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胃癌中EXD3基因的表达及功能的生物信息学分析 被引量:3
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作者 孙灯众 刘牧林 +1 位作者 吴华彰 黄福新 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期215-221,共7页
目的通过生物信息学分析研究胃癌与正常胃粘膜间具有差异性表达的基因,找出参与胃癌发生发展及预后的关键基因,并对其所涉及的功能进行分析预测。方法从GEO表达谱数据库中下载表达谱基因芯片数据GSE100935(包括18例胃癌样本及正常胃粘... 目的通过生物信息学分析研究胃癌与正常胃粘膜间具有差异性表达的基因,找出参与胃癌发生发展及预后的关键基因,并对其所涉及的功能进行分析预测。方法从GEO表达谱数据库中下载表达谱基因芯片数据GSE100935(包括18例胃癌样本及正常胃粘膜组织),利用Morpheus在线软件分析基因芯片GSE100935的数据,获得在胃癌与正常胃粘膜组织中存在差异表达的基因,并构建聚类分析热图;利用软件UALCAN在线分析差异表达基因在胃癌与正常胃粘膜组织中表达水平;利用Kaplan-Meier绘图软件对差异表达基因在胃癌患者中的表达高低进行生存分析;最后采用Fun Rich软件进行GO功能富集分析,网站STRING构建目的基因蛋白互作网络。结果通过分析基因芯片GSE100935获得45119个差异表达的基因;在线分析软件UALCAN显示EXD3基因在胃癌组织中高表达;同时生存分析提示当EXD3基因高表达时,胃癌患者的预后相对较差;GO功能富集分析发现,差异表达基因主要与胃癌细胞核苷酸的新陈代谢调节以及转录因子的活动有关。结论 EXD3可能是胃癌中潜在的癌基因,可能与DNA损伤修复有关,其表达上调在胃癌的发生发展及预后过程发挥重要作用,并有望成为判断胃癌患者预后的重要的生物学指标。 展开更多
关键词 EXD3 胃癌 生物信息学分析 预后
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胃癌中IBSP基因表达及预后的生物信息学分析
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作者 孙灯众 史维俊 +2 位作者 于子嫣 吴华彰 刘牧林 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1262-1268,共7页
目的:通过生物信息学分析筛选出胃癌和正常胃黏膜间差异表达基因,分析并预测其在胃癌发生发展及预后中的价值。方法:从癌症基因组图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库下载胃癌患者RNA-seq数据,使用软件R-Studio筛选差异表达基因,... 目的:通过生物信息学分析筛选出胃癌和正常胃黏膜间差异表达基因,分析并预测其在胃癌发生发展及预后中的价值。方法:从癌症基因组图谱(the Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库下载胃癌患者RNA-seq数据,使用软件R-Studio筛选差异表达基因,运用DAVID进行基因本体(gene ontology,GO)富集分析和京都基因与基因百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路分析,研究PI3K-Akt通路中表达差异最明显的基因,通过网站UALCAN对其进行表达量及临床病理特征分析,利用在线网站STRING构建蛋白互作网络,同时利用Kaplan-Meier Plotter在线分析其与胃癌患者预后的相关性。结果:共获得5 704个差异表达基因,包括1 225个上调和1 479个下调的蛋白编码基因;KEGG通路分析确定骨涎蛋白(integrin binding sialoprotein,IBSP)为目的基因;IBSP基因在胃癌组织中明显高表达(P<0.001);且与胃癌患者的临床病理特征及不良预后明显相关(P<0.05)。结论:IBSP基因作为胃癌中潜在的癌基因,可能通过PI3K-Akt信号通路调控胃癌的早期进展,进而导致胃癌患者预后不良,有望成为胃癌新的临床诊断和预后标志物。 展开更多
关键词 胃癌 IBSP基因 差异表达基因 预后 生物信息学分析
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平衡复杂染色体重排携带者的遗传与生育情况分析 被引量:25
3
作者 廖亚平 王春景 +2 位作者 梁猛 胡小梅 吴琦 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期396-412,共17页
为探讨中国人群平衡复杂染色体重排(complex chromosome rearrangements,CCRs)的类型、特征和减数分裂行为及其与生殖异常的关系,采用常规G显带技术对因生育问题就诊的1063对夫妇进行核型分析,并检索中国人群平衡CCR携带者的核型及临床... 为探讨中国人群平衡复杂染色体重排(complex chromosome rearrangements,CCRs)的类型、特征和减数分裂行为及其与生殖异常的关系,采用常规G显带技术对因生育问题就诊的1063对夫妇进行核型分析,并检索中国人群平衡CCR携带者的核型及临床资料进行统计分析。在受检者中检出2例平衡CCR携带者,并从国内外数据库中检索发现的平衡CCR携带者总共124例,3方和4方重排为主要类型,占51.6%,双重相互易位占26.6%,特殊CCR占21.8%。平衡CCR携带者或其配偶自然流产和胚胎停止发育(胎停育)发生率为77.6%,多发性先天畸形(multiple congenital abnormalities,MCA)等不良妊娠发生率为9.7%。三种类型平衡CCR携带者各种妊娠结局发生率的差异具有统计学意义(P<0.05)。对男性CCRs累及的染色体分析发现,累及1号染色体的CCRs多表现为生精障碍,累及8号染色体的CCRs多发生不良妊娠(P≤0.05)。分析CCRs减数分裂染色体分离模式发现,后代的异常核型多来自于邻近-1分离方式(8/12)。发生不对称分离(3:2、4:2和5:3分离)的CCRs中D-G组染色体累及频率相对高(46.2%)。结果表明,平衡CCR携带者不良妊娠风险高,即使正常妊娠也应进行产前诊断。男性平衡CCR携带者生精障碍发生机率高,CCRs累及的染色体对男性携带者生育能力有影响。另外,CCRs携带者减数分裂染色体分离模式也与累及的染色体有关。分析CCRs的类型、累及的染色体和易位片段的大小等因素可针对特定CCR做出更准确的遗传和生育指导。 展开更多
关键词 平衡复杂染色体重排 减数分裂 生育 遗传咨询
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Rho激酶和自噬在法舒地尔抗心肌缺血/再灌注损伤中的作用 被引量:16
4
作者 叶红伟 方婷婷 +4 位作者 谷小雨 王娅 朱广宇 于影 高琴 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1706-1711,共6页
目的探讨自噬在法舒地尔(Fasudil)抑制Rho激酶心肌保护中的变化,并分析其作用及可能机制。方法离体大鼠心脏Langendorff装置灌流,结扎冠状动脉左前降支30 min模拟局部心肌缺血,松开结扎线恢复灌流120 min复制心肌缺血/再灌注(ischemia/r... 目的探讨自噬在法舒地尔(Fasudil)抑制Rho激酶心肌保护中的变化,并分析其作用及可能机制。方法离体大鼠心脏Langendorff装置灌流,结扎冠状动脉左前降支30 min模拟局部心肌缺血,松开结扎线恢复灌流120 min复制心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)模型。实验分3组:I/R组、法舒地尔(Fasudil)组、和Fasudil+自噬抑制剂渥曼青霉素(Wort)组。连续记录左心室动力学变化,收集再灌注5、10 min冠脉流出液测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量;RT-PCR检测自噬相关基因Atg5、Beclin1和凋亡相关基因Bax、Bcl-2 mRNA表达的变化,Western blotting检测caspase 3的表达变化。结果与I/R组比,Fasudil使左心室发展压、左心室内压最大上升及下降速率、左心室做功明显得到改善,降低复灌期冠脉流出液中LDH的释放,Atg5、Beclin1 mRNA表达增加,Bcl-2/Bax mRNA升高,caspase 3蛋白表达降低。自噬抑制剂Wort减弱了法舒地尔的保护作用,抑制了心室动力学指标的恢复,LDH释放增多,Atg5和Beclin1 mRNA表达降低,Bcl-2/Bax降低,caspase 3蛋白表达升高。结论抑制Rho激酶心肌保护作用中诱导了自噬的发生,且自噬起到保护心肌的作用,可能与减少细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 心脏 缺血/再灌注损伤 自噬 法舒地尔 渥曼青霉素
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SRB法和MTT法抗肿瘤药物筛选结果相关性研究 被引量:27
5
作者 黄银久 宋宝安 +4 位作者 金林红 胡德禹 杨松 李宁 吴守伟 《生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期13-16,共4页
为了探索抗肿瘤药物体外筛选中磺酰罗丹明B(SRB)法和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法实验结果的相互验证作用,作者以PC-3、BGC-823、Bcap-37细胞系为研究对象,利用SRB法和MTT比色法对供试化合物行体外抑制活性考察,并用SPSS12.0对两种筛选方... 为了探索抗肿瘤药物体外筛选中磺酰罗丹明B(SRB)法和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法实验结果的相互验证作用,作者以PC-3、BGC-823、Bcap-37细胞系为研究对象,利用SRB法和MTT比色法对供试化合物行体外抑制活性考察,并用SPSS12.0对两种筛选方法得到的实验结果进行差异性分析。结果表明,SRB法和MTT比色法实验结果相关性好,可以相互验证实验结果的准确性和可靠性。 展开更多
关键词 MTT比色法 SRB法 相关性
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直链烷基苯磺酸钠对黑腹果蝇生殖能力及寿命的影响 被引量:9
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作者 赵文红 张鼎 +1 位作者 周纯先 江城梅 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期154-158,共5页
目的:探讨直链烷基苯磺酸钠(linear alkylbenzenesulfonate,LAS)对果蝇生殖能力及寿命的影响。方法:采用乙醚麻醉的方法,收集8 h内羽化而未交配的野生型黑腹果蝇,选择个体大小相近及外观行为正常的果蝇进入实验,雌雄各半。在培养基中加... 目的:探讨直链烷基苯磺酸钠(linear alkylbenzenesulfonate,LAS)对果蝇生殖能力及寿命的影响。方法:采用乙醚麻醉的方法,收集8 h内羽化而未交配的野生型黑腹果蝇,选择个体大小相近及外观行为正常的果蝇进入实验,雌雄各半。在培养基中加入LAS并按不同浓度分组(低剂量组:150 mg/kg,中剂量组:300 mg/kg,高剂量组:600 mg/kg,对照组:不添加LAS)。测定培养基中含有不同浓度LAS时果蝇繁殖能力及半数死亡天数、平均寿命及平均最高寿命,并与对照组进行比较。结果:低剂量组、中剂量组、高剂量组果蝇的子代数量分别为对照组的85.07%,84.59%和71.88%,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01);各剂量组雌、雄果蝇的半数死亡天数、平均寿命及平均最高寿命与对照组相比均有不同程度缩短,高剂量组所受影响最为显著,雌、雄性果蝇的半数死亡时间分别缩短13与15 d,平均寿命分别缩短18和14 d,平均最高寿命分别缩短14和12 d。结论:LAS对果蝇有一定毒性,可引起果蝇生殖能力降低及寿命缩短。 展开更多
关键词 直链烷基苯磺酸钠 黑腹果蝇 生殖能力 寿命
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氯化镧对雄性小鼠精子质量及睾丸酶活力的影响 被引量:12
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作者 刘高峰 胡小梅 +1 位作者 王春景 唐宝定 《四川动物》 CSCD 北大核心 2012年第3期471-473,共3页
探讨氯化镧对小鼠精子质量及睾丸细胞酶的影响。40只成年昆明种雄性小鼠随机分成对照组、低(25mg·kg-1)、中(50mg·kg-1)、高(100mg·kg-1)剂量组,腹腔注射1次/4d,饲养35d。测定睾丸和附睾脏器指数,检测并计算精子数量、... 探讨氯化镧对小鼠精子质量及睾丸细胞酶的影响。40只成年昆明种雄性小鼠随机分成对照组、低(25mg·kg-1)、中(50mg·kg-1)、高(100mg·kg-1)剂量组,腹腔注射1次/4d,饲养35d。测定睾丸和附睾脏器指数,检测并计算精子数量、活精率、活动率和畸形率以及睾丸碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮合酶(NOS)活力。结果显示,高剂量氯化镧降低了小鼠睾丸AKP活力,抑制了精子数量和质量;中剂量氯化镧能促进NOS活力,使精子数量减少,对精子质量造成损伤。 展开更多
关键词 氯化镧 精子质量 睾丸酶
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性反转综合征的SRY基因分析 被引量:8
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作者 鲍明升 吴孝兵 +3 位作者 程双怀 梁玉华 吴守伟 张鼎 《实用医学杂志》 CAS 2007年第3期348-350,共3页
目的:探讨性反转综合征(sex reversal syndrome,SRS)的发病原因。方法:应用聚合酶链式反应(PCR)及PCR产物直接测序方法对22例性发育异常患者的人类性别决定区域(sex-determining region of Y chromosome,SRY)基因进行特异性扩增和序列... 目的:探讨性反转综合征(sex reversal syndrome,SRS)的发病原因。方法:应用聚合酶链式反应(PCR)及PCR产物直接测序方法对22例性发育异常患者的人类性别决定区域(sex-determining region of Y chromosome,SRY)基因进行特异性扩增和序列检测分析。结果:在22例患者中有7例患者SRY基因检测结果与染色体性别不一致,其中3例为46,XX女性性反转患者的SRY基因为阳性(其中1例46,XX,Gp+),3例为46,XY男性性反转患者的SRY缺失,1例为45,X女性患者的SRY基因阳性;其他15例患者SRY基因与染色体性别一致,但都伴有不同程度的性发育异常,即存在Y染色体患者,SRY为阳性;无Y染色体的患者,SRY为阴性。通过对12例SRY阳性患者进行测序分析,均未发现碱基突变。结论:SRY基因的缺失或易位是导致SRS的最主要原因,同时也表明人类的性别决定和分化还有其他相关基因参与。 展开更多
关键词 性腺发育不全 性逆转 性腺 基因 SRY 核型分析
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基于GMPGIS银杏全球生态适宜产区分析 被引量:8
9
作者 徐江 沈亮 +4 位作者 汪耀 相婷 孟祥霄 汤欢 李西文 《世界中医药》 CAS 2017年第5期969-973,共5页
目的:通过对银杏全球产区生态适宜性分析,为其合理生产布局提供科学依据。方法:采用《药用植物全球产地生态适宜性区划信息系统》(Geographic Information System for Global Medicinal Plants,GMPGIS),以612个银杏采样点气候因子值和... 目的:通过对银杏全球产区生态适宜性分析,为其合理生产布局提供科学依据。方法:采用《药用植物全球产地生态适宜性区划信息系统》(Geographic Information System for Global Medicinal Plants,GMPGIS),以612个银杏采样点气候因子值和土壤类型为依据,预测银杏全球最大生态相似度区域。结果:银杏适宜生长的地区包括亚洲东部、欧洲大部分地区、北美洲中部及南部、南美洲南部、非洲南部以及澳洲南部地区。世界范围内适宜银杏生长的面积约为41 215.44×10~3km^2,占地球总面积的30.62%。适宜银杏生长的国家主要包括美国、中国、俄罗斯、阿根廷、加拿大、澳大利亚、哈萨克斯坦、墨西哥、日本等;其中中国适宜银杏生长的省区包括内蒙古、云南、四川、广西、浙江、湖北、河南、安徽等。研究结果基本包括了银杏现有产区及文献记载道地产地,并预测新的生态适宜种植地区。结论:本研究结果可为银杏全球范围内引种栽培提供科学依据,对高品质银杏药材生产提供参考。 展开更多
关键词 银杏 GMPGIS 生态适宜性 品质生态
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北京油鸡cDNA文库的构建及purH基因的表达 被引量:5
10
作者 郭俣 刘长青 +4 位作者 陆涛峰 佟春玲 修晓娜 关伟军 马月辉 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期93-99,共7页
利用SMART技术构建了北京油鸡肝脏全长cDNA文库,构建的未扩增文库滴度为1.96×106pfu·mL-1,文库重组率为92.8%,插入片段长度为1.23kb,扩增文库滴度为1.64×1010pfu·mL-1。设计purH基因保守引物对该文库进行筛选,克隆... 利用SMART技术构建了北京油鸡肝脏全长cDNA文库,构建的未扩增文库滴度为1.96×106pfu·mL-1,文库重组率为92.8%,插入片段长度为1.23kb,扩增文库滴度为1.64×1010pfu·mL-1。设计purH基因保守引物对该文库进行筛选,克隆了北京油鸡purH基因(GenBank登录号:EU334506),将purH基因完整开放阅读框定向插入pEGFP-N3,构建带有GFP报告基因重组表达载体pEGFP-N3-purH,将其导入北京油鸡体外培养细胞中。转染后24、48和72h,pEGFP-N3-purH转染率为10.3%~53.2%,绿色荧光均匀分布于细胞质与细胞核中。随表达量的增加,绿色荧光在细胞核中聚集成团块状或颗粒状。结果表明,构建的北京油鸡肝脏组织cDNA文库符合建库要求。 展开更多
关键词 北京油鸡 SMARTcDNA文库 purH基因
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寿光鸡腺苷酸琥珀酸裂解酶ADSL基因的表达与克隆化细胞株的筛选 被引量:3
11
作者 刘长青 张洪海 +3 位作者 文杰 马月辉 关伟军 唐学玺 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期982-991,共10页
利用RT-PCR与RACE方法检测寿光鸡心、肝、脾、肺、肾、脑、腿肌与胸肌8种组织腺苷酸琥珀酸裂解酶(ADSL)基因mRNA的差异表达水平,构建ADSL基因融合表达载体pGEX-ADSL,转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性克隆,IPTG诱导表达,通过构... 利用RT-PCR与RACE方法检测寿光鸡心、肝、脾、肺、肾、脑、腿肌与胸肌8种组织腺苷酸琥珀酸裂解酶(ADSL)基因mRNA的差异表达水平,构建ADSL基因融合表达载体pGEX-ADSL,转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性克隆,IPTG诱导表达,通过构建真核表达载体pEGFP-ADSL,利用脂质体介导法转染寿光鸡成纤维细胞,并进行阳性细胞的克隆化筛选与检测。结果表明:ADSL基因开放阅读框序列长为1455 bp,编码485个氨基酸;5′端非转录调控区具有典型管家基因的特征,在邻近起始密码子-28 bp处发生C→T突变,该突变使该位点变为核呼吸因子2(NRF-2)结合位点;经SDS-PAGE电泳显示,pGEX-ADSL重组融合蛋白在分子量约为80.5 ku处有特异的蛋白条带出现,与预期分子量大小一致,等电点为6.79,纯化后用Western-blot检测为寿光鸡ADSL蛋白。pEGFP-ADSL转染寿光鸡成纤维靶细胞后24、48和72 h,转染率在26.4%~41.2%之间,绿色荧光均匀分布于细胞质与细胞核中,随表达量的增加,绿色荧光在细胞核中聚集成团块状或颗粒状,经药物筛选和克隆化培养,获得表达pEGFP-ADSL融合蛋白的阳性克隆细胞株,经RT-PCR扩增与Western-blot检测确认ADSL融合蛋白基因已经整合到寿光鸡成纤维细胞的基因组中,获得正常表达。研究结果为揭示我国优良地方鸡种的风味基因结构,研究其生物学功能奠定基础。 展开更多
关键词 寿光鸡 腺苷酸琥珀酸裂解酶 基因结构 基因表达 基因定位
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MicroRNA-31在肝癌中的表达和作用 被引量:4
12
作者 李中文 吴涛 +1 位作者 付应霄 吴守伟 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2015年第10期1098-1101,共4页
目的:探讨MicroRNA-31在肝癌中的作用功能。方法:利用realtime PCR检测不同来源的肝细胞和临床来源肝组织样本中MicroRNA-31表达,MTT检测MicroRNA-31对肝癌细胞生长活性的影响。结果:发现MicroRNA-31在肝癌细胞显著低于正常来源的肝细胞... 目的:探讨MicroRNA-31在肝癌中的作用功能。方法:利用realtime PCR检测不同来源的肝细胞和临床来源肝组织样本中MicroRNA-31表达,MTT检测MicroRNA-31对肝癌细胞生长活性的影响。结果:发现MicroRNA-31在肝癌细胞显著低于正常来源的肝细胞,对不同的临床来源肝组织样本检测发现在肝癌组织的MicroRNA-31表达量显著低于正常对照和癌旁组织,MTT分析发现MicroRNA-31可抑制肝癌细胞的生长。结论:本研究提示MicroRNA-31在肝癌中具有肿瘤抑制作用,在临床进展中可能扮演着重要的作用。 展开更多
关键词 MicroRNA-31 肝癌 表达 生长
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硫化氢对1型糖尿病大鼠肾诱导型一氧化氮合酶的影响 被引量:2
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作者 杨锐 贾强 +4 位作者 马善峰 崔淑俊 刘小粉 王元元 高琴 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期389-394,共6页
目的:观察硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)对1型糖尿病大鼠肾诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的影响。方法:将32只雄性SD大鼠随机分为4组(n=8):正常对照(NC)组、糖尿病(DM)组、糖尿病治疗(NaHS+DM)组和NaHS对... 目的:观察硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)对1型糖尿病大鼠肾诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的影响。方法:将32只雄性SD大鼠随机分为4组(n=8):正常对照(NC)组、糖尿病(DM)组、糖尿病治疗(NaHS+DM)组和NaHS对照(NaHS)组。采用腹腔注射55 mg/kg链脲佐菌素复制1型糖尿病大鼠模型。造模成功后,NaHS+DM组和NaHS组大鼠腹腔注射56μmol/kg NaHS溶液进行干预治疗。8周后,分别测定各组大鼠血清和肾组织中总一氧化氮合酶(total nitric oxide synthase,T-NOS)、iNOS活性和一氧化氮(NO)水平;测定肾组织中谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性;采用透射电镜观察肾皮质超微结构变化;Western印迹检测肾组织iNOS蛋白表达。结果:与NC组相比,NaHS组各项指标间差异均无统计学意义(P>0.05),而DM组大鼠血清和肾组织中T-NOS,iNOS活性和NO水平均显著增高(P<0.01);肾组织GSH-Px活性明显下降(P<0.01)。电镜观察显示DM组大鼠肾小球基底膜增厚、系膜基质增多,足突融合;iNOS蛋白表达明显升高。与DM组相比,NaHS+DM组血清和肾T-NOS,iNOS活性和NO水平明显下降(P<0.01),GSH-Px活性明显升高(P<0.01),肾超微结构损伤明显减轻,iNOS蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:H2S对1型糖尿病大鼠肾损伤具有保护作用,其机制可能与下调iNOS活性和蛋白表达,降低肾NO生成相关。 展开更多
关键词 硫化氢 糖尿病 诱导型一氧化氮合酶 一氧化氮 大鼠
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北京油鸡α1-AGP基因结构与表达特征研究 被引量:2
14
作者 刘长青 郭俣 +5 位作者 刘帅 包阿东 陆涛峰 刘洪坤 关伟军 马月辉 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期620-628,共9页
提取北京油鸡心、肝、脾、肺、肾、脑、腿肌与胸肌等不同组织的总RNA,利用RT-PCR方法检测α1-酸性糖蛋白基因(α1-AGP)mRNA的差异表达。将α1-AGP基因完整开放阅读框定向插入pEGFP-C1,构建带有GFP报告基因的重组表达载体pEGFP-α1-AGP,... 提取北京油鸡心、肝、脾、肺、肾、脑、腿肌与胸肌等不同组织的总RNA,利用RT-PCR方法检测α1-酸性糖蛋白基因(α1-AGP)mRNA的差异表达。将α1-AGP基因完整开放阅读框定向插入pEGFP-C1,构建带有GFP报告基因的重组表达载体pEGFP-α1-AGP,将其导入北京油鸡体外培养细胞中,并进行G418药物筛选和克隆化培养。结果表明:α1-AGP基因开放阅读框长度为612bp,编码203个氨基酸,在北京油鸡肝、肺、腿肌和胸肌中有表达;转染后24、48和72h,pEGFP-α1-AGP转染率在31.3%~47.6%之间,绿色荧光主要集中在细胞核中,随着表达量的增加,绿色荧光在细胞核中聚集成团块状或颗粒状,经药物筛选和克隆化培养,获得表达pEGFP-α1-AGP融合蛋白的阳性克隆细胞株,利用RT-PCR与Westernblotting检测确认pEGFP-α1-AGP已整合到北京油鸡成纤维细胞的基因组中,在优化的条件下,阳性细胞凋亡率、形态、生长与增殖状况与对照组比较差异不显著(P>0.05)。 展开更多
关键词 北京油鸡 α1-酸性糖蛋白基因 荧光蛋白 成纤维细胞 亚细胞定位
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全血培养胞质分裂阻断微核(CBMN)实验方法的改进 被引量:3
15
作者 廖亚平 张鼎 +2 位作者 孙梓桉 孟芳梅 梁玉华 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期395-399,共5页
目的改良全血培养胞质分裂阻断微核(cytokinesis-block micronucleus,CBMN)实验制片法及探讨细胞松弛素B(cytochalasin B,cyt-B)的最佳浓度。方法依据常规微核试验制片法,在低渗液的温度、固定液比例和操作手法等方面改进实验方法;设置... 目的改良全血培养胞质分裂阻断微核(cytokinesis-block micronucleus,CBMN)实验制片法及探讨细胞松弛素B(cytochalasin B,cyt-B)的最佳浓度。方法依据常规微核试验制片法,在低渗液的温度、固定液比例和操作手法等方面改进实验方法;设置不同浓度cyt-B组(4、5、6、7μg/mL),常规外周血淋巴培养至44 h加入cyt-B,继续培养至68 h或72 h,收获细胞。按人类微核计划(HUMN Project)中的识别标准识别双核、多核细胞和微核(micronuclei,MN),确定cyt-B最适浓度,并分析cyt—B对自发微核率的影响。结果改良法所获的双核淋巴细胞的胞膜完整,边界清晰,微核易于辨认。培养72 h后,cyt-B浓度≥5"g/mL时,双核细胞比例较4μg/mL组显著增加(P=0.001);cyt-B浓度≥6μg/mL时,三核以上细胞比例显著增加(P=0.01)。培养68 h后,cyt-B浓度为6μg/mL时,双核细胞比例较高(58.4%)。各浓度组淋巴细胞自发微核率的差异无统计学意义(P=0.32)。结论改良法选用cyt—B浓度为5μg/mL、培养72 h或cyt-B浓度为6μg/mL、培养68 h时收获的细胞,可获得大量双核细胞,且胞膜完整,染色清晰;cyt-B对淋巴细胞自发微核率无显著影响。 展开更多
关键词 胞质分裂阻断微核(CBMN)法 细胞松弛素(cyt-B) 全血培养法 微核(MN)
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梵净山土壤甲螨群落结构与多样性调查 被引量:13
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作者 刘高峰 杨茂发 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第1期142-144,197,共4页
在梵净山自然保护区不同坡向、不同海拔设置了5个样地,于不同季节对其土壤甲螨群落状况进行调查,共记录到土壤甲螨45科81属;并对不同样地中甲螨群落结构和多样性进行分析。调查结果表明,Oppiella、Xylobates、Suctobelbella是该保护区... 在梵净山自然保护区不同坡向、不同海拔设置了5个样地,于不同季节对其土壤甲螨群落状况进行调查,共记录到土壤甲螨45科81属;并对不同样地中甲螨群落结构和多样性进行分析。调查结果表明,Oppiella、Xylobates、Suctobelbella是该保护区优势类群,而Suctobelbella是梵净山自然保护区比较独特的优势类群。各样地土壤甲螨群落多样性依次为:东坡海拔750m样地(A)>西坡海拔1500m样地(D)>东坡海拔1500m样地(B)>西坡海拔750m样地(C)>金顶海拔2200m样地(E)。E样地海拔最高,Malaconothrus在该样地数量剧增;样地C受人为干扰影响较大,Masthermannia数量明显增多;样地D个体数量为5个样地中最多。A、D样地甲螨群落相似性指数最高,为0.8361;C、E样地甲螨群落最不相似,相似性指数为0.6136。低等甲螨类群丰富,所占比例较高。另外,人为干扰对土壤甲螨的群落结构和多样性影响较大。 展开更多
关键词 甲螨 群落结构 多样性 梵净山
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IL-1β促进星形胶质细胞增殖并下调Kir4.1的表达 被引量:2
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作者 孙美群 汪洪涛 +6 位作者 齐琦 严海芹 邹维艳 董兴武 王自海 王靖豪 王效静 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期446-449,454,共5页
目的探讨白细胞介素1β(IL-1β)对星形胶质细胞增殖及其内向整流性钾离子通道4.1(Kir4.1)表达的影响。方法体外培养新生SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞;用IL-1β或者和白细胞介素1受体拮抗剂(IL-1Ra)处理培养的星形胶质细胞,流式细胞术检测... 目的探讨白细胞介素1β(IL-1β)对星形胶质细胞增殖及其内向整流性钾离子通道4.1(Kir4.1)表达的影响。方法体外培养新生SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞;用IL-1β或者和白细胞介素1受体拮抗剂(IL-1Ra)处理培养的星形胶质细胞,流式细胞术检测IL-1β对星形胶质细胞细胞周期的影响;荧光定量PCR检测IL-1β对星形胶质细胞Kir4.1 mRNA表达的影响;Western blot法检测IL-1β对星形胶质细胞Kir4.1蛋白表达的影响。结果 IL-1β可以以剂量和时间依赖的方式促进星形胶质细胞的增殖。用10 ng/m L的IL-1β处理星形胶质细胞24 h后,Kir4.1 mRNA和蛋白的表达均下降,IL-1Ra可以有效对抗由IL-1β引起的Kir4.1 mRNA和蛋白的表达下降;Kir4.1 mRNA和蛋白的表达下调也能因IL-1β的去除而部分被恢复。结论 IL-1β可以促进星形胶质细胞的增殖,IL-1β是影响星形胶质细胞Kir4.1表达的关键因素。 展开更多
关键词 白细胞介素1β(IL-1β) 星形胶质细胞 细胞增殖 内向整流性钾离子通道4.1(Kir4.1)
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三羟异黄酮对全氟辛酸暴露的小鼠肝脏抗氧化能力的影响 被引量:2
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作者 王力 刘辉 +2 位作者 张梦媛 吕卉 申玲 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期937-939,944,共4页
将80只SPF级ICR小鼠按单纯随机抽样方法分为正常对照组(等体积生理盐水)、PFOA低剂量组(1 mg·kg-1·d-1)、PFOA中剂量组(5 mg·kg-1·d-1)、PFOA高剂量组(25 mg·kg-1·d-1)、GEN干预对照组(20 mg·kg-1&#... 将80只SPF级ICR小鼠按单纯随机抽样方法分为正常对照组(等体积生理盐水)、PFOA低剂量组(1 mg·kg-1·d-1)、PFOA中剂量组(5 mg·kg-1·d-1)、PFOA高剂量组(25 mg·kg-1·d-1)、GEN干预对照组(20 mg·kg-1·d-1)、GEN干预PFOA低剂量组(GEN:20 mg·kg-1·d-1、PFOA:1 mg·kg-1·d-1)、GEN干预PFOA中剂量组(GEN:20 mg·kg-1·d-1、PFOA:5 mg·kg-1·d-1)、GEN干预PFOA高剂量(GEN:20 mg·kg-1·d-1、PFOA:25 mg·kg-1·d-1)组,每组10只,采用灌胃方法,通过计算肝脏比体重系数,检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及一氧化氮(NO)指标的水平,探讨了三羟异黄酮(GEN)对不同剂量的全氟辛酸(PFOA)致小鼠肝脏氧化损伤的保护作用。结果表明:PFOA导致肝脏肿大,增加了小鼠肝脏系数,并随着剂量增加而加重。高剂量的PFOA能明显增高肝脏组织中MDA及NO含量(P<0.05),低、中、高剂量的PFOA均能提高LDH活性和降低SOD、GSH-Px的活性(P<0.05),而GEN在干预PFOA各剂量组中能显著提高GSH-Px的活性和降低LDH活性(P<0.05),在干预PFOA高剂量组中能提高SOD的活性(P<0.05)。GEN对PFOA致肝脏组织的脂质过氧化损伤有一定的拮抗作用。 展开更多
关键词 全氟辛酸 三羟异黄酮 肝组织 氧化损伤
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南药化橘红全球产地适宜性分析 被引量:4
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作者 许翔翔 刘淼 李西文 《世界中医药》 CAS 2017年第5期992-995,共4页
目的:通过化橘红全球产地适宜性分析,为南药化橘红的合理种植和科学产地规划提供重要依据。方法:以化橘红主产区的95个样点为分析基点,结合气温、相对湿度、日照强度、年降水量、土壤类型等关键生态因子值,采用药用植物全球产地适宜性... 目的:通过化橘红全球产地适宜性分析,为南药化橘红的合理种植和科学产地规划提供重要依据。方法:以化橘红主产区的95个样点为分析基点,结合气温、相对湿度、日照强度、年降水量、土壤类型等关键生态因子值,采用药用植物全球产地适宜性区划信息系统(GMPGIS)对化橘红在全球的生态适宜区域进行分析。结果:化橘红的最大生态相似度区域主要分布于中国、巴西、美国和越南等国家的热带和亚热带区域,总面积约210万km2,其中中国占总面积的60%以上;中国适宜区主要分布于广西、湖南、江西、云南和广东等省。结论:本研究结果为合理规划化橘红种植生产布局,发展引种栽培工作提供了科学参考依据。 展开更多
关键词 GMPGIS 化橘红 产地适宜性 生态因子
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硫化氢对1型糖尿病大鼠膈肌收缩功能的影响 被引量:1
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作者 贾强 马善峰 +4 位作者 刘小粉 李赛 王元元 高琴 杨锐 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期496-501,共6页
目的:观察硫化氢(H_2S)对1型糖尿病大鼠膈肌收缩功能的影响。方法:将32只雄性SD大鼠随机分为正常组(NC组)、糖尿病组(DM组)、NaHS治疗组(DM+NaHS组)和NaHS对照组(NaHS组)。采用腹腔注射链脲佐菌素的方法制备大鼠糖尿病模型,造模成功后,D... 目的:观察硫化氢(H_2S)对1型糖尿病大鼠膈肌收缩功能的影响。方法:将32只雄性SD大鼠随机分为正常组(NC组)、糖尿病组(DM组)、NaHS治疗组(DM+NaHS组)和NaHS对照组(NaHS组)。采用腹腔注射链脲佐菌素的方法制备大鼠糖尿病模型,造模成功后,DM+NaHS组和NaHS组大鼠腹腔注射NaHS溶液28μmol/kg干预治疗。8周后,利用离体灌流大鼠膈肌条的方法,测定单收缩张力(Pt)、最大强直张力(Po)和张力最大上升/下降速率(±dT/dtmax);电镜观察膈肌超微结构变化;计算大鼠膈肌质量/体质量(DW/BW)比值;测定膈肌组织琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)和肌质网钙泵(SERCA)活性;RT-PCR检测膈肌SERCA和受磷蛋白(PLB)mRNA的表达。结果:与NC组比较,NaHS组各项指标均无明显差异(P>0.05);而DM组膈肌Pt,Po和±dT/dtmax明显降低,膈肌超微结构损伤明显,DW/BW明显下降,膈肌组织SDH,LDH,SERCA活性和SERCA mRNA表达明显降低,PLB mRNA表达明显升高(均P<0.05)。与DM组比较,DM+NaHS组膈肌收缩功能和超微结构明显改善,DW/BW增高,膈肌组织SDH,LDH,SERCA活性和SERCA mRNA表达明显升高,PLB mRNA表达明显下降(均P<0.05)。结论:外源性补充H_2S可以增强1型糖尿病大鼠膈肌的收缩能力,其机制可能与调节膈肌生物酶活性及钙调控蛋白的基因表达相关。 展开更多
关键词 糖尿病 硫化氢 膈肌 收缩能力 钙调控蛋白
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