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题名核心蛋白多糖对兔晶状体上皮细胞增生的抑制作用
被引量：1
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作者
向建南
张桂兰
张海江
王国华
霍鸣
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机构
三峡大学医学院三峡大学第一临床医学院眼科
三峡大学葛洲坝中心医院眼科
宜昌市中心人民医院眼科
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出处
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第1期41-45,共5页
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文摘
背景研究发现，白内障囊外摘出术后组织修复反应可诱导房水中活性转化生长因子β（TGF—β）的增加，残留的晶状体上皮细胞（LECs）移行、分化，细胞外基质沉积，引起上皮一间质转化，导致后囊膜混浊（PCO）的发生。寻求有效的抑制LECs增生的药物对于临床上防治PCO的发生具有重要意义。目的探讨核心蛋白多糖（decorin）对兔LECs增生的抑制作用及其剂量一效应与时间一效应的关系。方法兔LECs细胞株进行培养和传代，将处于指数生长期的细胞以8X10。个／L密度接种于96孔板，将0．1、1．0、10．0mg／Ldecorin分别加入培养基中培养24、48、72h，加入体积分数0．1％DMSO培养的细胞为阳性对照组，常规培养基培养的细胞为空白对照组。MTT比色法分别测定不同质量浓度的decorin作用于LECs不同时间后的细胞生长抑制率；采用流式细胞技术测定各组细胞的细胞周期，用ELISA法检测各组培养液上清中TGF—β水平，逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法测定TGF-βmRNA在LECs中的表达，免疫细胞化学法观察α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）的表达。结果ELISA检测结果表明，各组培养基上清液中TGF-β表达量的差异有统计学意义（F=39．24，P=0．03），不同质量浓度组TGF—β水平均明显低于空白对照组，差异有统计学意义（P〈0．01），1．0mg／L、10．0mg／Ldecorin组TGF—β水平均明显低于0．1mg／Ldecorin组（P〈0．05）。MTT比色法结果显示，≥1．0mg／Ldecorin组LECs增生的抑制率明显高于空白对照组，各质量浓度decorin组药物作用48h和72h后LECs增生的抑制率明显高于24h的值，药物作用72h后LECs增生的抑制率明显高于48h的值，差异均有统计学意义（P〈0．05），各质量浓度decorin组G0／G1期LECs所占比例均较空白对照组明显增加，差异均有统计学意义（P〈0．05）。RT．PCR检测显示，TGF—βmRNA的表达随着decorin质量浓度的升高而降低。免疫组织化学染色表明，10．0mg／Ldeeorin组d—SMA在LECs中的表达明显弱于空白对照组。结论Decorin可以抑制LECs的增生，也可以诱导LECs凋亡，其效应呈明显的剂量和时间依赖性，有望成为最具潜力的防治PCO的药物之一。
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关键词
晶状体上皮细胞
转化生长因子
核心蛋白多糖
后囊膜混浊
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Keywords
Lens epithelial cell
Transforming growth factor
Decorin
Posterior capsular opacification
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分类号
R776.1
[医药卫生—眼科]
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题名核心蛋白多糖对兔晶状体上皮细胞增生的抑制作用
被引量：1
- 2
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作者
向建南
张桂兰
张海江
王国华
霍鸣
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机构
三峡大学医学院第一临床医学院眼科
葛洲坝中心医院眼科
宜昌市中心人民医院眼科
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出处
《眼科新进展》
CAS
北大核心
2011年第4期327-331,共5页
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文摘
目的探讨核心蛋白多糖(Decorin)对兔晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)增生的抑制作用及其剂量-效应与时间-效应的关系,为药物防治后发性白内障提供新的选择。方法 MTT比色法分别测定不同浓度的Decorin(0.1mg·L-1、1.0mg·L-1、10.0mg·L-1)作用于LEC不同时间后的细胞生长抑制率;采用流式细胞技术测定细胞周期,用ELISA法检测各组培养液上清中TGF-β的水平,RT-PCR测定TGF-βmRNA的表达,免疫细胞化学观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)。结果 ELISA示每100万个细胞中对照组TGF-β含量为(427.24±41.34)ng,0.1mg·L-1、1.0mg·L-1和10.0mg·L-1Decorin组TGF-β的含量分别为(236.01±28.63)ng、(117.86±18.14)ng、(111.72±26.72)ng,与对照组比较差异均有显著统计学意义(均为P<0.01)。MTT比色法实验结果显示,作用24h对照组抑制率为(3.62±1.34)%,0.1mg·L-1、1.0mg·L-1和10.0mg·L-1Decorin组抑制率分别为(4.14±2.08)%、(12.93±2.47)%、(23.47±1.78)%,LEC生长抑制率增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05);随着Decorin作用时间延长,生长抑制率增加,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。随药物浓度及作用时间延长,LEC出现明显的G0/G1期阻滞,G0/G1期细胞所占比例明显升高(P<0.05)。RT-PCR示Decorin组TGF-βmRNA表达明显减少,与MTT法检测结果呈现大致相同的趋势,免疫细胞化学观察,对照组α-SMA表达较多,细胞肥大,细胞质呈棕色,Decorin组α-SMA较少表达。Decorin表现出明显的抑制作用。结论 Decorin对LEC有抑制增生和诱导凋亡作用,且呈明显的剂量-效应与时间-效应关系,可望成为后发性白内障的防治药物。
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关键词
晶状体上皮细胞
转化生长因子
核心蛋白多糖
后发性白内障
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Keywords
lens epithelial cell； transforming growth factor； Decorin； posterior capsular opacification；
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分类号
Q959.836
[生物学—动物学]
R776
[医药卫生—眼科]
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