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紫花前胡苷通过抑制肠上皮细胞焦亡改善2,4,6-三硝基苯磺酸诱导的小鼠实验性结肠炎
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作者 黄菊 殷丽霞 +4 位作者 牛民主 耿志军 左芦根 李静 胡建国 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第2期261-268,共8页
目的探讨天然植物单体紫花前胡苷(Nod)对克罗恩病(CD)样结肠炎的影响及其作用机制。方法建立脂多糖和三磷酸腺苷(ATP)联合诱导的结肠类器官焦亡模型,通过检测焦亡关键调节因子、通透性和促炎因子,探讨Nod对细胞焦亡、肠道屏障功能和炎... 目的探讨天然植物单体紫花前胡苷(Nod)对克罗恩病(CD)样结肠炎的影响及其作用机制。方法建立脂多糖和三磷酸腺苷(ATP)联合诱导的结肠类器官焦亡模型,通过检测焦亡关键调节因子、通透性和促炎因子,探讨Nod对细胞焦亡、肠道屏障功能和炎症反应的影响。以2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)干预小鼠为CD动物模型,通过检测体质量、DAI评分、组织病理学分析、炎症评分、肠屏障功能和肠上皮细胞焦亡,探讨Nod对CD样结肠炎的治疗效果。通过网络药理学和体内、体外实验验证探索Nod保护肠上皮细胞焦亡的潜在机制。结果脂多糖和ATP诱导的结肠类器官经Nod干预后显著抑制NLRP3、GSDMD-N、cleaved caspase-1和caspase-11的表达,改善肠道FITC-dextran(FD4,4000)通透性,以及降低IL-1β和IL-18水平(P<0.05)。在TNBS诱导的结肠炎小鼠中,Nod治疗后能缓解小鼠体质量下降幅度、降低DAI评分、改善炎症细胞浸润和炎症评分(P<0.05),并降低血清中FD4、I-FABP的含量与细菌移位至肠系膜淋巴结、脾和肝脏中比例(P<0.05)。Nod可抑制小鼠肠黏膜中NLRP3、GSDMD-N、cleaved caspase-1和caspase-11的表达(P<0.05)。网络药理学预测分析显示,Nod抗结肠炎可能与PI3K/Akt通路有关;体内外实验证实,Nod抑制PI3K/Akt通路的激活,且PI3K/Akt通路的激活剂(IGF-1)逆转了Nod对肠上皮细胞焦亡和肠屏障功能的保护作用(P<0.05)。结论Nod至少部分通过抑制PI3K/Akt信号传导拮抗肠上皮细胞的焦亡,从而保护肠屏障功能和改善CD样结肠炎,有望成为一种新的CD治疗药物。 展开更多
关键词 克罗恩病 紫花前胡苷 细胞焦亡 肠上皮细胞 PI3K/AKT
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高表达SF3B3促进胃癌细胞恶性增殖并与患者不良预后相关
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作者 鲁辉 宋博文 +5 位作者 施金冉 王舜印 陈孝华 杨晶晶 葛思堂 左芦根 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第10期2240-2249,共10页
目的分析SF3B3在胃癌发展和预后中的作用,并探讨其潜在机制。方法利用TIMER2.0、GEPIA和UALCAN数据库分析SF3B3在多种癌症和胃癌中的表达模式,并通过胃癌组织免疫组化验证。通过Kaplan-Meier Plotter数据库及本院队列构建K-M生存曲线,采... 目的分析SF3B3在胃癌发展和预后中的作用,并探讨其潜在机制。方法利用TIMER2.0、GEPIA和UALCAN数据库分析SF3B3在多种癌症和胃癌中的表达模式,并通过胃癌组织免疫组化验证。通过Kaplan-Meier Plotter数据库及本院队列构建K-M生存曲线,采用Cox回归筛选术后5年生存的独立危险因素,通过ROC曲线AUC值评估预测价值。生物信息学富集分析预测SF3B3在胃癌中可能参与的生物学过程。通过慢病毒介导的SF3B3干扰和过表达,结合CCK-8及Transwell迁移和侵袭方法,探究SF3B3对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。免疫印迹法检测SF3B3对糖酵解关键蛋白表达的影响,通过测定细胞外酸化率(ECAR)探究SF3B3对糖酵解活性的作用。通过裸鼠成瘤实验,观察SF3B3对瘤体大小及对糖酵解关键蛋白表达的影响。结果SF3B3在胃癌中高表达,且与患者较差的预后相关(P<0.05)。多变量Cox回归分析显示,影响胃癌患者术后5年生存率的独立危险因素是高表达SF3B3、CEA≥5μg/L、CA19-9≥37 kU/L、肿瘤分期的T3-4期以及淋巴结转移分期的N2-3期(P<0.05)。生物信息学分析显示糖酵解显著富集。干扰SF3B3削弱了HGC-27细胞的增殖、迁移和侵袭能力,而过表达SF3B3相反(P<0.05)。免疫印迹分析显示,SF3B3干扰降低HK2、PKM2、LDHA蛋白的表达,而过表达则相反(P<0.05)。ECAR实验显示,敲低SF3B3降低HGC-27细胞的ECAR,而过表达呈升高趋势(P<0.05)。裸鼠成瘤实验结果显示,与对照组相比,SF3B3干扰组肿瘤质量减少,HK2、PKM2、LDHA蛋白表达下调,而SF3B3过表达组显示出相反趋势(P<0.05)。结论SF3B3过表达与胃癌患者的不良预后密切相关,其可能通过增强糖酵解作用促进胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 胃癌 SF3B3 不良预后 糖酵解
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蒙花苷通过抑制TLR4/NF-κB通路抑制小鼠脊髓损伤后小胶质细胞活化介导的神经炎症和神经元凋亡 被引量:6
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作者 肖林雨 段婷 +6 位作者 夏勇生 陈悦 孙洋 许轶博 徐磊 闫兴洲 胡建国 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1589-1598,共10页
目的探讨蒙花苷(LIN)在脊髓损伤(SCI)后对激活小胶质细胞介导的炎症和神经元凋亡的神经保护作用和潜在机制。方法将50只8~10周龄C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(Sham组)、脊髓损伤模型组(SCI组)和LIN药物治疗组(12.5、25、50 mg/kg),10只... 目的探讨蒙花苷(LIN)在脊髓损伤(SCI)后对激活小胶质细胞介导的炎症和神经元凋亡的神经保护作用和潜在机制。方法将50只8~10周龄C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(Sham组)、脊髓损伤模型组(SCI组)和LIN药物治疗组(12.5、25、50 mg/kg),10只/组。使用巴索小鼠评分量表(BMS)、斜板实验和脚印分析评估SCI小鼠的运动功能恢复情况;通过HE染色和LFB染色分别评估脊髓组织损伤面积和髓鞘化面积。采用Nissl染色、免疫荧光及Western blotting观察损伤脊髓组织前角运动神经元的保留情况。体外实验通过LPS诱导BV2细胞建立体外炎症模型,同时给予蒙花苷进行干预,将BV2细胞分为对照组(Con-B)、脂多糖组(LPS-B)及蒙花苷组(LIN-B)。通过免疫荧光、Western blotting、RT-qPCR及ELISA检测体内外小胶质细胞活化及炎症因子的释放情况,进一步采用Western blotting验证信号通路的改变。构建体外BV2细胞和HT22细胞共培养模型,分为Con-H组、LPS-H组以及LIN-H组。采用Western blotting检测激活小胶质细胞介导的HT22细胞凋亡情况。结果行为学检测发现,LIN组小鼠BMS评分显著提高,承受的斜板高度更高,后肢行走协调且足迹清晰(P<0.05)。组织学染色结果显示,LIN组小鼠脊髓组织损伤面积减少,髓鞘化面积增加,并且小鼠脊髓前角运动神经元的数量增加(P<0.05)。体内外实验证实,LIN显著抑制小胶质细胞的活化和炎症因子(iNOS、COX-2、TNF-α、IL-6、IL-1β)的释放,并减少了体内神经元的凋亡(P<0.05)。Western blotting显示LIN抑制小胶质细胞活化可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。体外共培养实验结果显示,LIN的干预能够减少炎症介导的神经元凋亡数量(P<0.05)。结论LIN可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路抑制小胶质细胞的激活,减轻神经炎症,改善SCI后的神经元凋亡,提高SCI小鼠运动能力,发挥其神经保护作用。 展开更多
关键词 脊髓损伤 蒙花苷 神经炎症 神凋亡 TLR4/NF-κB
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上调KLF11可改善结肠炎模型小鼠的肠道炎症:基于抑制JAK2/STAT3信号通路 被引量:2
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作者 席进 张敏 +6 位作者 张永玉 张晨 张雨路 王锐 申林 李静 宋雪 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期765-772,共8页
目的分析Kruppel样转录因子11(KLF11)在克罗恩病(CD)肠黏膜组织中的表达情况,并探究其对CD样结肠炎的作用和机制。方法以本院收集的CD患者结肠标本为实验组(CD,n=12),CRC患者结肠标本为对照组(Control,n=12),分析KLF11在病变和正常结肠... 目的分析Kruppel样转录因子11(KLF11)在克罗恩病(CD)肠黏膜组织中的表达情况,并探究其对CD样结肠炎的作用和机制。方法以本院收集的CD患者结肠标本为实验组(CD,n=12),CRC患者结肠标本为对照组(Control,n=12),分析KLF11在病变和正常结肠黏膜组织中的表达差异;构建TNBS诱导的小鼠模型,分析KLF11在小鼠结肠黏膜组织中的表达情况;利用腺相关病毒感染上调KLF11在小鼠中的表达,并观察其对小鼠CD样结肠炎的影响;通过慢病毒感染构建Caco-2细胞KLF11高表达稳定体系,并利用体内外免疫印迹实验探究KLF11对JAK2/STAT3信号通路蛋白的影响;采用信号通路激动剂处理KLF11表达上调的小鼠,验证肠道炎症反应的相关机制。结果免疫荧光染色分析显示,病变肠黏膜组织中KLF11表达水平较低(P<0.05),而TNBS小鼠结肠标本KLF11表达水平同样较低(P<0.05);通过腺相关病毒感染小鼠发现,上调KLF11能够改善TNBS小鼠肠炎症症状,并降低肠黏膜炎症因子的表达水平(P<0.05);利用慢病毒感染Caco-2细胞,通过免疫印迹筛选KLF11稳定高表达的细胞株(P<0.05);体内外免疫印迹实验均显示,上调KLF11抑制了小鼠肠黏膜组织及Caco-2细胞中p-JAK2和p-STAT3的表达水平;经JAK2/STAT3激活剂香豆霉素A1(COU)干预后显示,上调KLF11未能改善小鼠肠道炎症,同时肠黏膜炎症因子表达水平增加(P<0.05)。结论KLF11在CD肠黏膜中低表达,上调KLF11能改善肠炎症状、减少炎症因子分泌,其可能通过抑制JAK2/STAT3信号通路拮抗肠道炎症反应。 展开更多
关键词 克罗恩病 Kruppel样转录因子11 肠道炎症 JAK2/STAT3
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Swertiamarin通过抑制肠上皮细胞细胞凋亡改善TNBS诱导的实验性结肠炎
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作者 刘硕 李静 吴兴旺 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1545-1552,共8页
目的本研究旨在探讨Swertiamarin(STM)通过拮抗肠上皮细胞凋亡改善CD样结肠炎的作用和机制。方法体外建立TNF-α刺激的Caco-2细胞凋亡模型,分为3组:对照组(Con)、TNF-α刺激组(TNF-α)和STM干预组(STM),通过Tunel染色、免疫印迹、免疫... 目的本研究旨在探讨Swertiamarin(STM)通过拮抗肠上皮细胞凋亡改善CD样结肠炎的作用和机制。方法体外建立TNF-α刺激的Caco-2细胞凋亡模型,分为3组:对照组(Con)、TNF-α刺激组(TNF-α)和STM干预组(STM),通过Tunel染色、免疫印迹、免疫荧光和上皮电阻检测等方法,评估STM对细胞凋亡和屏障功能的影响。体内建立TNBS诱导的CD样结肠炎小鼠模型,分为3组:WT、TNBS和STM组,利用小鼠体质量变化、疾病活动指数评分、炎症评分和黏膜组织中炎症因子含量分析STM对结肠炎的作用;通过通透性、细菌移位率和紧密连接蛋白表达与定位观察STM对肠屏障功能的影响;使用Tunel染色和免疫印迹检测凋亡相关蛋白水平评估STM对上皮细胞凋亡的作用。体内外研究验证PI3K/AKT通路在STM抗肠上皮细胞凋亡中的调控作用。结果体外研究中TUNEL染色结果显示,STM显著得减少TUNEL着色的Caco-2细胞的比例(P<0.05);免疫印迹数据显示,STM组中cleavedcaspase3和Bax的表达低于TNF-α组(P<0.05),而Bcl2的水平则增高(P<0.05);肠屏障完整性和功能检测显示,STM恢复了TEER值(P<0.05)、促进了紧密连接蛋白(ZO1和claudin 1)的定位正常化和表达水平的上调(P<0.05),以及抑制了促炎因子(IL-6和CCL3)的表达(P<0.05)。体内研究显示STM能缓解结肠炎和肠屏障功能障碍,具体表现为体重下降、疾病活动指数(DAI)评分、炎症评分和促炎因子(IL-6和CCL3)释放以及肠屏障通透性、结肠TEER、细菌移位和紧密连接蛋白(ZO1和Claudin-1)定位与表达均得到了改善(P<0.05)。机制上,STM在体和体外均抑制了p-PI3K和p-AKT的表达(P<0.05),且PI3K/AKT通路的激活剂(740YP)阻遏了STM抗TNF-α诱导的Caco-2凋亡作用(P<0.05)。结论STM至少部分是通过抑制PI3K/AKT通路的激活,拮抗肠上皮细胞细胞的凋亡,进而改善肠屏障功能障碍和实验性结肠炎。 展开更多
关键词 克罗恩病 肠屏障 肠上皮细胞凋亡 SWERTIAMARIN PI3K/AKT通路
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樱花素对脊髓损伤后小胶质细胞介导的神经炎症的影响
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作者 肖林雨 陈悦 +6 位作者 段婷 孙洋 许轶博 赵雅静 宋雪 闫兴洲 胡建国 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期836-848,共13页
目的探讨樱花素对脊髓损伤(SCI)小鼠运动功能的作用及相关机制。方法将54只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、SCI组和樱花素组,假手术组小鼠仅行T9椎板切除术,而SCI组及樱花素组小鼠于T9椎节处进行脊髓撞击损伤,在术后的不同时间对各组小... 目的探讨樱花素对脊髓损伤(SCI)小鼠运动功能的作用及相关机制。方法将54只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、SCI组和樱花素组,假手术组小鼠仅行T9椎板切除术,而SCI组及樱花素组小鼠于T9椎节处进行脊髓撞击损伤,在术后的不同时间对各组小鼠进行行为学检测以评估各组小鼠运动能力。采用组织病理学评估各组小鼠SCI程度,通过基因本体和京都基因与基因组百科全书富集分析预测樱花素在SCI中的作用和机制,采用逆转录实时荧光定量PCR、ELISA和免疫荧光检测SCI小鼠体内炎症水平和小胶质细胞活化情况。体外利用脂多糖诱导BV2细胞活化并给予樱花素进行干预,分为对照组、脂多糖组和樱花素组,进一步评估樱花素干预对BV2细胞炎症因子释放和BV2细胞活化情况。采用磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路激活剂[胰岛素样生长因子-1(IGF-1)]体外干预樱花素诱导的BV2细胞(樱花素+IGF-1组),采用樱花素体外干预IGF-1诱导的BV2细胞(IGF-1+樱花素组),Western blot进行分子机制验证。结果行为学检测及组织学染色结果显示,与SCI组相比,樱花素组小鼠表现出更强的运动能力,且脊髓组织损伤面积明显减少(P均<0.001)。基因本体富集分析显示,樱花素可能参与SCI后的炎症过程,京都基因与基因组百科全书富集分析显示,樱花素可能调控PI3K/Akt通路发挥其神经保护作用。体内外实验结果显示,樱花素显著抑制肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6、白细胞介素-1β等炎症因子水平以及小胶质细胞的活化数量(P均<0.05)。Western blot结果显示,樱花素显著降低PI3K及Akt磷酸化水平(P均<0.001)且抑制IGF-1引起的PI3K及Akt磷酸化水平的提高(P均<0.001),而IGF-1的干预作用与之相反(P=0.001,P<0.001)。逆转录实时荧光定量PCR、ELISA及免疫荧光结果显示,樱花素+IGF-1组炎症因子水平和小胶质细胞活化数量较樱花素组均显著增加(P均<0.05)。结论樱花素可能通过抑制PI3K/Akt通路的激活抑制SCI后小胶质细胞介导的炎症反应,改善脊髓组织病理损伤并促进SCI小鼠运动功能的恢复。 展开更多
关键词 脊髓损伤 樱花素 小胶质细胞 炎症 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B
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升麻素抑制MAPK通路调节辅助性T细胞免疫平衡改善小鼠克罗恩病样结肠炎
7
作者 殷丽霞 牛民主 +4 位作者 张可妮 耿志军 胡建国 李江艳 李静 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第3期595-602,共8页
目的探索升麻素(CIM)对小鼠克罗恩病(CD)样结肠炎的作用以及可能的机制。方法30只体质量20~23 g(6~8周龄)的C57BL/6雄性小鼠随机分为空白对照组、2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)组和CIM组,10只/组。TNBS组使用TNBS灌肠建立CD样结肠炎模型,CI... 目的探索升麻素(CIM)对小鼠克罗恩病(CD)样结肠炎的作用以及可能的机制。方法30只体质量20~23 g(6~8周龄)的C57BL/6雄性小鼠随机分为空白对照组、2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)组和CIM组,10只/组。TNBS组使用TNBS灌肠建立CD样结肠炎模型,CIM组经TNBS灌肠后每日灌胃CIM(12.5 mg/kg)。通过记录小鼠体质量变化和疾病活动指数(DAI)评分,测量结肠长度,进行HE染色炎症评分以及检测肠黏膜中炎症因子水平评估CIM对小鼠结肠炎的作用;采用免疫荧光及免疫印记检测小鼠肠屏障损伤;流式细胞术检测各组小鼠肠系膜淋巴结中辅助性T细胞亚群的比例;通过网络药理学预测CIM潜在作用靶点,KEGG富集分析筛选关键通路,分子对接验证CIM与MAPK通路核心蛋白的结合能力;Western blotting验证MAPK信号通路的改变。结果CIM干预改善了TNBS诱导的小鼠体质量降低和结肠缩短,同时DAI评分和结肠组织炎症评分低于TNBS组(P<0.05)。ELISA和PCR检测结果显示,同TNBS组相比,CIM降低小鼠肠黏膜组织中促炎因子(IFN-γ和IL-17)的水平并促进抗炎因子(IL-4和IL-10)表达(P<0.05)。免疫荧光结果显示,CIM可改善TNBS诱导的小鼠上皮细胞Claudin-1的缺失和移位,以及杯状细胞的减少(P<0.05);免疫印记数据提示CIM组小鼠结肠黏膜中Claudin-1和ZO-1表达高于TNBS组(P<0.05)。流式细胞术检测结果表明CIM干预后肠系膜淋巴结中Th1和Th17细胞比例下降,而Th2及Treg细胞比例升高(P<0.05)。KEGG富集分析发现CIM对肠炎的作用可能与MAPK信号通路相关,分子对接显示,CIM与MAPK通路核心靶点之间有很好的结合,免疫印记结果显示p-JNK、p-ERK和p-p38在CIM组的小鼠肠黏膜中表达低于TNBS组(P<0.05)。结论CIM可改善肠屏障损伤从而缓解TNBS诱导的小鼠克罗恩病样结肠炎,这与其抑制MAPK信号通路的激活调节小鼠肠道Th1/Th2和Th17/Treg平衡有关。 展开更多
关键词 克罗恩病 升麻素 MAPK 辅助性T细胞 免疫平衡 肠屏障
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球松素靶向肠上皮细胞PI3K/AKT/CCL_(2)轴抑制巨噬细胞肠道浸润缓解葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎
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作者 张可妮 乔通 +5 位作者 尹林 黄菊 耿志军 左芦根 胡建国 李静 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第10期2199-2209,共11页
目的探讨天然黄酮类化合物球松素(PSB)调控巨噬细胞肠道浸润缓解葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎的作用机制。方法将30只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组(WT)、DSS模型组(DSS)及PSB干预组(30、60、120 mg/kg),6只/组。通过体质量变化... 目的探讨天然黄酮类化合物球松素(PSB)调控巨噬细胞肠道浸润缓解葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠结肠炎的作用机制。方法将30只C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组(WT)、DSS模型组(DSS)及PSB干预组(30、60、120 mg/kg),6只/组。通过体质量变化、疾病活动指数(DAI)、结肠长度及组织病理学评分评估结肠炎表型;免疫荧光检测紧密连接蛋白ZO-1/Claudin-1表达;流式细胞术定量分析结肠巨噬细胞(CD45^(+)F4/80^(+)CD11b^(+))浸润及极化表型(M1:iNOS^(+);M2:CD206^(+));ELISA及RT-qPCR检测炎症因子(TNF-α、IL-6)及趋化因子(CCL_(2)、CXCL_(10)、CX_(3)CL_(1))表达;Western blotting分析PI3K/AKT磷酸化水平;体外浓度梯度实验明确PSB抑制CCL_(2)的最佳剂量;Transwell实验验证CCL_(2)介导的巨噬细胞迁移;结合网络药理学预测关键靶点通路。结果预实验确定PSB 60 mg/kg为最佳治疗剂量,缓解DSS诱导的结肠炎症状:与DSS组相比,PSB组体质量下降减少(P<0.05),DAI评分降低(P<0.05),结肠长度恢复(P<0.05)。PSB上调紧密连接蛋白ZO-1/Claudin-1表达(P<0.05),抑制结肠固有层巨噬细胞浸润(F4/80阳性细胞显著减少,P<0.05)并调控其极化(抑制M1促炎亚群,激活M2修复亚群,P<0.05)。分子机制分析结果显示,PSB抑制肠上皮细胞PI3K/AKT磷酸化水平(P<0.05),抑制趋化因子CCL_(2)表达(P<0.05),并阻断CCL_(2)介导的RAW264.7细胞迁移,该效应可被外源性CCL_(2)逆转。网络药理学富集分析及体外补救实现证明PI3K/AKT及CCL_(2)趋化因子信号通路为核心调控靶点。结论球松素通过靶向抑制肠上皮细胞PI3K/AKT通路活化,减少CCL_(2)分泌,进而阻断巨噬细胞趋化迁移并调控其极化表型,缓解DSS诱导的小鼠结肠炎,为炎症性肠病的天然化合物干预提供新策略。 展开更多
关键词 球松素 葡聚糖硫酸钠 结肠炎 巨噬细胞浸润 PI3K/AKT信号通路 CCL_(2)
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高表达SURF4通过抑制紧密连接蛋白表达促进胃癌细胞的恶性生物学行为
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作者 王子良 陈孝华 +8 位作者 杨晶晶 严晨 张志郅 黄炳轶 赵萌 刘嵩 葛思堂 左芦根 陈德利 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第8期1732-1742,共11页
目的研究SURF4在胃癌中的表达情况及远期预后,进一步分析其影响胃癌细胞恶性生物学行为的可能作用途径。方法采用公共数据库初步验证SURF4在胃癌中表达高低及与不良预后之间的关系。回顾性分析蚌埠医科大学第一附属医院2016年1月~2019... 目的研究SURF4在胃癌中的表达情况及远期预后,进一步分析其影响胃癌细胞恶性生物学行为的可能作用途径。方法采用公共数据库初步验证SURF4在胃癌中表达高低及与不良预后之间的关系。回顾性分析蚌埠医科大学第一附属医院2016年1月~2019年10月共155例胃癌患者的信息,采用免疫组织化学方法检测癌和癌旁中SURF4表达水平,以SURF4表达量中位数(IOD=2.82)为界分为低表达组和高表达组,并分析与远期预后的关系。通过Cox比例风险模型筛选相关的独立预测因子,K-M生存曲线评估胃癌患者术后5年生存率。通过TISIBD数据库分析SURF4的表达水平与免疫细胞浸润方面的联系。采用GEO数据集筛选SURF4差异基因,利用GO和KEGG分析SURF4在胃癌中可能的分子机制及作用途径。在体外构建胃癌细胞系(HGC-27),并将SURF4分为上调组、下调组和2个对照组,采用CCK8、细胞划痕、Transwell、Western blotting实验证实对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化(EMT)的影响。结果GEPIA数据集及免疫组化结果提示,SURF4在胃癌中表达水平升高(P<0.05)。K-M生存分析显示SURF4过表达组患者术后5年生存期缩短(Log-rankχ^(2)=38.749,P<0.001)。Cox回归分析表明胃癌的预后与肿瘤T3~4期、N2~3期及CEA≥5μg/L、CA19-9≥37 kU/L密切相关(P<0.05)。TISIBD数据库分析SURF4的表达量与与活化B细胞、NK细胞及CD8+效应记忆T细胞呈现负相关(P<0.05);与CD4+T细胞呈现正相关(P<0.05)。富集分析预测SUFR4可能通过紧密连接途径发生EMT参与胃癌恶性演变。Western blotting结果显示上调SURF4使Ecadherin表达降低,N-cadherin表达升高(P<0.05)。过表达SURF4可以抑制ZO-1和Claudin-1的发生(P<0.05)。CCK8、细胞划痕和Transwell结果显示敲高SURF4可促进HGC-27胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。结论SURF4在胃癌组织中呈现高表达并且与患者5年生存期缩短显著相关,可能通过抑制紧密连接蛋白进而参与上皮细胞间质化使肿瘤发生增殖、迁移和侵袭等恶性生物学行为。 展开更多
关键词 胃癌 SURF4 预后 紧密连接蛋白 上皮间质转化
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小核核糖核蛋白D1在胃癌中的表达水平及对患者预后的影响
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作者 殷丽霞 杨晶晶 +3 位作者 牛民主 耿志军 李江艳 李静 《中国医学科学院学报》 北大核心 2025年第1期1-9,共9页
目的探讨小核核糖核蛋白D1(SNRPD1)在胃癌组织中的表达情况,分析其表达水平对胃癌患者远期预后的预测价值及可能的作用机制。方法采用UALCAN和基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库分析SNRPD1在泛癌中的表达水平及其与胃癌预后的关系。回顾... 目的探讨小核核糖核蛋白D1(SNRPD1)在胃癌组织中的表达情况,分析其表达水平对胃癌患者远期预后的预测价值及可能的作用机制。方法采用UALCAN和基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库分析SNRPD1在泛癌中的表达水平及其与胃癌预后的关系。回顾性分析2014年1月至2017年1月蚌埠医科大学第一附属医院行胃癌根治术的109例患者的临床资料。收集胃癌和癌旁组织,采用免疫组织化学染色检测SNRPD1的表达。采用慢病毒转染技术构建SNRPD1稳定高表达和低表达的BGC-823胃癌细胞模型,采用CCK-8法和细胞克隆实验分析SNRPD1对胃癌细胞增殖的影响,流式细胞术分析细胞周期改变,免疫印记法检测信号通路。结果UALCAN和GEPIA数据库分析结果显示SNRPD1在胃癌(P<0.001)等多种恶性肿瘤组织中呈高表达;免疫组织化学染色结果显示SNRPD1在胃癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.001),且表达量与胃癌患者癌胚抗原(P<0.001)、糖类抗原19-9(P<0.001)、G分期(P=0.042)、T分期(P=0.002)和N分期(P=0.027)呈正相关。SNRPD1高表达对胃癌远期预后具有预测价值(P<0.001),是胃癌患者死亡的独立危险因素(P=0.003)。基因本体和京都基因与基因组百科全书富集分析结果显示,SNRPD1生物学功能可能与调控细胞周期有关。CCK-8法和细胞克隆实验结果显示,上调SNRPD1可显著促进胃癌细胞增殖(P<0.001,P<0.001);免疫印迹法分析结果显示,上调SNRPD1使细胞周期蛋白依赖性激酶6、G 1/S-特异性周期蛋白-D1的表达显著增加(P<0.001,P=0.002),而干扰SNRPD1则结果相反(P=0.004,P<0.001)。流式细胞术结果显示SNRPD1加快胃癌细胞G 1/S期转变(P<0.001)。过表达SNRPD1可促进胃癌细胞磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(Akt)的表达(P=0.043,P<0.001),而干扰SNRPD1则抑制其表达(P均<0.001)。使用PI3K/Akt信号通路激动剂胰岛素样生长因子1干预后,显著促进了SNRPD1干扰组胃癌细胞的增殖能力(P=0.002)。结论SNRPD1在胃癌组织中的高表达与患者不良预后相关,其可能通过激活PI3K/Akt信号通路促进胃癌细胞增殖并调控细胞周期进程。 展开更多
关键词 胃癌 远期预后 小核核糖核蛋白D1 细胞周期 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路
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水晶兰苷通过抑制PI3K/AKT信号通路减少神经元凋亡改善脊髓损伤后小鼠的运动功能
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作者 陈悦 肖林雨 +3 位作者 任侣 宋雪 李静 胡建国 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第4期774-784,共11页
目的探究水晶兰苷(Mon)对脊髓损伤(SCI)小鼠运动功能的影响及其作用机制。方法采用脊髓撞击仪构建脊髓损伤小鼠模型,将小鼠随机分为Sham组、SCI组和SCI+Mon组,15只/组,SCI+Mon组小鼠每日腹腔注射0.2 mL的Mon溶液,其余2组注射等量生理盐... 目的探究水晶兰苷(Mon)对脊髓损伤(SCI)小鼠运动功能的影响及其作用机制。方法采用脊髓撞击仪构建脊髓损伤小鼠模型,将小鼠随机分为Sham组、SCI组和SCI+Mon组,15只/组,SCI+Mon组小鼠每日腹腔注射0.2 mL的Mon溶液,其余2组注射等量生理盐水。利用巴索小鼠量表(BMS)运动评分、斜板实验、足迹测试来评估小鼠的运动功能;通过苏木精-伊红、快蓝、尼氏染色观察SCI小鼠脊髓组织的病理学改变和神经元数量;通过GO功能富集和KEGG通路富集分析Mon在SCI中的生物学功能和作用机制;采用免疫荧光同时标记NeuN和cleaved-caspase3、Western blotting检测凋亡蛋白分析Mon对SCI小鼠脊髓中神经元凋亡的影响;培养小鼠海马神经元HT22细胞,利用Tunel染色分析Mon对HT22细胞凋亡的影响;结合体内外样本,采用Western blotting检测Mon对PI3K/AKT信号通路的影响,并增加回复实验检测加入通路激活剂后对神经元的凋亡及SCI小鼠运动恢复的影响。结果在体实验发现,相较于SCI组,SCI+Mon组小鼠的BMS评分、斜板实验角度、足迹测试评分均升高(P<0.01),脊髓损伤面积减小、髓鞘保留和神经元数量增加(P<0.01);生信分析发现Mon在SCI中可能发挥抗凋亡作用且与PI3K/AKT信号通路有关;免疫荧光结果显示,SCI+Mon组比SCI组小鼠神经元凋亡数量减少(P<0.01);Western blotting数据表明,Mon干预后小鼠脊髓中cleaved-caspase3和Bax的蛋白水平降低,而Bcl-2的表达量升高(P<0.05);体外实验也发现Mon可改善TNF-α诱导的HT22细胞凋亡(P<0.01);Mon能够抑制PI3K/AKT信号通路的激活(P<0.01);加入该通路的激活剂后,HT22细胞凋亡增加(P<0.01),cleaved-caspase3和Bax蛋白表达降低,而Bcl-2的表达量升高(P<0.05),且SCI小鼠的运动功能加剧(P<0.01)。结论Mon可通过减少神经元的凋亡促进SCI小鼠运动功能恢复,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 水晶兰苷 脊髓损伤 神经元 凋亡 PI3K/AKT
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旱莲苷A通过调控JAK2/STAT3通路抑制M1型巨噬细胞极化改善葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎
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作者 牛民主 殷丽霞 +6 位作者 乔通 尹林 张可妮 胡建国 宋传旺 耿志军 李静 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第6期1297-1306,共10页
目的 探讨旱莲苷A(ESA)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠炎症性肠病(IBD)模型的影响及其对巨噬细胞极化的作用机制。方法 体内实验采用24只8~10周龄雄性C57BL/6小鼠,随机分成对照组(WT组)、2.5%DSS诱导模型组(DSS组)、ESA治疗组(DSS+ESA组... 目的 探讨旱莲苷A(ESA)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠炎症性肠病(IBD)模型的影响及其对巨噬细胞极化的作用机制。方法 体内实验采用24只8~10周龄雄性C57BL/6小鼠,随机分成对照组(WT组)、2.5%DSS诱导模型组(DSS组)、ESA治疗组(DSS+ESA组,50 mg/kg),8只/组。每日记录小鼠体质量,观察粪便性状,通过DAI评分、结肠长度、脾指数、结肠组织HE染色及组织炎症评分、ELISA和RT-qPCR检测的肠黏膜炎症介质(TNF-α、IL-6和iNOS)水平评估ESA对小鼠肠炎症状的影响;采用AB-PAS染色标记杯状细胞,免疫荧光和Western blotting检测紧密连接蛋白水平(ZO-1和Claudin-1),评估ESA对小鼠肠道屏障的作用。体外培养小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7,分为Control组(M0组)、LPS(1μg/mL)+IFN-γ(20 ng/mL)诱导组(M1组)和ESA治疗组(ESA组,50μmol/L),采用流式细胞术评估ESA对小鼠肠系膜淋巴结及体外模型M1型极化标志物(CD86)比例的影响。Western blotting检测JAK2/STAT3通路关键蛋白表达,并使用信号通路激活剂RO8191(20μmol/L)干预,分析ESA调控巨噬细胞极化的分子机制。结果 体内实验显示,ESA可明显缓解DSS诱导的小鼠体质量下降、结肠长度缩短及DAI评分、脾指数、组织炎症评分的升高(P<0.05);HE结果显示,ESA可保护肠道固有层,减轻肠道炎症细胞浸润;ELISA和RT-qPCR显示,ESA可抑制DSS诱导的小鼠肠黏膜组织相关炎症介质(TNF-α、IL-6和iNOS)的高表达(P<0.05);AB-PAS和免疫荧光结果显示,ESA可保护结肠组织杯状细胞、黏液屏障和机械屏障的损伤。流式细胞术结果发现,ESA可降低DSS诱导的小鼠肠系膜淋巴结和体外诱导的M1型巨噬细胞极化标志物(CD86)的阳性比例(P<0.05)。Western blotting结果显示,体内外ESA治疗组p-JAK2和p-STAT3水平低于诱导组(P<0.05);体外经JAK2/STAT3激活剂RO8191干预后显示,ESA药物治疗未能抑制JAK2/STAT3信号通路活化,同时M1型极化标志物CD86阳性比例增加(P<0.05)。结论 ESA可靶向拮抗JAK2/STAT3通路活化介导的M1型巨噬细胞极化,抑制炎症因子导致的肠道屏障的损伤,从而缓解DSS诱导的小鼠结肠炎。 展开更多
关键词 旱莲苷A 炎症性肠病 肠屏障 巨噬细胞极化 JAK2/STAT3
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GPSM2在胃癌组织中高表达并通过促进肿瘤细胞的增殖影响患者预后
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作者 宋雪 陈悦 +8 位作者 张敏 张诺 左芦根 李静 耿志军 张小凤 王月月 王炼 胡建国 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第2期229-238,共10页
目的探究G蛋白信号调节因子2(GPSM2)表达水平与胃癌患者临床进展的关系,并进一步分析其功能途径和作用机制。方法基于基因表达谱交互式分析(GEPIA)数据库和收治于本院的109例胃癌患者,分析GPSM2在肿瘤中的表达水平;公共数据库分析GPSM2... 目的探究G蛋白信号调节因子2(GPSM2)表达水平与胃癌患者临床进展的关系,并进一步分析其功能途径和作用机制。方法基于基因表达谱交互式分析(GEPIA)数据库和收治于本院的109例胃癌患者,分析GPSM2在肿瘤中的表达水平;公共数据库分析GPSM2对胃癌患者术后生存率的影响;生物信息学富集分析GPSM2在胃癌中的功能学途径及作用机制;体外培养MGC803细胞,敲低或过表达GPSM2,利用CCK-8实验、细胞克隆形成实验、流式细胞术和免疫印迹实验分析GPSM2对细胞增殖、迁移的影响及其作用机制,在体通过观察裸鼠移植瘤的大小分析GPSM2对肿瘤生长的影响。结果GEPIA数据库分析发现,在胃癌组织中GPSM2的表达高于正常组织;免疫组化染色发现,GPSM2在胃癌组织中的表达量升高(P<0.01);临床数据分析显示,当GPSM2高表达时,T_(3~4)期、N_(2~3)期、术前外周血癌胚抗原(CEA)≥5μg/L和糖类抗原(CA19-9)≥37 kU/L的胃癌患者明显增多(P<0.05);单因素与Cox多因素联合分析证明,GPSM2蛋白表达量增加是影响胃癌患者术后5年生存率的独立危险因素(P<0.05)。基因本体论(GO)分析其生物学功能发现,GPSM2在胃癌中可能参与调控细胞周期(P<0.05)。体外细胞克隆形成实验和CCK-8实验发现GPSM2可加快MGC803细胞生长速度(P<0.05);通过免疫印迹与流式细胞技术发现,当GPSM2基因过表达时,将促进MGC803细胞从G1期向S期的转变(P<0.05),同时相关蛋白的表达也有所增加;裸鼠成瘤实验证明GPSM2促进移植瘤的生长;京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集显示GPSM2可能通过调控p53信号通路发挥生物学功能(P<0.05);体内和体外免疫印迹实验结果表明,提升GPSM2的表达水平能抑制p53信号通路活性(P<0.05)。结论GPSM2在胃癌组织中呈现高表达,促进胃癌细胞增殖及G1/S期的转变,影响患者术后生存率,其作用机制可能与抑制p53信号通路有关。 展开更多
关键词 胃癌 G蛋白信号调节因子2 预后 细胞周期 P53
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高表达MYO1B促进胃癌细胞增殖、迁移和侵袭并与患者的不良预后有关
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作者 黄晴晴 张文静 +7 位作者 张小凤 王炼 宋雪 耿志军 左芦根 王月月 李静 胡建国 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第3期622-631,共10页
目的明确肌球蛋白1B(MYO1B)在胃癌组织中的表达情况,并分析其对患者远期预后的评估价值以及对肿瘤细胞恶性生物学行为的影响和可能的机制。方法通过癌症公共数据库预测MYO1B在胃癌中的表达水平、与肿瘤分级、分期的相关性及对患者生存... 目的明确肌球蛋白1B(MYO1B)在胃癌组织中的表达情况,并分析其对患者远期预后的评估价值以及对肿瘤细胞恶性生物学行为的影响和可能的机制。方法通过癌症公共数据库预测MYO1B在胃癌中的表达水平、与肿瘤分级、分期的相关性及对患者生存情况的影响。纳入在我院接受胃癌根治术的患者105例,采用免疫组化技术检测MYO1B在胃癌和癌旁组织中的表达情况,分析其与胃癌恶性进展参数的关系,以及对患者术后5年生存率的影响和评估价值。通过GO和KEGG富集分析MYO1B可能作用于胃癌的生物学功能和途径。体外探究MYO1B差异表达对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用及机制。结果癌症公共数据库显示胃癌组织中MYO1B表达水平高于正常组织,与肿瘤分级和分期有关并影响患者预后(P<0.05)。MYO1B在胃癌组织中高表达且与Ki67表达正相关(r=0.689,P<0.05)。MYO1B高表达与胃癌恶性进展参数(CEA≥5μg/L、CA19-9≥37 kU/L、G3~4、T3~4及N2~3)相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析和多因素Cox回归显示,MYO1B高表达降低患者术后5年生存率且为独立危险因素(HR:3.522,95%CI:1.783~6.985,P<0.05)。ROC曲线反映,MYO1B表达水平对患者术后生存情况的预测能力较强(Cut off value:3.11,AUC:0.753,P<0.05)。MYO1B可能与细胞迁移和mTOR信号通路的调控有关(P<0.05)。上调MYO1B促进胃癌细胞增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05)。体外过表达MYO1B可促进信号分子Akt、mTOR的磷酸化(P<0.05)。结论MYO1B高表达可显著促进胃癌细胞增殖、迁移和侵袭,且与患者预后不良有关。 展开更多
关键词 胃癌 MYO1B 预后 增殖
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SORT1在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞生物学的影响
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作者 肖林雨 段婷 +3 位作者 夏勇生 陈悦 闫兴洲 胡建国 《中国医学科学院学报》 北大核心 2025年第3期343-353,共11页
目的探讨SORT1在胃癌组织中的表达情况,分析其与患者临床预后的关系以及参与胃癌进展的途径及机制。方法采用基因表达谱交互分析数据库、Western blot和免疫组织化学染色预测并分析SORT1在胃癌及癌旁组织中的表达情况。收集2015年4月至2... 目的探讨SORT1在胃癌组织中的表达情况,分析其与患者临床预后的关系以及参与胃癌进展的途径及机制。方法采用基因表达谱交互分析数据库、Western blot和免疫组织化学染色预测并分析SORT1在胃癌及癌旁组织中的表达情况。收集2015年4月至2017年4月蚌埠医科大学第一附属医院行胃癌根治术的109例患者的临床病例资料,分析SORT1与患者临床病理参数以及预后的关系。采用CCK-8法和克隆形成实验检测胃癌细胞的增殖情况,细胞划痕实验和Transwell实验检测胃癌细胞的迁移及侵袭能力,Western blot检测胃癌细胞上皮间质转化(EMT)过程中相关蛋白表达,并进一步分析SORT1调控胃癌细胞EMT的分子机制。结果Western blot和免疫组织化学染色结果显示,SORT1在胃癌组织中呈高表达(P=0.003,P<0.001),且与肿瘤的恶性进展呈正相关(P均<0.05);Kaplan-Meier生存分析显示,SORT1高表达患者的术后生存期明显缩短(P<0.001);Cox回归模型显示,SORT1表达是影响胃癌患者术后5年生存率的独立危险因素(P<0.001)。上调SORT1表达显著促进胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭以及EMT过程(P均<0.05),而下调SORT1结果则相反(P均<0.05)。Western blot结果显示,高表达SORT1显著促进β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1及c-Myc的蛋白表达(P均<0.05),且体外使用Wnt/β-连环蛋白通路抑制剂(XAV939)能够明显抑制高表达SORT1导致的胃癌细胞EMT能力的增强(P均<0.05)。结论SORT1在胃癌中高表达且影响患者术后生存期,其参与胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭,并可能通过激活Wnt/β-连环蛋白通路促进胃癌细胞EMT过程。 展开更多
关键词 胃癌 SORT1 预后 上皮间质转化 Wnt/β-连环蛋白通路
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川续断皂苷Ⅵ通过抑制PI3K/AKT/NF-κB通路拮抗肠上皮细胞凋亡缓解TNBS诱导的小鼠克罗恩病样结肠炎 被引量:2
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作者 牛民主 殷丽霞 +5 位作者 段婷 黄菊 李静 耿志军 胡建国 宋传旺 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期2335-2346,共12页
目的探讨川续断皂苷VI(AVI)对小鼠克罗恩病(CD)样结肠炎的肠上皮细胞凋亡和肠屏障的影响及其作用机制。方法将30只雄性C57BL/6小鼠随机分成对照组(WT组)、2,4,6-三硝基苯磺酸诱导模型组(TNBS组)、AVI药物治疗组(AVI组,150 mg/kg),每组1... 目的探讨川续断皂苷VI(AVI)对小鼠克罗恩病(CD)样结肠炎的肠上皮细胞凋亡和肠屏障的影响及其作用机制。方法将30只雄性C57BL/6小鼠随机分成对照组(WT组)、2,4,6-三硝基苯磺酸诱导模型组(TNBS组)、AVI药物治疗组(AVI组,150 mg/kg),每组10只。通过监测小鼠体质量、测量结肠长度、疾病活动度(DAI)评分、HE染色、AB-PAS染色、组织炎症评分、ELISA和RT-qPCR实验,验证AVI对小鼠结肠炎的缓解作用。采用TNF-α诱导Caco-2细胞建立体外凋亡模型,分为Control组、TNF-α组、AVI组(250μmol/L)。CCK-8实验检测AVI对Caco-2细胞活力的影响。采用免疫荧光、TUNEL实验和Western blotting检测AVI对小鼠肠上皮细胞和Caco-2细胞屏障损伤与凋亡的改善情况。利用网络药理学预测AVI干预CD的分子机制可能与PI3K/AKT/NF-κB通路有关,Western blotting检测体内外通路的蛋白表达,以及经PI3K/AKT通路激活剂(Recilisib)和AKT1 siRNA转染干预细胞后,通过TUNEL实验和Western blotting验证其对细胞凋亡的调控作用。结果AVI能明显地缓解小鼠体质量降低、结肠缩短、DAI与组织炎症评分的增加、肠绒毛和杯状细胞的损伤,以及炎症因子的高表达(P<0.05)。AVI浓度在0~250μmol/L时对Caco-2细胞活力无影响。体内外实验证实,AVI可阻断紧密连接蛋白的缺失,减少肠上皮细胞的凋亡(P<0.05)。KEGG富集通路分析发现AVI干预CD可能与抑制PI3K/AKT/NF-κB通路活化有关,在体内外模型证实AVI干预后p-PI3K、p-AKT和p-p65的表达降低(P<0.05)。此外,Recilisib干预后可逆转AVI对通路的抑制作用和抗凋亡作用(P<0.05),AKT1 siRNA转染细胞后证实PI3K/AKT通路可介导下游NF-κB信号的活化(P<0.05)。结论AVI可通过拮抗肠上皮细胞的凋亡和减轻肠屏障损伤,达到改善TNBS诱导的CD小鼠结肠炎的目的,其机制可能与AVI负向调控PI3K/AKT/NF-κB有关。 展开更多
关键词 克罗恩病 川续断皂苷Ⅵ 凋亡 肠屏障 PI3K/AKT/NF-κB
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CEP192过表达可作为胃癌患者不良预后的生物标志物并通过调控G2/M期关键蛋白的表达影响肿瘤细胞恶性增殖 被引量:1
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作者 张震 鲁辉 +5 位作者 陈孝华 王炼 王子良 王月月 葛思堂 左芦根 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期2137-2145,共9页
目的探讨CEP192在胃癌中的表达情况及其预后价值,进一步研究其对胃癌细胞生物学功能的影响。方法利用公共数据库探究CEP192在胃癌组织中的表达程度,通过免疫组织化学技术进一步验证CEP192在胃癌中的具体表达状态。通过构建Kaplan-Meier(... 目的探讨CEP192在胃癌中的表达情况及其预后价值,进一步研究其对胃癌细胞生物学功能的影响。方法利用公共数据库探究CEP192在胃癌组织中的表达程度,通过免疫组织化学技术进一步验证CEP192在胃癌中的具体表达状态。通过构建Kaplan-Meier(K-M)生存曲线,探究CEP192蛋白表达与胃癌患者长期预后的关联性。同时,利用单因素和多因素Cox回归分析模型,深入分析影响胃癌患者根治术后5年生存率的风险因素。通过受试者工作特征(ROC)曲线分析评估CEP192表达水平在预测胃癌患者术后5年生存率的价值。生物信息学功能富集预测CEP192在胃癌发生发展中可能参与的生物学过程。采用慢病毒干扰及过表达CEP192,CCK-8法检测CEP192对胃癌细胞增殖能力的影响,免疫印迹法检测CEP192对胃癌细胞G2/M期关键蛋白PLK1、CDK1、Cyclin B1的影响。将慢病毒稳定转染的各组细胞接种于裸鼠背部皮下进行裸鼠成瘤实验,在体观察CEP192对小鼠体质量、瘤体大小及G2/M期关键蛋白的影响。结果CEP192在胃癌中高表达且与患者预后不良相关(P<0.05)。多因素Cox回归分析发现,CEP192高表达、CEA≥5 ng/mL、CA199≥37 IU/mL、T3-4期和N2-3期均为影响胃癌患者术后5年生存率的独立危险因素(P<0.05)。GO及REACTOME基因富集分析提示CEP192可能参与细胞周期等生物学过程,GSEA基因集富集分析结果显示CEP192对细胞周期过程呈现正向调控。CCK-8结果示干扰CEP192后MGC-803细胞的增殖能力减弱,过表达细胞增殖能力增强(P<0.05)。免疫印迹结果显示干扰CEP192后PLK1、CDK1、Cyclin B1蛋白表达水平下降,过表达呈上升趋势(P<0.05)。裸鼠皮下成瘤实验结果显示,与对照组相比,干扰CEP192小鼠体质量降低,肿瘤体积变小,PLK1、CDK1、Cyclin B1蛋白水平下调,过表达CEP192则呈现相反趋势(P<0.05)。结论CEP192在胃癌组织中高表达,与患者的不良预后相关,其可能通过调控G2/M期关键蛋白的表达影响肿瘤细胞恶性增殖。 展开更多
关键词 胃癌 CEP192 不良预后 增殖 细胞周期
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PCID2在胃癌组织中高表达并通过调控细胞周期进程和增殖影响患者预后
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作者 张诺 张震 +5 位作者 张雨路 宋雪 张小凤 李静 左芦根 胡建国 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期324-332,共9页
目的探讨扩增基因PCI结构域2(PCID2)在胃癌中的表达情况及其对细胞周期进程和增殖的影响,并分析其可能的分子机制。方法纳入2012年1月~2016年12月在我院接受胃癌根治术的患者100例,检测胃癌和癌旁组织中PCID2的表达差异;统计学分析PCID... 目的探讨扩增基因PCI结构域2(PCID2)在胃癌中的表达情况及其对细胞周期进程和增殖的影响,并分析其可能的分子机制。方法纳入2012年1月~2016年12月在我院接受胃癌根治术的患者100例,检测胃癌和癌旁组织中PCID2的表达差异;统计学分析PCID2表达水平对胃癌进展及术后5年生存率的影响;采用GO富集分析预测PCID2参与胃癌恶性进展的可能作用途径;体外采用慢病毒转染特异性敲低和过表达胃癌细胞系(MGC-803)中PCID2表达,并分析其对细胞增殖及周期的影响;进一步通过裸鼠移植瘤模型进行在体验证;最后通过组织样本分析结合体内外研究,分析PCID2影响胃癌细胞的分子机制。结果相较于癌旁组织,PCID2在胃癌组织中高表达(P<0.01);胃癌组织中PCID2表达水平与外周血中CA19-9及CEA水平呈正相关(P<0.001);以胃癌组织中PCID2相对表达水平(IOD值)的中位数(3.085)为界,将纳入研究的患者分为PCID2高表达组(n=50)和PCID2低表达组(n=50),PCID2高表达组患者术后5年生存率显著低于PCID2低表达组(P<0.001);单因素结合Cox多因素分析表明胃癌组织中PCID2高表达是影响患者术后5年生存率的独立危险因素(HR:2.987,95%CI:1.616-5.519);ROC曲线分析显示,以PCID2相对表达水平(3.035)为截点值,评估胃癌患者术后5年生存率的敏感性为76.74%,特异性为75.44%,曲线下面积为0.755(P<0.001)。GO功能富集分析提示PCID2可能与胃癌细胞周期进程有关(P<0.01)。体外实验证实,PCID2过表达可促进胃癌细胞增殖、G1/S期转变和细胞周期相关蛋白(CyclinD1、CDK6)的表达,而敲低则反之(P<0.05)。裸鼠成瘤实验证明,PCID2过表达可促进裸鼠移植瘤的生长,而敲低则抑制(P<0.05)。组织样本分析联合体内外研究表明,胃癌组织中p27、p16蛋白表达水平较癌旁组织均明显降低(P<0.05)。此外,PCID2过表达抑制细胞周期调控蛋白p27、p16的表达,敲低则相反(P<0.05)。结论PCID2在胃癌组织中高表达且与患者预后不良密切相关,其可能通过抑制p27、p16表达促进胃癌细胞增殖和细胞周期进程。 展开更多
关键词 胃癌 PCID2 预后 细胞周期 增殖
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