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KIM-1对AGEs诱导的肾小管上皮细胞EMT和凋亡的影响及其机制 被引量：1
1
作者 张霄 张睿 +3 位作者 吴妍 李宁 曹雷 张长庚 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期2005-2013,共9页
目的:探讨肾损伤分子1(KIM-1)对晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导的人近端肾小管上皮HK-2细胞上皮-间充质转化(EMT)和凋亡的影响及其可能的机制。方法:将HK-2细胞分为对照组、AGEs组、AGEs+阴性对照小干扰RNA(NC siRNA)组和AGEs+KIM-1 siRN... 目的:探讨肾损伤分子1(KIM-1)对晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导的人近端肾小管上皮HK-2细胞上皮-间充质转化(EMT)和凋亡的影响及其可能的机制。方法:将HK-2细胞分为对照组、AGEs组、AGEs+阴性对照小干扰RNA(NC siRNA)组和AGEs+KIM-1 siRNA组。免疫荧光检测KIM-1蛋白的表达;Western blot检测KIM-1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-cadherin、Bcl-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、caspase-3、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白水平;RT-qPCR检测KIM-1 mRNA的表达;MTS检测细胞活力;TUNEL染色和annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞活性氧(ROS)水平。结果:与对照组比较,AGEs处理后的HK-2细胞中KIM-1蛋白、KIM-1 mRNA和α-SMA蛋白表达呈时间依赖性升高,E-cadherin蛋白表达和细胞活力呈时间依赖性降低,凋亡率呈时间依赖性升高,Bcl-2蛋白表达降低,Bax和caspase-3蛋白表达增加,ROS水平和ERK1/2磷酸化水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。转染KIM-1 siRNA能够在AGEs条件下减少HK-2细胞中KIM-1的表达(P<0.01)。与AGEs+NC siRNA组相比,敲减KIM-1的HK-2细胞经AGEs诱导后,细胞α-SMA蛋白表达显著降低,E-cadherin蛋白表达和细胞活力显著升高,细胞凋亡率显著降低,Bcl-2蛋白表达增加,Bax和caspase-3蛋白表达降低,ROS水平和ERK1/2磷酸化水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:AGEs刺激能够呈时间依赖性地上调HK-2细胞中KIM-1的表达;敲减KIM-1可抑制AGEs诱导的HK-2细胞EMT和凋亡,其机制可能与降低ROS水平和抑制ERK通路的激活有关。 展开更多
关键词 肾损伤分子1 晚期糖基化终末产物 HK-2细胞 上皮-间充质转化 细胞凋亡
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乙肝肾合剂辨证加减联合常规西药综合治疗乙型肝炎病毒相关性肾炎的临床观察 被引量：4
2
作者 王晓玲 苑玉聪 +1 位作者 郝金翠 宋君宇 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2017年第10期2114-2117,共4页
目的:观察乙肝肾合剂辨证加减联合常规西药综合治疗乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBV-GN)临床疗效。方法:纳入48例我院门诊和住院部HBV-GN患者,依据治疗方式不同,随机分为对照组和治疗组(各24例),均给予常规西药治疗,治疗组加用乙肝肾合剂辨... 目的:观察乙肝肾合剂辨证加减联合常规西药综合治疗乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBV-GN)临床疗效。方法:纳入48例我院门诊和住院部HBV-GN患者,依据治疗方式不同,随机分为对照组和治疗组(各24例),均给予常规西药治疗,治疗组加用乙肝肾合剂辨证加减综合治疗,比较两组治疗前后临床症状改善、肝、肾功能指标、HBV血清标记物变化和治疗效果。结果:治疗后,肝、肾功能异常、蛋白尿、血尿和下肢水肿患者均显著显著减少,且治疗组减少例数多于对照组,差异显著(P<0.05);治疗后两组TBIL、DBIL、ALT、PT水平显著下降,白蛋白水平显著上升,24 h尿蛋白、Scr和BUN水平均显著降低,Ccr水平显著升高,且治疗组降低或升高水平显著高于对照组,差异显著(P<0.05);治疗组HBeAg阴转率40%,HBs Ag阴转率25%,对照组分别为28.57%和20.83%,两组差异不显著(P>0.05);治疗后治疗组HBV-DNA拷贝量下降水平显著高于对照组(P<0.05);治疗组治疗总有效率91.67%,对照组66.67%,两组差异显著(P<0.05)。结论:乙肝肾合剂辨证加减联合常规西药治疗可显著改善乙型肝炎病毒相关性肾炎临床症状,改善患者肝、肾功能,疗效显著,值得临床推广应用。 展开更多
关键词 乙型肝炎 肾炎 乙肝肾合剂 辨证加减
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LINC00462通过MYC/ABCC3轴影响肾透明细胞癌细胞糖酵解进而调控其对顺铂的敏感性
3
作者 王晓玲 胡威威 孟莉丹 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期762-770,共9页
目的:探讨LINC00462招募转录因子MYC激活ABCC3对肾透明细胞癌(ccRCC)顺铂敏感性的影响及其机制。方法:数据库分析ccRCC组织中ABCC3、MYC和LINC00462的表达及其相关性,并分析ABCC3基因的富集通路。常规培养人肾小管上皮细胞(HK-2)和ccRC... 目的:探讨LINC00462招募转录因子MYC激活ABCC3对肾透明细胞癌(ccRCC)顺铂敏感性的影响及其机制。方法:数据库分析ccRCC组织中ABCC3、MYC和LINC00462的表达及其相关性,并分析ABCC3基因的富集通路。常规培养人肾小管上皮细胞(HK-2)和ccRCC细胞(A-498、786-O和Caki-2),将si-LINC00462、oe-ABCC3、si-ABCC3、si-MYC、si-LINC00462-NC、oe-ABCC3-NC、si-ABCC3-NC和si-MYC-NC核酸序列分别转染A-498或786-O细胞,分为si-LINC00462组、si-LINC00462-NC组、oe-ABCC3组、oe-ABCC3-NC组、si-ABCC3组、si-ABCC3-NC组、si-MYC组、si-MYC-NC组;用2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)进行回复实验,构建oe-NC+PBS组、oe-ABCC3+PBS组、oe-ABCC3+2-DG组;为探究ccRCC细胞LINC00462/MYC/ABCC3轴对顺铂敏感性的影响,构建si-NC+oe-NC组、si-LINC00462+oe-NC组、si-LINC00462+oe-ABCC3组。qPCR法检测ABCC3、MYC和LINC00462在ccRCC细胞中的表达,CCK-8法检测细胞增殖活力,CCK-8法分析梯度浓度顺铂处理ccRCC细胞后IC50值,WB法检测糖酵解代谢途径相关蛋白的表达,Seahorse XP96法检测各处理组细胞的胞外酸化率(ECAR)和耗氧率(OCR),试剂盒检测细胞中丙酮酸、乳酸、ATP水平。双荧光素酶报告基因和染色质免疫共沉淀(ChIP)实验验证ABCC3与MYC间的结合关系,RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)实验验证LINC00462和MYC的结合关系。结果:数据库分析和qPCR实验结果显示,ABCC3在ccRCC组织和细胞中呈高表达,差异基因富集在糖酵解通路上。敲减或过表达ABCC3能够增加A-498细胞或降低786-O细胞对顺铂的敏感性,ABCC3可通过促进有氧糖酵解抑制A-498细胞对顺铂的敏感性,2-DG处理可以逆转过表达ABCC3对ccRCC细胞对顺铂敏感性的抑制作用。MYC可直接和ABCC3结合,LINC00462可招募转录因子MYC;敲低LINC00462可抑制ABCC3的表达,敲低LINC00462可抑制ccRCC细胞的有氧糖酵解,并提高其对顺铂敏感性;而进一步过表达ABCC3可逆转敲低LINC00462对ccRCC细胞有氧糖酵解的抑制作用和顺铂敏感性的提高。结论:LINC00462通过招募转录因子MYC激活ABCC3的表达促进ccRCC细胞的糖酵解,进而促进ccRCC细胞对顺铂敏感性。 展开更多
关键词 LINC00462 MYC ABCC3 肾透明细胞癌 A-498细胞 786-O细胞 糖酵解 顺铂敏感性
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