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犬细小病毒分子生物学研究进展被引量：7: 1; 作者张玉香李改茹 +3 位作者纪森林檀济敏王茹怡粟硕《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期993-997,共5页; 犬细小病毒（Canine parvovirus,CPV）属细小病毒科细小病毒属,自主复制型病毒,是最小的线状负链单股DNA病毒,其基因组全长5 323 nt。CPV具有细小病毒属的典型形态和结构。病毒粒子为等轴对称的二十面体,无囊膜。在电镜下观察,病毒颗粒... 展开更多; 关键词犬细小病毒细小病毒科病毒基因 PARVOVIRUS 衣壳细小病毒属负链结构蛋白病毒粒子遗传进化; 在线阅读下载PDF 职称材料

1株猪传染性胃肠炎病毒的分离鉴定及其生物学特性研究被引量：4: 2; 作者李晓楠唐青海 +4 位作者李羽王瑾姚伦广阚云超杨海《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2017年第8期131-136,共6页; 采集1例疑似感染猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)仔猪的粪便,运用RT-PCR方法和血清学方法对病料进行TGEV检测,并应用猪睾丸细胞(ST)进行病毒分离培养,分别采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)和RT-PCR方法检测病毒在ST细胞中的增殖动态,应... 展开更多; 关键词猪传染性胃肠炎病毒分离培养免疫过氧化物酶单层细胞染色法; 在线阅读下载PDF 职称材料

转录因子ELF4的免疫调节功能研究进展: 3; 作者唐青海彭永刚 +3 位作者杨海王芳宇何丽芳唐姣玉《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期919-922,共4页; ETS（E26 transformation specific）家族分子是多细胞生物的一类转录因子，因最早在禽骨髓成红细胞增生症病毒E26所表达的融合蛋白中发现的癌基因编码的蛋白而得名。该家族蛋白结构高度保守，其中具有一段85aa序列能够特异性地结合于DN... 展开更多; 关键词转录因子免疫调节功能融合蛋白多细胞生物基因编码细胞增生蛋白结构 DNA; 在线阅读下载PDF 职称材料

猪ELF4基因的克隆、蛋白表达及其多克隆抗体制备被引量：3: 4; 作者王瑾唐青海 +5 位作者谷雅静李晓楠李羽王雪雨姚伦广阚云超《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期425-435,共11页; 本研究旨在克隆猪转录因子ELF4基因,体外表达ELF4蛋白并制备抗该蛋白的多克隆抗体。采用RTPCR扩增猪ELF4基因,运用生物信息学软件分析其核苷酸和编码氨基酸序列特征,将其克隆至原核表达载体pET28a,构建重组表达载体pET28a-pELF4,转化Ros... 展开更多; 关键词猪ELF4蛋白原核表达免疫; 在线阅读下载PDF 职称材料

PEDV CH-HeB14株S1蛋白表达及其多克隆抗体的制备被引量：6: 5; 作者唐青海李晓蓉 +5 位作者杨海黎露陈果亮何丽芳刘最王芳宇《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2018年第4期1-12,共12页; 【目的】制备猪流行性腹泻病毒(PEDV)CH-HeB14毒株S1蛋白的多克隆抗体,为PEDV新流行毒株诊断试剂盒和疫苗研制提供基础材料。【方法】利用RT-PCR扩增PEDV CH-HeB14毒株S1基因,对序列特征进行生物信息学分析,用PCR将S1基因截成不同片段(... 展开更多; 关键词猪流行性腹泻病毒 S1蛋白多克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名犬细小病毒分子生物学研究进展被引量：7: 1; 作者张玉香李改茹纪森林檀济敏王茹怡粟硕; 机构衡阳师范学院生命科学与环境学院/生物药物研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期993-997,共5页; 基金中央高校基本科研业务费自主创新重点项目(Y0201600147) 江苏省优势学科建设项目; 文摘犬细小病毒（Canine parvovirus,CPV）属细小病毒科细小病毒属,自主复制型病毒,是最小的线状负链单股DNA病毒,其基因组全长5 323 nt。CPV具有细小病毒属的典型形态和结构。病毒粒子为等轴对称的二十面体,无囊膜。在电镜下观察,病毒颗粒的外观呈圆形或六边形,直径约为26 nm。; 关键词犬细小病毒细小病毒科病毒基因 PARVOVIRUS 衣壳细小病毒属负链结构蛋白病毒粒子遗传进化; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名1株猪传染性胃肠炎病毒的分离鉴定及其生物学特性研究被引量：4: 2; 作者李晓楠唐青海李羽王瑾姚伦广阚云超杨海; 机构南阳师范学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室/昆虫生物反应器河南省工程实验室衡阳师范学院生命科学与环境学院/生物药物研究所; 出处《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2017年第8期131-136,共6页; 基金河南省重点科技攻关项目(142102110101) 河南省高等学校重点科研项目(16A230023) +1 种基金衡阳师范学院引进人才专项(16D20); 文摘采集1例疑似感染猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)仔猪的粪便,运用RT-PCR方法和血清学方法对病料进行TGEV检测,并应用猪睾丸细胞(ST)进行病毒分离培养,分别采用免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)和RT-PCR方法检测病毒在ST细胞中的增殖动态,应用RT-PCR方法扩增分离TGEV S1基因,经序列测定后,采用DNAStar 7.0和Mega 5.0软件对TGEV进行生物信息学分析。结果表明,病料接种到ST细胞培养后,出现明显细胞病变效应(CPE);RT-PCR检测结果显示,TGEV核酸阳性;血清学鉴定TGEV抗原阳性。将分离毒株命名为TGEV-NY。感染12 h后,IPMA检测结果阳性,且可从细胞培养上清中检出TGEV核酸。序列测定分析表明,分离毒株S1基因开放阅读框(ORF)为2 220 bp,编码740个氨基酸。进化分析显示,分离毒株与我国2006年分离的SC-Y毒株亲缘关系最近,分离毒株属于基因Ⅰ群。; 关键词猪传染性胃肠炎病毒分离培养免疫过氧化物酶单层细胞染色法; Keywords transmissible gastroenteritis virus isolation and culture immunoperoxidase monolayer as-say SI gene; 分类号 S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名转录因子ELF4的免疫调节功能研究进展: 3; 作者唐青海彭永刚杨海王芳宇何丽芳唐姣玉; 机构衡阳师范学院生命科学与环境学院生物药物研究所中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期919-922,共4页; 基金国家自然基金青年基金(31101837); 文摘 ETS（E26 transformation specific）家族分子是多细胞生物的一类转录因子，因最早在禽骨髓成红细胞增生症病毒E26所表达的融合蛋白中发现的癌基因编码的蛋白而得名。该家族蛋白结构高度保守，其中具有一段85aa序列能够特异性地结合于DNA共有基序GGAA／T。; 关键词转录因子免疫调节功能融合蛋白多细胞生物基因编码细胞增生蛋白结构 DNA; 分类号 S852.61 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名猪ELF4基因的克隆、蛋白表达及其多克隆抗体制备被引量：3: 4; 作者王瑾唐青海谷雅静李晓楠李羽王雪雨姚伦广阚云超; 机构南阳师范学院河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室/昆虫生物反应器河南省工程实验室衡阳师范学院生命科学与环境学院生物药物研究所; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期425-435,共11页; 基金国家自然科学基金青年基金(31101837) 河南省重点科技攻关项目(142102110101) +1 种基金河南省高等学校重点科研项目(16A230023); 文摘本研究旨在克隆猪转录因子ELF4基因,体外表达ELF4蛋白并制备抗该蛋白的多克隆抗体。采用RTPCR扩增猪ELF4基因,运用生物信息学软件分析其核苷酸和编码氨基酸序列特征,将其克隆至原核表达载体pET28a,构建重组表达载体pET28a-pELF4,转化Rosetta(DE3)菌株,在不同温度、IPTG浓度、诱导时间等条件下进行诱导表达,采用SDS-PAGE和Western blot分析蛋白表达,重组pELF4蛋白(rpELF4)经纯化免疫鸡制备抗pELF4抗体。结果表明,pELF4开放阅读框为1 989bp(GenBank No.:KU097322),编码662个氨基酸,该基因与已经测定的人、牛、小鼠的ELF4的核苷酸相似性依次为89.4%、90.7%和81.1%,与牛等大动物的亲缘关系相对较近,与人和小鼠亲缘关系相对较远;结果显示,成功表达了重组蛋白pELF4,rpELF4分子量为95ku,该蛋白以可溶性和包涵体两种形式存在,在37℃条件下,以终浓度为0.8mmol·L-1IPTG诱导8h包涵体表达量达到最高。第4次免疫后第13天,鸡抗rpELF4抗体滴度达到1︰256 000倍以上。本试验利用原核表达系统成功制备了重组pELF4蛋白,并制备了免疫活性和特异性良好的鸡抗pELF4多克隆抗体,为该蛋白生物学功能及相关疾病研究提供了基础材料。; 关键词猪ELF4蛋白原核表达免疫; Keywords porcine ELF4 protein prokaryotic expression immunization; 分类号 S828 [农业科学—畜牧学] S813.1 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名PEDV CH-HeB14株S1蛋白表达及其多克隆抗体的制备被引量：6: 5; 作者唐青海李晓蓉杨海黎露陈果亮何丽芳刘最王芳宇; 机构衡阳师范学院生命科学与环境学院生物药物研究所衡阳师范学院湖南益豚生态农业有限责任公司联合研究中心中国科学院武汉病毒研究所; 出处《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2018年第4期1-12,共12页; 基金国家自然科学基金青年基金项目(31101837) 衡阳师范学院引进人才专项(16D20) 湖南省教育厅优秀青年项目(17B041); 文摘【目的】制备猪流行性腹泻病毒(PEDV)CH-HeB14毒株S1蛋白的多克隆抗体,为PEDV新流行毒株诊断试剂盒和疫苗研制提供基础材料。【方法】利用RT-PCR扩增PEDV CH-HeB14毒株S1基因,对序列特征进行生物信息学分析,用PCR将S1基因截成不同片段(S1A、S1B、S1C、S1C-1和S1C-2),分别克隆至原核表达载体pET28a,转化BL21(DE3)构建重组表达菌株;用IPTG诱导重组蛋白表达,并进行SDS-PAGE和Western blotting鉴定。将表达蛋白与佐剂乳化制备免疫原免疫兔多克隆抗体,Western blotting和免疫过氧化物酶单层细胞染色法(IPMA)检测抗体的免疫活性。【结果】PEDVS1、S1A、S1B、S1C、S1C-1和S1C-2片段长度依次为2 079,600,600,878,549和447bp。系统进化树表明,CH-HeB14株与2010年以来的22个新流行毒株亲缘关系较近,而与经典疫苗株CV777、attenuated DR13亲缘关系较远。成功截短表达了S1蛋白不同区段S1A、S1B和S1C-1重组蛋白(rS1A、rS1B和rS1C-1),且蛋白均以包涵体形式表达。制备了抗rS1A、rS1B和rS1C-1蛋白的多克隆抗体,其与这3种蛋白反应良好,且抗rS1A重组蛋白的多克隆抗体Western blotting效价为1∶32 000;IPMA结果显示,该抗体能与PEDV CHHeB14毒株和经典疫苗毒株attenuated DR13均发生特异性反应。【结论】成功克隆、表达了变异毒株PEDV CHHeB14的S1基因,所制备的S1蛋白多克隆抗体具有良好的免疫活性。; 关键词猪流行性腹泻病毒 S1蛋白多克隆抗体; Keywords porcine epidemic diarrhea virus S1 protein ； polyclonal antibody; 分类号 S858.28 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	犬细小病毒分子生物学研究进展	张玉香李改茹纪森林檀济敏王茹怡粟硕	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	7	在线阅读下载PDF 职称材料
2	1株猪传染性胃肠炎病毒的分离鉴定及其生物学特性研究	李晓楠唐青海李羽王瑾姚伦广阚云超杨海	《河南农业科学》 CSCD 北大核心	2017	4	在线阅读下载PDF 职称材料
3	转录因子ELF4的免疫调节功能研究进展	唐青海彭永刚杨海王芳宇何丽芳唐姣玉	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	猪ELF4基因的克隆、蛋白表达及其多克隆抗体制备	王瑾唐青海谷雅静李晓楠李羽王雪雨姚伦广阚云超	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2017	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	PEDV CH-HeB14株S1蛋白表达及其多克隆抗体的制备	唐青海李晓蓉杨海黎露陈果亮何丽芳刘最王芳宇	《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2018	6	在线阅读下载PDF 职称材料