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题名副猪嗜血杆菌sodA基因的表达及其理化性质
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作者
胡基雄
王席
李国攀
荣俊
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机构
长江大学生命科学学院
荆州长新生物有限公司
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出处
《湖北农业科学》
2021年第10期142-147,共6页
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基金
高校教育综合奖补项目(2018-702090250401)。
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文摘
为探究副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)sodA基因编码的超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)的活性及理化性质,设计特异性引物从HPS中扩增得到目的基因sodA,利用原核表达系统对HPS SOD蛋白进行表达,通过硫酸铵分级沉淀、Sephacryl S-300凝胶过滤层析以及DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析等方法对表达蛋白进行了分离纯化,利用邻苯三酚自氧化法对纯化产物进行SOD酶活性检测,通过HPSEC法、火焰原子吸收分光光度法对其理化性质进行了初步探究。结果表明,表达的重组HPS SOD蛋白质为可溶性蛋白质,单亚基分子质量为26 ku,纯化后目的蛋白质纯度为95%,纯化后的重组HPS SOD蛋白质比活性为215.9 U/mg,经HPSEC法检测分析,重组HPS SOD呈多聚体,通过火焰原子吸收分光光度法检测纯化的重组HPS SOD中锰元素含量为0.71 mg/L。
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关键词
副猪嗜血杆菌(Haemophilus
parasuis)
超氧化物歧化酶
邻苯三酚自氧化法
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Keywords
Haemophilus parasuis
superoxide dismutase
pyrogallol autoxidation method
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分类号
S852.61
[农业科学—基础兽医学]
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