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转几丁质酶基因烟草酶活性及抗病性研究
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作者 时焦 韩锦峰 +2 位作者 徐宜民 Cooper J I 刘华山 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2002年第4期1-4,共4页
采用荧光定量法对转几丁质酶基因烟草T2植株的几丁质酶活性进行了测定,结果表明,转基因烟草株系的几丁质酶活性明显高于未转基因烟草,同时发现,pH对转基因烟草中的几丁质酶活性有一定的影响。对转基因烟草接种烟草炭疽病菌进行抗病性鉴定。
关键词 转几丁质酶基因 烟草 酶活性 抗病性
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半嵌套式PCR检测转几丁质酶基因烟草研究 被引量:8
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作者 时焦 M Naylor +2 位作者 M L Edwards J I Cooper 韩锦峰 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 2002年第2期11-15,共5页
用含卡那霉素的培养基首先对转几丁质酶基因烟草种子和烟苗进行初步筛选鉴定 ,再用 Western Blot进一步证实抗卡那霉素的转基因烟苗中外源转几丁质酶基因的表达。然后研究半嵌套式 PCR(Semi- nested PCR)检测转几丁质酶基因烟草植株及... 用含卡那霉素的培养基首先对转几丁质酶基因烟草种子和烟苗进行初步筛选鉴定 ,再用 Western Blot进一步证实抗卡那霉素的转基因烟苗中外源转几丁质酶基因的表达。然后研究半嵌套式 PCR(Semi- nested PCR)检测转几丁质酶基因烟草植株及其烤后烟叶中的所转目的基因 ;利用限制性内切酶 H ind 对半嵌套式 PCR产物进行酶切 ,从而验证半嵌套式 PCR产物是否为真正的目的基因。研究结果表明 ,半嵌套式 PCR是一种快速。 展开更多
关键词 半嵌套式PCR 检测 转基因烟草 几丁质酶基因
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转几丁质酶基因烟草遗传稳定性研究
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作者 时焦 韩锦峰 +2 位作者 王凤龙 徐宜民 J I Cooper 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 2005年第2期20-23,共4页
从转几丁质酶基因烟草株系(NPTII基因是选择标记基因)对卡那霉素的抗性,及外源几丁质酶基因表达蛋白的活性(WesternBlot检测)两个方面对转基因株系的遗传稳定性进行了分析研究。在卡那霉素抗性检测试验中,检测了13个T2 转基因株系,其中... 从转几丁质酶基因烟草株系(NPTII基因是选择标记基因)对卡那霉素的抗性,及外源几丁质酶基因表达蛋白的活性(WesternBlot检测)两个方面对转基因株系的遗传稳定性进行了分析研究。在卡那霉素抗性检测试验中,检测了13个T2 转基因株系,其中9个株系被检测种子10 0 %对卡那霉素(10 0mg/L)具有抗性;T3 和T4转基因株系各检测了10个,10 0 %被检测种子在含卡那霉素10 0mg/L的MS培养基上长成了烟苗。WesternBlot检测了11个T2 株系,检测结果表明,6个株系被检测植株10 0 %含有外源几丁质酶蛋白,2个株系被检测植株80 %含有外源几丁质酶蛋白,2个株系被检测植株5 0 %含有外源几丁质酶蛋白,1个株系被检测植株19 .0 5 %含有外源几丁质酶蛋白。在温室内将转基因烟草与未转基因烟草密植在一起,种植2代,烟株开花期模仿自然风力对烟株吹风,进行了转基因烟草是否可以通过花粉进行基因漂移的研究。研究结果表明,在自然风媒条件下未发现转基因烟草可进行基因漂移。 展开更多
关键词 烟草 几丁质酶基因 遗传稳定性 基因漂移
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