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猪圆环病毒3型Cap蛋白的原核表达与鉴定
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作者 朱钰英 高翠翠 +6 位作者 唐青海 刘婷 赵婷芳 曾沛暄 赵铖 胡意 李小申 《湖南畜牧兽医》 2024年第2期35-38,共4页
[目的]研究旨在扩增PCV3病毒的Cap基因,体外表达PCV3 Cap蛋白。[方法]试验分别建立重组原核表达载体p ET28a-PCV3-Cap和p Cold-PCV3-Cap,转化Rosetta(DE3)表达菌株,在不同温度条件下诱导表达蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting进行蛋... [目的]研究旨在扩增PCV3病毒的Cap基因,体外表达PCV3 Cap蛋白。[方法]试验分别建立重组原核表达载体p ET28a-PCV3-Cap和p Cold-PCV3-Cap,转化Rosetta(DE3)表达菌株,在不同温度条件下诱导表达蛋白,采用SDS-PAGE和Western blotting进行蛋白鉴定。[结果]PCV3 Cap蛋白在p ET28a原核表达系统中无表达;Rosetta-p Cold-PCV3-Cap在诱导温度为15℃、IPTG浓度为1.0 mmo L/L、诱导4 h的条件下,能够表达分子量约为25 k Da的Cap蛋白,且为可溶性表达。[结论]试验成功制备了PCV3 Cap蛋白,为制备PCV3疫苗及其诊断方法的研究提供了基础材料。 展开更多
关键词 猪圆环病毒3型(PCV3) CAP蛋白 原核表达 鉴定
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音乐对猪的影响研究进展
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作者 唐小武 曾淑娟 +5 位作者 张嘉欣 尹怡萍 刘莹莹 杜云德 米春英 杨灿 《猪业科学》 2024年第2期112-114,共3页
猪只具有和人类非常相似的耳蜗,小型猪耳蜗的精细结构包括前庭鳞片、鼓膜鳞片、鼓膜鳞片、齿状骨、齿状骨韧带和耳蜗隔断,可以感知声音。声振动的频率以赫兹(Hz)为单位,猪只的听觉范围从42~40.5 kHz,最佳灵敏度区域从250~16 kHz。音乐... 猪只具有和人类非常相似的耳蜗,小型猪耳蜗的精细结构包括前庭鳞片、鼓膜鳞片、鼓膜鳞片、齿状骨、齿状骨韧带和耳蜗隔断,可以感知声音。声振动的频率以赫兹(Hz)为单位,猪只的听觉范围从42~40.5 kHz,最佳灵敏度区域从250~16 kHz。音乐能影响动物的情绪、学习和记忆能力。 展开更多
关键词 声振动 听觉范围 小型猪 耳蜗 齿状骨 鼓膜 学习和记忆能力 精细结构
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雁鹅菌菌丝培养条件优化研究
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作者 刘会敬 阳焱红 +3 位作者 朱斐淇 曾静 莫寒 杨期辉 《食品安全导刊》 2024年第2期140-143,共4页
为优化雁鹅菌菌丝的培养条件,以菌丝生长速度为评价指标,通过单因素试验分别确定雁鹅菌菌丝生长培养基的最佳碳源、氮源以及无机盐,并通过比较不同的营养元素浓度对雁鹅菌菌丝生长速度的影响,确定各营养元素的最佳添加区间,后续采用正... 为优化雁鹅菌菌丝的培养条件,以菌丝生长速度为评价指标,通过单因素试验分别确定雁鹅菌菌丝生长培养基的最佳碳源、氮源以及无机盐,并通过比较不同的营养元素浓度对雁鹅菌菌丝生长速度的影响,确定各营养元素的最佳添加区间,后续采用正交试验法优化雁鹅菌菌丝生长培养基中各营养元素的组合。结果表明,最佳碳源为可溶性淀粉,最佳氮源为胰蛋白胨,最佳无机盐为氯化钙。雁鹅菌菌丝生长培养基的最优组合为可溶性淀粉浓度5 g·L^(-1),胰蛋白胨浓度3 g·L^(-1),培养基中氯化钙浓度1.00 g·L^(-1)。 展开更多
关键词 雁鹅菌 菌丝生长 培养条件 正交试验
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凯氏定氮法测定杏鲍菇中蛋白质的条件优化研究
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作者 阳焱红 朱斐淇 +3 位作者 曾静 莫寒 杨期辉 刘会敬 《现代食品》 2024年第11期81-85,91,共6页
采用凯氏定氮法检测杏鲍菇中蛋白质含量,并通过单因素和响应面试验对消化时间、消化温度及催化剂用量等条件进行了优化。结果显示,凯氏定氮法检测杏鲍菇中蛋白质含量的最优条件参数为消化时间1.85 h,消化温度438℃,催化剂浓硫酸用量14.8... 采用凯氏定氮法检测杏鲍菇中蛋白质含量,并通过单因素和响应面试验对消化时间、消化温度及催化剂用量等条件进行了优化。结果显示,凯氏定氮法检测杏鲍菇中蛋白质含量的最优条件参数为消化时间1.85 h,消化温度438℃,催化剂浓硫酸用量14.8 mL,该条件下测定的杏鲍菇中蛋白质含量最高,为20.71 g/100 g。与国标法比较,本研究中优化后的方法提高了蛋白质含量的检测效率,减少了催化剂浓硫酸的用量,缩短了消化时间。 展开更多
关键词 蛋白质 响应面分析法 凯氏定氮法 杏鲍菇
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犬冠状病毒S1蛋白特异性小分子抗体Fab的制备 被引量:1
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作者 薛姣雄 赵婷芳 +9 位作者 张倩 唐青海 高翠翠 赵铖 张妍 全飞杨 刘婷 杨灿 杨海 王文秀 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第11期2568-2583,共16页
为表达犬冠状病毒(canine coronavirus,CCV)S1蛋白,制备其特异性小分子抗体Fab,为CCV的防治提供新材料。采用PCR扩增CCV S 1基因全长及其截短片段,分别克隆到原核表达载体pET28a或pGEX4T-1中,转到BL21(DE3)或Rosetta(DE3)感受态细胞构... 为表达犬冠状病毒(canine coronavirus,CCV)S1蛋白,制备其特异性小分子抗体Fab,为CCV的防治提供新材料。采用PCR扩增CCV S 1基因全长及其截短片段,分别克隆到原核表达载体pET28a或pGEX4T-1中,转到BL21(DE3)或Rosetta(DE3)感受态细胞构建重组表达菌株;用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白表达,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot鉴定分析重组蛋白;纯化蛋白分别与ISA71AVG或ISA201VG佐剂配伍乳化后制备免疫原,免疫蛋鸡,用聚乙二醇(PEG)沉淀法提取得到CCV S1蛋白的卵黄抗体,通过Western blot检测抗体滴度,用胃蛋白酶水解卵黄抗体制备小分子抗体Fab。结果显示,S1蛋白全长无表达,CCV S1-a和CCV S1-b分子量分别为79 ku和68 ku。在免疫后第35天2种佐剂组的卵黄抗体滴度可达1∶128000。制备小分子抗体Fab最佳酶切条件为卵黄抗体与胃蛋白酶混合质量比20∶1、pH值4.1、37℃酶切8 h。完整的IgY可以与CCV呈特异性反应,胃蛋白酶处理后制备的小分子抗体Fab可以有效阻断CCV的感染性。综上,本研究成功表达了CCV S1的2个截短片段蛋白,制备了卵黄抗体及其小分子抗体Fab,为进一步开展犬冠状病毒病的诊断和防治技术研究奠定了基础。 展开更多
关键词 犬冠状病毒 原核表达 佐剂 卵黄抗体 小分子抗体Fab
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赤霉素和褪黑素对辣椒种子萌发及幼苗生长的影响 被引量:4
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作者 李晶 何琼 +5 位作者 刘微 曹丽敏 李玉中 刘最 李应龙 刘宇华 《湖南农业科学》 2022年第9期4-9,共6页
为了提高辣椒种子的发芽率和幼苗质量,以辣椒材料NJ2、TJ7和CT3为试材,研究了不同浓度GA和MT处理对辣椒种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明:适当浓度的GA_(3)和MT均能提高辣椒种子的发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数,高效促进辣椒... 为了提高辣椒种子的发芽率和幼苗质量,以辣椒材料NJ2、TJ7和CT3为试材,研究了不同浓度GA和MT处理对辣椒种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明:适当浓度的GA_(3)和MT均能提高辣椒种子的发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数,高效促进辣椒种子萌发的GA_(3)最低临界浓度为0.9 mmol/L,比较合适的浓度为0.9~1.2 mmol/L;促进辣椒种子萌发的最佳MT浓度为150 μmol/L,在此浓度下辣椒材料的胚根长和胚芽长,NJ2分别比CK增加102.45%和65.61%、TJ7分别比CK增加119.85%和31.07%、CT3分别比CK增加69.23%和28.27%,然而,当MT浓度为250 μmol/L时,辣椒材料NJ2的胚根和胚芽生长明显受到抑制,其胚根长和胚芽长分别比CK降低44.60%和40.39%。 展开更多
关键词 赤霉素 褪黑素 辣椒 种子 萌发
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大孔树脂分离纯化紫苏叶总黄酮的工艺研究 被引量:1
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作者 周泉 唐恺 +3 位作者 张偶 姚雅薇 杨怡玲 刘最 《食品安全导刊》 2023年第10期136-139,共4页
为优化紫苏叶总黄酮的大孔树脂分离纯化工艺,以静态吸附率和解吸率为指标,比较了5种不同大孔树脂对紫苏叶总黄酮的吸附和解吸能力,筛选最优树脂,确定了最佳工艺参数。结果显示,D101型大孔树脂对紫苏叶总黄酮有较好的吸附和解吸效果,最... 为优化紫苏叶总黄酮的大孔树脂分离纯化工艺,以静态吸附率和解吸率为指标,比较了5种不同大孔树脂对紫苏叶总黄酮的吸附和解吸能力,筛选最优树脂,确定了最佳工艺参数。结果显示,D101型大孔树脂对紫苏叶总黄酮有较好的吸附和解吸效果,最佳条件为样品质量浓度3 mg·mL^(-1)、树脂质量3 g、pH4、50 mL 70%乙醇洗脱。此条件下,紫苏叶总黄酮的纯度为70.90%。 展开更多
关键词 紫苏 总黄酮 分离纯化 大孔树脂
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油茶饼粕多酚提取物对红提致病菌抑菌活性的研究 被引量:1
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作者 陈佩云 陈晓华 +1 位作者 孙伟峰 朱涵予 《现代食品》 2022年第19期195-199,共5页
本文对从贮存期发病红提果实中分离出的病原菌进行形态鉴定,并探究了油茶饼粕多酚粗提物的抑菌效果以及油茶饼粕多酚粗提物最低浓度、作用温度、作用时间对抑菌作用的影响。结果表明,分离出的菌株CoF1与CoF3可能为毛霉属真菌,菌株CoF2... 本文对从贮存期发病红提果实中分离出的病原菌进行形态鉴定,并探究了油茶饼粕多酚粗提物的抑菌效果以及油茶饼粕多酚粗提物最低浓度、作用温度、作用时间对抑菌作用的影响。结果表明,分离出的菌株CoF1与CoF3可能为毛霉属真菌,菌株CoF2可能为青霉属真菌。多酚粗提物对菌株CoF1、CoF2和CoF3、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌都有较好的抑菌效果,且多酚粗提物与菌悬液作用时间越长,其抑菌率越高,并具有较好的热稳定性。 展开更多
关键词 油茶饼粕 多酚 红提致病菌 抑菌活性
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猪圆环病毒2a型和2b型Cap蛋白的原核表达及鉴定
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作者 赵婷芳 高翠翠 +9 位作者 唐青海 赵铖 蔡林娜 侯鑫军 刘婷 全飞杨 胡意 刘会敬 杨灿 杨海 《湖南畜牧兽医》 2023年第1期38-43,共6页
为制备猪圆环病毒2a型(PCV2a)和2b型(PCV2b)Cap蛋白,用生物信息学软件优化PCV2a Cap基因和PCV2b Cap基因密码子、克隆至pET28a载体中、转化BL21(DE3)、构建重组蛋白表达菌株,通过优化原核表达的温度、IPTG浓度等条件进行蛋白表达,采用SD... 为制备猪圆环病毒2a型(PCV2a)和2b型(PCV2b)Cap蛋白,用生物信息学软件优化PCV2a Cap基因和PCV2b Cap基因密码子、克隆至pET28a载体中、转化BL21(DE3)、构建重组蛋白表达菌株,通过优化原核表达的温度、IPTG浓度等条件进行蛋白表达,采用SDS-PAGE和Western blot进行蛋白鉴定。结果显示:重组PCV2a-Cap蛋白和PCV2b-Cap蛋白的分子量约为30 kDa,在不同温度下都以包涵体形式存在,在37℃下以终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导表达的Cap蛋白表达量最高。试验成功制备了PCV2a-Cap蛋白和PCV2b-Cap蛋白,为制备PCV2二价疫苗及其诊断方法的研究提供了基础材料。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 CAP蛋白 原核表达 诱导 包涵体
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猪CD163基因的克隆及截短原核表达
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作者 刘雪晴 张可 +6 位作者 唐青海 薛姣雄 隆泽桧 高翠翠 刘之睿 苏荣 唐斯萍 《湖南畜牧兽医》 2023年第2期30-36,共7页
(目的)研究旨在克隆猪CD163 (pCD163)基因、体外表达CD163蛋白。(方法)采用RT-PCR扩增猪CD163基因,运用生物信息学软件分析其核苷酸和编码氨基酸序列,将猪CD163的两个截短基因片段(1-1749 bp和1717-3348 bp)克隆至原核表达载体pGEX-4T-1... (目的)研究旨在克隆猪CD163 (pCD163)基因、体外表达CD163蛋白。(方法)采用RT-PCR扩增猪CD163基因,运用生物信息学软件分析其核苷酸和编码氨基酸序列,将猪CD163的两个截短基因片段(1-1749 bp和1717-3348 bp)克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组原核表达载体,转化Transetta(DE3)菌株,IPTG诱导蛋白表达,采用SDS-PAGE和Western blot进行蛋白鉴定。(结果)结果表明,pCD163开放阅读框为3348 bp(GenBank:OM321546),编码1116 aa,蛋白分子量为120.5 kDa,该基因与已经测定的人、绿猴、牛、狼的CD163的核苷酸相似性依次为87.8%、88%、87.4%和88%,pCD163基因与抹香鲸和牛的CD163基因亲缘关系最近,与人、狼和绿猴的亲缘关系相对较近;pCD163截短片段1-1749蛋白分子量为92 kDa,截短片段1717-3348蛋白分子量为85 kDa,均以包涵体形式表达。(结论)试验成功克隆了pCD163基因,两个截短基因片段在原核细胞中均以包涵体形式表达,为后续开展该蛋白生物学功能研究提供了基础材料。 展开更多
关键词 猪CD163蛋白 进化分析 诱导 表达 包涵体
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柞市麻羊生产性能及肉品质研究
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作者 赵丹 王晓娟 +5 位作者 张亚兰 杨灿 唐小武 刘会敬 易诚 张旗 《湖南畜牧兽医》 2023年第6期9-13,共5页
试验旨在对特色羊品种柞市麻羊的生产性能及肉质性状进行详细的介绍。采集柞市麻羊的背最长肌和股四头肌,采用国标法测定其胴体性能、肉质性状、质构特性、肌纤维特性以及肌肉的常规营养成分。结果表明,不同月龄柞市麻羊的宰前活重介于2... 试验旨在对特色羊品种柞市麻羊的生产性能及肉质性状进行详细的介绍。采集柞市麻羊的背最长肌和股四头肌,采用国标法测定其胴体性能、肉质性状、质构特性、肌纤维特性以及肌肉的常规营养成分。结果表明,不同月龄柞市麻羊的宰前活重介于20.00~26.50 kg、胴体重介于8.50~11.40 kg、屠宰率介于42.50%~43.01%。麻羊羊肉粗蛋白含量介于9.13%~12.25%,粗脂肪含量介于0.93%~1.08%,钙、磷含量分别介于2.24%~3.36%和0.31%~0.42%。麻羊胸部肌肉的红度(a*值)和黄度(b*值)低于腿部,亮度(L*值)则相反;麻羊胸部肌肉的系水力较腿部好,p H和熟肉率低于腿部,新鲜腿部肌肉剪切力值低于胸部,蒸煮后则相反。麻羊胸部肌肉的硬度、胶着性和咀嚼性高于腿部,黏附性、回复性、内聚性以及弹性没有较大差异。麻羊胸部的肌纤维密度、细胞直径以及细胞面积都高于腿部。综上说明,柞市麻羊羊肉是一种高蛋白、低脂肪的优质蛋白质肉食品,具有较强的市场竞争优势和广泛的养殖前景。 展开更多
关键词 柞市麻羊 生产性能 肉质性状 质构特性
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紫苏叶中α-淀粉酶抑制剂的提取工艺研究
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作者 张偶 周泉 +3 位作者 杨怡玲 姚雅薇 唐恺 刘最 《现代食品》 2022年第18期71-74,共4页
本研究以紫苏叶为原料,选取料液比、提取温度、乙醇浓度和提取时间为自变量,α-AI的抑制率为因变量,采用超声辅助溶剂法提取α-AI。结果表明,在料液比为1∶20(g∶mL),提取温度为60℃,乙醇浓度为70%,提取时间为70 min的条件下,提取的α-A... 本研究以紫苏叶为原料,选取料液比、提取温度、乙醇浓度和提取时间为自变量,α-AI的抑制率为因变量,采用超声辅助溶剂法提取α-AI。结果表明,在料液比为1∶20(g∶mL),提取温度为60℃,乙醇浓度为70%,提取时间为70 min的条件下,提取的α-AI抑制率平均值为59.12%。 展开更多
关键词 紫苏叶 Α-淀粉酶抑制剂 抑制率
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