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一种密码子优化的酸性普鲁兰酶基因在巴斯德毕赤酵母中的高效表达
被引量：
11
1
作者
王兵波
沈微
+4 位作者
钱灵紫
李琛
罗枭
樊游
陈献忠
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第7期9-15,共7页
根据毕赤酵母密码子偏好性对来源于Bacillus deramificans的普鲁兰酶基因进行优化并构建在细胞内表达普鲁兰酶的重组毕赤酵母。优化后普鲁兰酶编码基因Bd P4在巴斯德毕赤酵母GS115中的表达水平平均比优化前的普鲁兰酶基因Bd P提高4倍以...
根据毕赤酵母密码子偏好性对来源于Bacillus deramificans的普鲁兰酶基因进行优化并构建在细胞内表达普鲁兰酶的重组毕赤酵母。优化后普鲁兰酶编码基因Bd P4在巴斯德毕赤酵母GS115中的表达水平平均比优化前的普鲁兰酶基因Bd P提高4倍以上。筛选到1株表达水平较高的重组菌Pichia pastoris GS115/p PIC9K-Bd P4 WB54。在5 L发酵罐获得了初步优化的发酵条件:发酵液p H 4.5,在菌体量达到87 g/L时开始甲醇流加,采用溶氧(DO)恒定策略控制甲醇流加,DO控制在25%的水平,甲醇流加速率为9.9 m L/(L·h),搅拌转速控制在最大值800 r/min,通风量2 V/(v·m)。在优化条件下重组菌发酵酶活在2 000 U/m L以上。重组酶最适p H为4.0,最适作用温度50℃,在50和55℃下酶活半衰期分别为32和18 h。
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关键词
酸性普鲁兰酶
密码子优化
巴斯德毕赤酵母
高密度发酵
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题名
一种密码子优化的酸性普鲁兰酶基因在巴斯德毕赤酵母中的高效表达
被引量：
11
1
作者
王兵波
沈微
钱灵紫
李琛
罗枭
樊游
陈献忠
机构
江南大学工业生物技术教育
部
重点实验室
江南大学中国高校工业微生物资源数据平台
苏州欧福蛋业有限公司研发部
帝斯曼(中国)
有限公司
亲水胶体事业
部
出处
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第7期9-15,共7页
基金
国家863高技术研究发展计划(2013AA102101-5)
江南大学自主科研计划重点项目(JUSRP51402A)
文摘
根据毕赤酵母密码子偏好性对来源于Bacillus deramificans的普鲁兰酶基因进行优化并构建在细胞内表达普鲁兰酶的重组毕赤酵母。优化后普鲁兰酶编码基因Bd P4在巴斯德毕赤酵母GS115中的表达水平平均比优化前的普鲁兰酶基因Bd P提高4倍以上。筛选到1株表达水平较高的重组菌Pichia pastoris GS115/p PIC9K-Bd P4 WB54。在5 L发酵罐获得了初步优化的发酵条件:发酵液p H 4.5,在菌体量达到87 g/L时开始甲醇流加,采用溶氧(DO)恒定策略控制甲醇流加,DO控制在25%的水平,甲醇流加速率为9.9 m L/(L·h),搅拌转速控制在最大值800 r/min,通风量2 V/(v·m)。在优化条件下重组菌发酵酶活在2 000 U/m L以上。重组酶最适p H为4.0,最适作用温度50℃,在50和55℃下酶活半衰期分别为32和18 h。
关键词
酸性普鲁兰酶
密码子优化
巴斯德毕赤酵母
高密度发酵
Keywords
acid-resistant pullulanase
codon optimization
Pichia pastoris
high cell-density fermentation
分类号
TQ926 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
一种密码子优化的酸性普鲁兰酶基因在巴斯德毕赤酵母中的高效表达
王兵波
沈微
钱灵紫
李琛
罗枭
樊游
陈献忠
《食品与发酵工业》
CAS
CSCD
北大核心
2016
11
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