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靶向人c-Met蛋白单链抗体的制备及其对肺腺癌A549细胞的杀伤作用
被引量：
3
1
作者
刘传苗
刘明珠
+3 位作者
黄艳平
储菲
李永海
李正红
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期401-407,共7页
目的制备并纯化出靶向细胞间质上皮转化因子(c-Met)蛋白的人源单链抗体(scFv),鉴定其靶向c-Met蛋白的特性及其对肺腺癌细胞的作用。方法将scFv基因插入至p Fuse载体构建真核表达载体,表达融合鼠源Fc段的融合蛋白Met-scFv,经AKTA蛋白纯...
目的制备并纯化出靶向细胞间质上皮转化因子(c-Met)蛋白的人源单链抗体(scFv),鉴定其靶向c-Met蛋白的特性及其对肺腺癌细胞的作用。方法将scFv基因插入至p Fuse载体构建真核表达载体,表达融合鼠源Fc段的融合蛋白Met-scFv,经AKTA蛋白纯化系统纯化;将纯化的Met-scFv进行功能性检测:ELISA检测Met-scFv亲和力;流式细胞术和免疫荧光细胞化学染色检测Met-scFv识别并结合肺腺癌细胞的特性;CCK-8法检测Met-scFv对细胞增殖的影响;通过补体依赖的细胞毒性(CDC)、抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC),用乳酸脱氢酶(LDH)释放试剂盒检测Met-scFv对靶细胞A549细胞的毒性影响。结果 ELISA结果提示,Met-scFv与c-Met呈量效关系;流式细胞术和免疫荧光细胞化学染色实验结果提示,与对照组相比,Met-scFv组信号呈阳性,提示Met-scFv与A549细胞特异性结合;Met-scFv抑制A549细胞增殖并产生细胞毒性,且毒性大小与Met-scFv剂量呈正相关。结论制备出靶向c-Met蛋白的Met-scFv,并可在体外识别并介导杀伤A549细胞。
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关键词
c-Met
单链抗体(scFv)
A549细胞
靶向性
补体依赖的细胞毒性(CDC)
抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)
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职称材料
题名
靶向人c-Met蛋白单链抗体的制备及其对肺腺癌A549细胞的杀伤作用
被引量：
3
1
作者
刘传苗
刘明珠
黄艳平
储菲
李永海
李正红
机构
蚌埠医学院
第一附属医院感染科
蚌埠医学院科研中心生理学实验室
蚌埠医学院
第一附属医院药剂科
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期401-407,共7页
基金
国家自然科学基金(81472656)
安徽省教育厅自然科学基金重点项目(KJ2017A247)
蚌埠医学院研究生科研创新项目(Byycx1634)
文摘
目的制备并纯化出靶向细胞间质上皮转化因子(c-Met)蛋白的人源单链抗体(scFv),鉴定其靶向c-Met蛋白的特性及其对肺腺癌细胞的作用。方法将scFv基因插入至p Fuse载体构建真核表达载体,表达融合鼠源Fc段的融合蛋白Met-scFv,经AKTA蛋白纯化系统纯化;将纯化的Met-scFv进行功能性检测:ELISA检测Met-scFv亲和力;流式细胞术和免疫荧光细胞化学染色检测Met-scFv识别并结合肺腺癌细胞的特性;CCK-8法检测Met-scFv对细胞增殖的影响;通过补体依赖的细胞毒性(CDC)、抗体依赖细胞介导的细胞毒作用(ADCC),用乳酸脱氢酶(LDH)释放试剂盒检测Met-scFv对靶细胞A549细胞的毒性影响。结果 ELISA结果提示,Met-scFv与c-Met呈量效关系;流式细胞术和免疫荧光细胞化学染色实验结果提示,与对照组相比,Met-scFv组信号呈阳性,提示Met-scFv与A549细胞特异性结合;Met-scFv抑制A549细胞增殖并产生细胞毒性,且毒性大小与Met-scFv剂量呈正相关。结论制备出靶向c-Met蛋白的Met-scFv,并可在体外识别并介导杀伤A549细胞。
关键词
c-Met
单链抗体(scFv)
A549细胞
靶向性
补体依赖的细胞毒性(CDC)
抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(ADCC)
Keywords
c-Met
scFv
A549 cells
targeting
complement-dependent cytotoxicity（CDC）
antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity（ADCC）
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
靶向人c-Met蛋白单链抗体的制备及其对肺腺癌A549细胞的杀伤作用
刘传苗
刘明珠
黄艳平
储菲
李永海
李正红
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2018
3
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