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LY294002靶向抑制PI3K/Akt信号通路干预K562细胞增殖的研究 被引量:9
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作者 耿英华 武文娟 +1 位作者 于北凯 夏瑞祥 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第3期295-299,共5页
目的探讨PI3K/Akt抑制剂LY294002对慢性髓系白血病细胞株K562的增殖抑制作用及相关机制。方法 MTT法检测LY294002对K562细胞增殖的抑制作用;10、20μmol/L LY294002作用K562细胞36 h,流式细胞术观察细胞周期的变化,RT-PCR法测定LY294002... 目的探讨PI3K/Akt抑制剂LY294002对慢性髓系白血病细胞株K562的增殖抑制作用及相关机制。方法 MTT法检测LY294002对K562细胞增殖的抑制作用;10、20μmol/L LY294002作用K562细胞36 h,流式细胞术观察细胞周期的变化,RT-PCR法测定LY294002对K562细胞Skp2基因表达的影响,Western blot法检测Skp2蛋白表达的变化。结果 LY294002能够抑制K562细胞的生长,该抑制作用具有浓度及时间依赖性(P<0.05)。LY294002作用K562细胞36 h,随着浓度的增加,G0/G1期阻滞增强,S期细胞减少(P<0.05),Skp2的mRNA表达量减少,Skp2蛋白的表达量显著降低。结论 LY294002能够抑制K562细胞的生长,诱导细胞发生G0/G1期阻滞,这可能是通过LY294002影响了Skp2表达而实现的。 展开更多
关键词 LY294002 PI3K Akt SKP2 K562
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RUNX1基因突变对成人急性髓细胞白血病的预后有不良影响 被引量:6
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作者 杨艳丽 李甜甜 +1 位作者 耿英华 李骏 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1601-1606,共6页
目的了解Runt相关的转录因子1(RUNX1)在急性髓系白血病(AML)中的突变率及分布情况;探索RUNX1基因突变与临床特征的相关性及其对患者预后的影响。方法收集158例初发AML患者的骨髓标本,提取骨髓基因组DNA,采用聚合酶链式反应技术(PCR)扩... 目的了解Runt相关的转录因子1(RUNX1)在急性髓系白血病(AML)中的突变率及分布情况;探索RUNX1基因突变与临床特征的相关性及其对患者预后的影响。方法收集158例初发AML患者的骨髓标本,提取骨髓基因组DNA,采用聚合酶链式反应技术(PCR)扩增目的基因片段,应用基因测序分析RUNX1基因突变情况。同时检测ASXL1、DNMT3A、TET2、FLT3、CEBPA、NPM1、IDH2、NRAS及c-KIT突变情况,分析其突变与RUNX1突变的关系。用Kaplan-Meier方法进行生存分析,并行Log-rank检验比较生存时间差异。结果158例初发急性髓系白血病患者中,共发现RUNX1突变19例,突变率为12.0%,其中A166G 9例,A142T 6例,A162L 4例。RUNX1基因突变组与野生型组的年龄差异有统计学意义(P<0.01),突变组患者年龄偏大,在M4和M5型中的发生率较高,较野生型组更易表达CD36、CD7。RUNX1突变发生于正常核型或预后中等风险核型的患者中,但差异均无统计学意义(P>0.05)。突变组的完全缓解率和生存率均低于野生型组(P<0.05),而两组在性别、初诊时白细胞计数、血红蛋白、血小板计数、骨髓原始细胞比例以及乳酸脱氢酶水平的差异无统计学意义(P>0.05)。结论RUNX1基因突变对AML患者的预后具有不良影响。 展开更多
关键词 RUNX1基因 急性髓系白血病 基因突变
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LY294002增强K562细胞对柔红霉素敏感性的研究 被引量:1
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作者 耿英华 武文娟 +2 位作者 李骏 周黎黎 杨艳丽 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期110-118,共9页
目的:探讨PI3K/Akt抑制剂LY294002联合蒽环类化疗药物柔红霉素(DNR)对慢性髓系白血病细胞株K562细胞增殖的抑制作用、促凋亡作用及其相关机制。方法:应用MTT法检测LY294002和DNR在不用浓度、不同作用时间点对K562细胞增殖的影响,流式细... 目的:探讨PI3K/Akt抑制剂LY294002联合蒽环类化疗药物柔红霉素(DNR)对慢性髓系白血病细胞株K562细胞增殖的抑制作用、促凋亡作用及其相关机制。方法:应用MTT法检测LY294002和DNR在不用浓度、不同作用时间点对K562细胞增殖的影响,流式细胞术分析细胞周期的变化,应用RT-PCR和Western blot法检测LY294002和DNR对K562细胞SKP2、P27、BCL-2和BAX2基因和蛋白表达的影响。结果:LY294002联合DNR能够抑制K562细胞的生长并促进细胞凋亡,且具有浓度及时间依赖性(P<0.05);2药联合后细胞增殖抑制率及细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。2药联合作用于K562细胞36 h,随着浓度的增加其G2/M期细胞显著减少(P<0.05),与DNR单药比较,G0/G1期细胞数增加(P<0.05),S期细胞减少,但差异无统计学意义。2药联合作用后,SKP2及BCL-2的mRNA表达量降低,P27 mRNA表达增高,差异具有统计学意义。BAX的表达在各实验组中的差异无统计学意义。相应的蛋白表达水平与之相符。结论:LY294002对DNR的化疗作用有增敏效果,其作用机制可能与阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 LY294002 柔红霉素 白血病 细胞增殖 细胞凋亡
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急性髓系白血病中DKK-3和WIF-1甲基化状态和mRNA表达的研究 被引量:11
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作者 徐濛濛 杨艳丽 +4 位作者 耿英华 李骏 马跃 张凤 朱芳兵 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期1314-1320,共7页
目的:研究DKK-3和WIF-1在急性髓系白血病(AML)患者中的启动子甲基化状态和mRNA表达情况及其临床意义。方法:用甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)检测56例AML患者骨髓标本和20例缺铁性贫血患者(对照组)骨髓标本中DKK-3和WIF-1启动子甲基... 目的:研究DKK-3和WIF-1在急性髓系白血病(AML)患者中的启动子甲基化状态和mRNA表达情况及其临床意义。方法:用甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)检测56例AML患者骨髓标本和20例缺铁性贫血患者(对照组)骨髓标本中DKK-3和WIF-1启动子甲基化状态;用实时定量PCR检测上述标本中β-catenin、DKK-3和WIF-1mRNA表达情况,并分析其与临床资料及生存时间的关系。结果:AML组中DKK-3和WIF-1启动子甲基化率明显高于对照组(χ2=15.330,P<0.001;χ2=17.371,P<0.001),且与性别、年龄、临床分型无相关性。DKK-3和WIF-1 mRNA相对表达量在AML患者中依次为0.840±0.320和0.792±0.313,明显低于对照组的1.134±0.392和1.047±0.334(t=3.415,P=0.000;t=3.070,P=0.003)。AML患者骨髓标本β-catenin的mRNA相对表达量为0.756±0.304,高于对照组骨髓标本表达量0.342±0.105(t=5.943,P=0.001),且AML骨髓标本中DKK-3和WIF-1 mRNA相对表达量和β-catenin相对表达量呈均呈负相关性(r=-0.543;r=-0.562)。KaplanMeier生存曲线分析显示,DKK-3甲基化阳性组AML患者总体生存时间短于阴性组患者(χ2=3.957,P=0.042),而WIF-1甲基化阳性组AML患者总体生存时间亦短于阴性组患者(χ~2=4.520,P=0.029)。结论:AML患者中Wnt/β-catenin信号通路存在有异常激活,DKK-3和WIF-1启动子甲基化可能参与了Wnt通路激活及AML的发病过程并影响其总体预后。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 DKK-3 WIF-1 基因甲基化
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VEGF在多发性骨髓瘤患者中的表达及其与浆膜腔积液的关系 被引量:4
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作者 张平平 张凤 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1134-1138,共5页
目的:探讨多发性骨髓瘤患者血清中血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平及其可能的临床意义。方法:收集2019年7月至2020年6月蚌埠医学院第一附属医院收治的68例多发性骨髓瘤患者,使用VEGF酶联免疫吸附试剂测定VEGF的表达水平,探讨其表达水... 目的:探讨多发性骨髓瘤患者血清中血管内皮生长因子(VEGF)的表达水平及其可能的临床意义。方法:收集2019年7月至2020年6月蚌埠医学院第一附属医院收治的68例多发性骨髓瘤患者,使用VEGF酶联免疫吸附试剂测定VEGF的表达水平,探讨其表达水平与浆膜腔积液的关系,并分析VEGF表达水平与多发性骨髓瘤患者临床特征及预后的关系。结果:68例多发性骨髓瘤患者中VEGF阳性率为36.76%(25/68);17例浆膜腔积液阳性患者中有10例(58.82%,10/17)患者VEGF阳性。浆膜腔积液阳性患者VEGF表达水平显著高于浆膜腔积液阴性患者(P<0.05);VEGF在多发性骨髓瘤患者初诊未治组表达水平明显高于治疗后缓解组(P<0.05),而与难治/复发多发性骨髓瘤患者VEGF表达水平之间差异无统计学意义(P>0.05)。68例多发性骨髓瘤患者中有48例进行了FISH检查,28例核型正常(58.33%),20例出现异常核型(41.67%),异常核型以IgH重排为主,共10例(20.83%),其他1q21+、del(13q14)、del(17p13)分别为3例(6.25%)、2例(4.17%)、7例(14.58%)。与VEGF-组比较,VEGF+组IgH重排及del(17p13)发生率较高[IgH重排:35%vs 10.71%,P=0.043;del(17p13):30%vs 3.57%,P=0.011]。与浆膜腔积液阴性组比较,浆膜腔积液阳性组del(17p13)发生率较高(31.25%vs 6.25%,P=0.021)。VEGF与浆膜腔积液均阳性者占比为14.71%(10/68),均阴性者占比为52.94%(36/68),浆膜腔积液与VEGF表达有相关性(r=0.264,P=0.029)。结论:合并浆膜腔积液的多发性骨髓瘤患者预后不良,这部分患者血清中VEGF显著高表达,升高的VEGF可能参与浆膜腔积液的发生和发展。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 血管内皮生长因子 浆膜腔积液 核型
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