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RNAi抑制MCF-7细胞survivin基因及对多西他赛敏感性影响
被引量：
5
1
作者
杨清玲
丁勇兴
+1 位作者
王惠
李成华
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期792-796,共5页
目的利用RNAi技术抑制乳腺癌细胞株MCF-7sur-vivin基因,观察MCF-7细胞株的细胞凋亡率、survivin蛋白表达及对多西他赛(docetaxel)药物敏感性的变化。方法以培养的乳腺癌MCF-7细胞株为体外研究模型,设对照组、空载体组及RNAi组进行实验。...
目的利用RNAi技术抑制乳腺癌细胞株MCF-7sur-vivin基因,观察MCF-7细胞株的细胞凋亡率、survivin蛋白表达及对多西他赛(docetaxel)药物敏感性的变化。方法以培养的乳腺癌MCF-7细胞株为体外研究模型,设对照组、空载体组及RNAi组进行实验。(1)半定量RT-PCR、Western blot法检测survivin mRNA、蛋白在各组细胞中的表达;(2)用流式细胞术分析各组细胞周期及细胞凋亡率的影响;(3)用MTT法分析多西他赛对各组细胞存活率作用的浓度。结果(1)RT-PCR检测结果显示,RNAi组survivin扩增条带(134bp)明显弱于空载体组及对照组,mRNA相对含量较空载体组明显下降(75.4%),差异有统计学意义(P<0.05);Western blot检测空载体组与对照组survivin蛋白条带明显存在,且基本一致,而RNAi组同样位置的条带基本消失(79.8%);(2)RNAi组细胞阻滞在G0/G1期,与空载体组和对照组分别比较,差异有统计学意义(P<0.05);(3)MTT比色法检测结果显示,不同浓度多西他赛处理后对照组、空载体组、RNAi组的IC50分别为(124.7±0.21)、(116.9±0.25)、(15.2±2.8)μg.L-1,RNAi组MCF-7细胞对多西他赛的药物敏感性增高(P=0.000)。结论RNAi明显抑制了survivin在转录及翻译水平的表达;RNAi抑制survivin基因表达,能明显提高乳腺癌MCF-7细胞对多西他赛的药物敏感性。
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关键词
乳腺癌
SURVIVIN
多西他赛
RNA干扰
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职称材料
vMIP对细胞膜上趋化因子受体亲和力的结合特性研究
被引量：
5
2
作者
杨清玲
丁勇兴
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期389-392,共4页
目的通过病毒巨噬细胞炎性蛋白(vMIP)对外周血中单个核细胞(PBMC)膜上趋化因子受体结合的比较性研究,阐明vMIP与受体的结合能力。方法通过放射性配体受体结合实验,利用饱和实验、动力学实验和特异性分析,鉴定vMIP的受体结合能力。结果v...
目的通过病毒巨噬细胞炎性蛋白(vMIP)对外周血中单个核细胞(PBMC)膜上趋化因子受体结合的比较性研究,阐明vMIP与受体的结合能力。方法通过放射性配体受体结合实验,利用饱和实验、动力学实验和特异性分析,鉴定vMIP的受体结合能力。结果vMIP与人、食蟹猴PBMC膜上受体结合的Kd分别为11.1、14.3nmol/L,对趋化因子受体CCR5和CXCR4竞争结合的IC50分别为3.4、4.5nmol/L。结论提示了vMIP与膜上受体有较高的亲和力,并对CCR5和CXCR4具有高度特异性,可能对防治炎症及HIV1感染等具有重要意义。
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关键词
病毒巨噬细胞炎性蛋白
趋化因子受体
放射性配体受体结合实验
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职称材料
题名
RNAi抑制MCF-7细胞survivin基因及对多西他赛敏感性影响
被引量：
5
1
作者
杨清玲
丁勇兴
王惠
李成华
机构
蚌埠
医学院生化与分子生物学教研室
蚌埠市中心医院肿瘤科
蚌埠
医学院临床检验诊断实验
中心
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第6期792-796,共5页
基金
安徽省自然科学基金资助项目(070413119)
安徽省临床医学应用技术研究计划项目(06B105)
蚌埠市科技计划项目(蚌科200617号)
文摘
目的利用RNAi技术抑制乳腺癌细胞株MCF-7sur-vivin基因,观察MCF-7细胞株的细胞凋亡率、survivin蛋白表达及对多西他赛(docetaxel)药物敏感性的变化。方法以培养的乳腺癌MCF-7细胞株为体外研究模型,设对照组、空载体组及RNAi组进行实验。(1)半定量RT-PCR、Western blot法检测survivin mRNA、蛋白在各组细胞中的表达;(2)用流式细胞术分析各组细胞周期及细胞凋亡率的影响;(3)用MTT法分析多西他赛对各组细胞存活率作用的浓度。结果(1)RT-PCR检测结果显示,RNAi组survivin扩增条带(134bp)明显弱于空载体组及对照组,mRNA相对含量较空载体组明显下降(75.4%),差异有统计学意义(P<0.05);Western blot检测空载体组与对照组survivin蛋白条带明显存在,且基本一致,而RNAi组同样位置的条带基本消失(79.8%);(2)RNAi组细胞阻滞在G0/G1期,与空载体组和对照组分别比较,差异有统计学意义(P<0.05);(3)MTT比色法检测结果显示,不同浓度多西他赛处理后对照组、空载体组、RNAi组的IC50分别为(124.7±0.21)、(116.9±0.25)、(15.2±2.8)μg.L-1,RNAi组MCF-7细胞对多西他赛的药物敏感性增高(P=0.000)。结论RNAi明显抑制了survivin在转录及翻译水平的表达;RNAi抑制survivin基因表达,能明显提高乳腺癌MCF-7细胞对多西他赛的药物敏感性。
关键词
乳腺癌
SURVIVIN
多西他赛
RNA干扰
Keywords
breast cancer
survivin
docetaxel
RNAi
分类号
R329.25 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
vMIP对细胞膜上趋化因子受体亲和力的结合特性研究
被引量：
5
2
作者
杨清玲
丁勇兴
机构
蚌埠
医学院生化与分子生物学教研室
蚌埠市中心医院肿瘤科
出处
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期389-392,共4页
基金
安徽省教育厅自然科学基金(2005kj374zc)资助项目
文摘
目的通过病毒巨噬细胞炎性蛋白(vMIP)对外周血中单个核细胞(PBMC)膜上趋化因子受体结合的比较性研究,阐明vMIP与受体的结合能力。方法通过放射性配体受体结合实验,利用饱和实验、动力学实验和特异性分析,鉴定vMIP的受体结合能力。结果vMIP与人、食蟹猴PBMC膜上受体结合的Kd分别为11.1、14.3nmol/L,对趋化因子受体CCR5和CXCR4竞争结合的IC50分别为3.4、4.5nmol/L。结论提示了vMIP与膜上受体有较高的亲和力,并对CCR5和CXCR4具有高度特异性,可能对防治炎症及HIV1感染等具有重要意义。
关键词
病毒巨噬细胞炎性蛋白
趋化因子受体
放射性配体受体结合实验
Keywords
viral macrophage inflammatory protein
chemokine receptor
radioligand receptor binding methods
分类号
R341 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
RNAi抑制MCF-7细胞survivin基因及对多西他赛敏感性影响
杨清玲
丁勇兴
王惠
李成华
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2008
5
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职称材料
2
vMIP对细胞膜上趋化因子受体亲和力的结合特性研究
杨清玲
丁勇兴
《上海交通大学学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2006
5
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