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猪α干扰素基因经密码子改造在毕赤酵母菌中的高效分泌表达
被引量：
8
1
作者
刘健
陈瑞爱
+3 位作者
刘珊珊
朱杰仪
唐明森
罗满林
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第1期93-97,共5页
根据毕赤酵母Pichia pastoris表达系统对于密码子的偏嗜性,将去除信号肽的猪α干扰素(PoIFN-α)基因重新设计改造并合成一段新的核苷酸序列,置于毕赤酵母菌α因子分泌信号的DNA序列后,构建成pPICZαC-PoIFN-α分泌型重组表达载体,电转...
根据毕赤酵母Pichia pastoris表达系统对于密码子的偏嗜性,将去除信号肽的猪α干扰素(PoIFN-α)基因重新设计改造并合成一段新的核苷酸序列,置于毕赤酵母菌α因子分泌信号的DNA序列后,构建成pPICZαC-PoIFN-α分泌型重组表达载体,电转化进入野生型毕赤酵母菌X-33中,经Zeoc inTM抗性筛选后获得大量多拷贝重组子,SDS-PAGE和W estern-b lot分析结果表明,所获得的重组子能够分泌表达出相对分子质量约为19 000的PoIFN-α特异蛋白,其有效蛋白表达量较高达54.105 mg/L.经Vero-VSV系统测定,PoIFN-α效价达到5.87×107U/L.试验将PoIFN-α成熟肽全基因密码子进行改造,并实现了其在毕赤酵母菌表达系统中的高效分泌表达.
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关键词
Α干扰素
密码子改造
毕赤酵母
分泌表达
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职称材料
题名
猪α干扰素基因经密码子改造在毕赤酵母菌中的高效分泌表达
被引量：
8
1
作者
刘健
陈瑞爱
刘珊珊
朱杰仪
唐明森
罗满林
机构
华南农业大学兽医学院
广东大华农
动物
保健品股份有限公司
莱芜市畜牧办公室动物疫病与预防控制中心
出处
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第1期93-97,共5页
基金
广东温氏食品集团有限公司2008年度第8批科研项目(C080711)
文摘
根据毕赤酵母Pichia pastoris表达系统对于密码子的偏嗜性,将去除信号肽的猪α干扰素(PoIFN-α)基因重新设计改造并合成一段新的核苷酸序列,置于毕赤酵母菌α因子分泌信号的DNA序列后,构建成pPICZαC-PoIFN-α分泌型重组表达载体,电转化进入野生型毕赤酵母菌X-33中,经Zeoc inTM抗性筛选后获得大量多拷贝重组子,SDS-PAGE和W estern-b lot分析结果表明,所获得的重组子能够分泌表达出相对分子质量约为19 000的PoIFN-α特异蛋白,其有效蛋白表达量较高达54.105 mg/L.经Vero-VSV系统测定,PoIFN-α效价达到5.87×107U/L.试验将PoIFN-α成熟肽全基因密码子进行改造,并实现了其在毕赤酵母菌表达系统中的高效分泌表达.
关键词
Α干扰素
密码子改造
毕赤酵母
分泌表达
Keywords
the porcine interferon alpha（PoIFN-α）
codon change
Pichia pastoris
secreted expression
分类号
S852.4 [农业科学—基础兽医学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪α干扰素基因经密码子改造在毕赤酵母菌中的高效分泌表达
刘健
陈瑞爱
刘珊珊
朱杰仪
唐明森
罗满林
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
8
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