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蒙古牛皮肤Qa-1b/NKG2A的表达及Qa-1b纳米抗体的制备和功能鉴定
1
作者
金聪俐
贾琼
+5 位作者
任泓睿
迟志端
白瑞
郭湘
范瑞文
Herrid Muren
《畜牧兽医学报》
北大核心
2025年第1期404-416,共13页
本研究旨在通过检测蒙古牛皮肤Qa-1b/NKG2A的表达特征,分析其参与皮肤免疫的功能,及Qa-1b在抗黑素瘤发展中可能发挥的作用。通过实时定量PCR、Western blot、免疫组织化学方法以及免疫共沉淀法对Qa-1b/NKG2A在皮肤中的表达进行相对定量...
本研究旨在通过检测蒙古牛皮肤Qa-1b/NKG2A的表达特征,分析其参与皮肤免疫的功能,及Qa-1b在抗黑素瘤发展中可能发挥的作用。通过实时定量PCR、Western blot、免疫组织化学方法以及免疫共沉淀法对Qa-1b/NKG2A在皮肤中的表达进行相对定量和定位以及互作关系分析;以Qa-1b多肽为抗原,使用噬菌体展示技术,从羊驼黑色素瘤细胞纳米抗体文库中进行淘筛,获得结合性较强的纳米抗体(Qa-1b-VHH)序列;构建pET28a-Qa-1b-VHH原核表达重组质粒,通过IPTG诱导表达和镍柱纯化,获得Qa-1b纳米抗体。经ELISA检测Qa-1b纳米抗体与抗原的特异性后,将Qa-1b纳米抗体应用于Western blot和免疫组织化学方法检测组织中Qa-1b的表达,以及添加到B16黑素瘤细胞培养基中,通过CCK8法、细胞划痕法和Western blot法检测其对B16细胞增殖及迁移的影响以及与增殖和迁移相关蛋白表达情况。结果显示:Qa-1b和NKG2A在蒙古牛皮肤组织的毛囊外根鞘和血管内皮中表达,在犊牛皮肤中的表达量显著高于成年牛(P<0.01或P<0.001)。且Qa-1b和NKG2A在皮肤中存在互作关系。所获得的Qa-1b纳米抗体特异性较强,可用作Western blot和免疫组织化学中的一抗检测其他组织中Qa-1b的表达;Qa-1b纳米抗体添加到B16细胞培养基中,应用CCK 8法和细胞划痕法检测该Qa-1b纳米抗体对B16细胞增殖和迁移有明显的抑制效果,细胞增殖过程中Ras、MEK1、CyclinD1、CDK4蛋白的表达显著下调(P<0.01或P<0.001)。本试验揭示了Qa-1b/NKG2A参与皮肤免疫以保证毛囊正常生长,尤其是犊牛;Qa-1b纳米抗体可抑制B16细胞增殖和迁移,为增强皮肤免疫及抗黑素瘤发展的抗体药物提供理论依据。
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关键词
Qa-1b
NKG2A
纳米抗体
皮肤免疫
黑素瘤
B16细胞
蒙古牛
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职称材料
高效生产优质雪花肉的研究进展
2
作者
刘朝乐门
敖日格乐
+4 位作者
王纯洁
斯木吉德
陈浩
赵军
王岗
《中国畜禽种业》
2024年第10期86-95,共10页
雪花牛肉以其肌内脂肪如雪花般均匀分布而闻名,这种肉不仅口感细腻、多汁,而且营养价值高,深受消费者喜爱。所以如何高效生产雪花肉是我国迫在眉睫的问题。雪花肉的生产过程是一个复杂的过程,涉及到多种因素。近年来,国内外对如何改善...
雪花牛肉以其肌内脂肪如雪花般均匀分布而闻名,这种肉不仅口感细腻、多汁,而且营养价值高,深受消费者喜爱。所以如何高效生产雪花肉是我国迫在眉睫的问题。雪花肉的生产过程是一个复杂的过程,涉及到多种因素。近年来,国内外对如何改善肉品质进行了大量的研究。该文从肌肉和脂肪细胞的生长发育机制、遗传因素(品种、遗传力、性别)、营养因素(饲养方式、日粮营养水平)、管理因素(环境管理、宰前运输、宰后排酸)等方面对肌间脂肪沉积的影响进行了阐述,以期为推动我国肉牛产业的可持续发展提供理论参考。
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关键词
雪花肉
肉品质
肌内脂肪沉积
遗传因素
管理因素
营养因素
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职称材料
题名
蒙古牛皮肤Qa-1b/NKG2A的表达及Qa-1b纳米抗体的制备和功能鉴定
1
作者
金聪俐
贾琼
任泓睿
迟志端
白瑞
郭湘
范瑞文
Herrid Muren
机构
山西农业大学动物医学学院
草原和牛投资有限公司
山西白求恩医院
出处
《畜牧兽医学报》
北大核心
2025年第1期404-416,共13页
基金
内蒙古自治区“揭榜挂帅”项目(2022JBGS0023)
山西省自然科学基金(202203021222348)。
文摘
本研究旨在通过检测蒙古牛皮肤Qa-1b/NKG2A的表达特征,分析其参与皮肤免疫的功能,及Qa-1b在抗黑素瘤发展中可能发挥的作用。通过实时定量PCR、Western blot、免疫组织化学方法以及免疫共沉淀法对Qa-1b/NKG2A在皮肤中的表达进行相对定量和定位以及互作关系分析;以Qa-1b多肽为抗原,使用噬菌体展示技术,从羊驼黑色素瘤细胞纳米抗体文库中进行淘筛,获得结合性较强的纳米抗体(Qa-1b-VHH)序列;构建pET28a-Qa-1b-VHH原核表达重组质粒,通过IPTG诱导表达和镍柱纯化,获得Qa-1b纳米抗体。经ELISA检测Qa-1b纳米抗体与抗原的特异性后,将Qa-1b纳米抗体应用于Western blot和免疫组织化学方法检测组织中Qa-1b的表达,以及添加到B16黑素瘤细胞培养基中,通过CCK8法、细胞划痕法和Western blot法检测其对B16细胞增殖及迁移的影响以及与增殖和迁移相关蛋白表达情况。结果显示:Qa-1b和NKG2A在蒙古牛皮肤组织的毛囊外根鞘和血管内皮中表达,在犊牛皮肤中的表达量显著高于成年牛(P<0.01或P<0.001)。且Qa-1b和NKG2A在皮肤中存在互作关系。所获得的Qa-1b纳米抗体特异性较强,可用作Western blot和免疫组织化学中的一抗检测其他组织中Qa-1b的表达;Qa-1b纳米抗体添加到B16细胞培养基中,应用CCK 8法和细胞划痕法检测该Qa-1b纳米抗体对B16细胞增殖和迁移有明显的抑制效果,细胞增殖过程中Ras、MEK1、CyclinD1、CDK4蛋白的表达显著下调(P<0.01或P<0.001)。本试验揭示了Qa-1b/NKG2A参与皮肤免疫以保证毛囊正常生长,尤其是犊牛;Qa-1b纳米抗体可抑制B16细胞增殖和迁移,为增强皮肤免疫及抗黑素瘤发展的抗体药物提供理论依据。
关键词
Qa-1b
NKG2A
纳米抗体
皮肤免疫
黑素瘤
B16细胞
蒙古牛
Keywords
Qa-1b
NKG2A
nanobody
skin immunity
melanoma
B16 cells
Mongolian cattle
分类号
S857.5 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
高效生产优质雪花肉的研究进展
2
作者
刘朝乐门
敖日格乐
王纯洁
斯木吉德
陈浩
赵军
王岗
机构
内蒙古元
牛
繁育科技
有限公司
内蒙古农业大学动物科学学院
内蒙古农业大学兽医学院
草原和牛投资有限公司
出处
《中国畜禽种业》
2024年第10期86-95,共10页
基金
内蒙古自治区科技计划项目(2021GG0210)
内蒙古自治区种业科技创新重大示范工程“揭榜挂帅”项目(2022JBGS0023)
“草原英才”工程专项(CYYC-2023-HLXQ-004)。
文摘
雪花牛肉以其肌内脂肪如雪花般均匀分布而闻名,这种肉不仅口感细腻、多汁,而且营养价值高,深受消费者喜爱。所以如何高效生产雪花肉是我国迫在眉睫的问题。雪花肉的生产过程是一个复杂的过程,涉及到多种因素。近年来,国内外对如何改善肉品质进行了大量的研究。该文从肌肉和脂肪细胞的生长发育机制、遗传因素(品种、遗传力、性别)、营养因素(饲养方式、日粮营养水平)、管理因素(环境管理、宰前运输、宰后排酸)等方面对肌间脂肪沉积的影响进行了阐述,以期为推动我国肉牛产业的可持续发展提供理论参考。
关键词
雪花肉
肉品质
肌内脂肪沉积
遗传因素
管理因素
营养因素
Keywords
Marbling meat
Meat quality
Intramuscular fat deposition
Genetic factors
Management factors
Nutritional factors
分类号
S823.9 [农业科学—畜牧学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
蒙古牛皮肤Qa-1b/NKG2A的表达及Qa-1b纳米抗体的制备和功能鉴定
金聪俐
贾琼
任泓睿
迟志端
白瑞
郭湘
范瑞文
Herrid Muren
《畜牧兽医学报》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
高效生产优质雪花肉的研究进展
刘朝乐门
敖日格乐
王纯洁
斯木吉德
陈浩
赵军
王岗
《中国畜禽种业》
2024
0
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职称材料
已选择
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