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人脐带间充质干细胞来源外泌体的生物学特性研究
被引量:
15
1
作者
杨向荣
丁娟
+3 位作者
徐正阳
王珏
纪红梅
李玉云
《华中科技大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第2期154-159,共6页
目的探讨正常人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stromal cells,hUC-MSCs)分泌的外泌体(exosomes)的免疫调节功能及对恶性肿瘤细胞体外增殖的影响。方法采用组织贴壁法分离培养hUC-MSCs,收集第3~6代hUC-MSCs上清...
目的探讨正常人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stromal cells,hUC-MSCs)分泌的外泌体(exosomes)的免疫调节功能及对恶性肿瘤细胞体外增殖的影响。方法采用组织贴壁法分离培养hUC-MSCs,收集第3~6代hUC-MSCs上清液,使用超速离心法分离纯化exosomes;通过电子显微镜观察exosomes形态并分析其直径和直径分布范围等特征;采用流式细胞仪检测其表面hUC-MSCs来源的CD44、CD73标志物。将exosomes与正常人外周血单个核细胞共培养,采用MTT检测exosomes对淋巴细胞增殖的影响,ELISA法检测上清液中IL-4和INF-γ的分泌量。选择慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞株,加入exosomes共培养,应用MTT法、PI/AnnexinⅤ双染流式法检测exosomes对癌细胞体外生长增殖、凋亡的影响。结果组织贴壁法成功分离hUC-MSCs,传代后呈长梭状生长。电镜观察分离得到的exosomes为椭圆形膜性小囊泡,经统计得出其直径在6.8~78.1nm之间,且分布比较集中。流式细胞术测得exosomes高表达黏附分子CD44(54.1%)与干细胞标志物CD73(31.5%),MTT和ELISA检测结果表明,不同浓度的exosomes均抑制外周血单个核细胞增殖且抑制细胞因子IL-4和INF-γ的分泌,呈现剂量依赖性。体外实验表明exosomes对K562细胞株具有抑制增殖、促进凋亡的作用。结论 hUC-MSCs来源的exosomes具有免疫调节作用及抑制K562细胞增殖的作用。
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关键词
间充质干细胞
外泌体
免疫调节
增殖
凋亡
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职称材料
题名
人脐带间充质干细胞来源外泌体的生物学特性研究
被引量:
15
1
作者
杨向荣
丁娟
徐正阳
王珏
纪红梅
李玉云
机构
蚌埠医学院
临床
检验
诊断学实验中心
蚌埠医学院
第一附属医院
蚌埠医学院医学检验教研室
出处
《华中科技大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第2期154-159,共6页
基金
蚌埠医学院研究生科研创新计划(No.Byycx1409)
安徽省大学生创业创新项目(No.AH201410367024)
文摘
目的探讨正常人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stromal cells,hUC-MSCs)分泌的外泌体(exosomes)的免疫调节功能及对恶性肿瘤细胞体外增殖的影响。方法采用组织贴壁法分离培养hUC-MSCs,收集第3~6代hUC-MSCs上清液,使用超速离心法分离纯化exosomes;通过电子显微镜观察exosomes形态并分析其直径和直径分布范围等特征;采用流式细胞仪检测其表面hUC-MSCs来源的CD44、CD73标志物。将exosomes与正常人外周血单个核细胞共培养,采用MTT检测exosomes对淋巴细胞增殖的影响,ELISA法检测上清液中IL-4和INF-γ的分泌量。选择慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞株,加入exosomes共培养,应用MTT法、PI/AnnexinⅤ双染流式法检测exosomes对癌细胞体外生长增殖、凋亡的影响。结果组织贴壁法成功分离hUC-MSCs,传代后呈长梭状生长。电镜观察分离得到的exosomes为椭圆形膜性小囊泡,经统计得出其直径在6.8~78.1nm之间,且分布比较集中。流式细胞术测得exosomes高表达黏附分子CD44(54.1%)与干细胞标志物CD73(31.5%),MTT和ELISA检测结果表明,不同浓度的exosomes均抑制外周血单个核细胞增殖且抑制细胞因子IL-4和INF-γ的分泌,呈现剂量依赖性。体外实验表明exosomes对K562细胞株具有抑制增殖、促进凋亡的作用。结论 hUC-MSCs来源的exosomes具有免疫调节作用及抑制K562细胞增殖的作用。
关键词
间充质干细胞
外泌体
免疫调节
增殖
凋亡
Keywords
mesenchymal stem cells
exosomes
immunomodulatory
proliferation
apoptosis
分类号
R329 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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题名
作者
出处
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1
人脐带间充质干细胞来源外泌体的生物学特性研究
杨向荣
丁娟
徐正阳
王珏
纪红梅
李玉云
《华中科技大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2016
15
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