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西红花酸对AGEs诱导血管内皮细胞通透性增加的抑制作用 被引量:7
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作者 向敏 王建梅 +2 位作者 周成华 张雅琴 吴萍萍 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1254-1259,共6页
目的研究西红花酸对晚期糖基化终产物(advancedglycation end products,AGEs)诱导血管内皮细胞通透性增加的抑制作用并探讨其机制。方法用不同剂量西红花酸(0.01、0.1、1μmol.L-1)预孵牛主动脉血管内皮细胞(bo-vine vascular endotheli... 目的研究西红花酸对晚期糖基化终产物(advancedglycation end products,AGEs)诱导血管内皮细胞通透性增加的抑制作用并探讨其机制。方法用不同剂量西红花酸(0.01、0.1、1μmol.L-1)预孵牛主动脉血管内皮细胞(bo-vine vascular endothelial cells,BECs)12 h后,AGEs(100μg.L-1)刺激内皮细胞,以HRP作示踪剂检测内皮细胞单层通透性变化,ELISA法测定细胞上清MCP-1和TNF-α水平,罗丹明-鬼笔环肽荧光染色检测细胞骨架蛋白F-actin变化,Cell-based ELISA法和液闪法分别测定磷酸化p38 MAPK蛋白表达量和活性变化。同时设定正常对照组(control)、AGEs(100 mg.L-1)模型组和葛根素(1 g.L-1)阳性对照组。结果与AGEs模型照组相比,西红花酸(0.1、1μmol.L-1)预孵细胞后,F-actin骨架蛋白破环程度有所减轻,细胞单层通透性减小(P<0.01或0.05),TNF-α和MCP-1分泌降低,磷酸化p38MAPK的数量下降且活性被抑制(P<0.01或0.05)。结论西红花酸对AGEs诱导内皮细胞通透性增加有抑制作用,该作用可能与其抑制p38MAPK通路有关,这可能是其抗糖尿病血管病变的机制之一。 展开更多
关键词 西红花酸 内皮细胞 晚期糖基化终产物 通透性 F—actin骨架蛋白 p38MAPK
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AGEs-RAGE通路阻断对血管平滑肌细胞迁移能力的影响 被引量:8
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作者 向敏 张雅琴 +1 位作者 吴萍萍 高振宇 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期199-203,共5页
研究AGEs-RAGE通路阻断对糖尿病大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移能力的影响并探讨其可能机制。以晚期糖基化终产物受体(RAGE)抗体预孵VSMCs后,再用晚期糖基化终产物(AGEs)刺激VSMCs细胞,Transwell法检测VSMCs迁移能力变化,MTT法及E... 研究AGEs-RAGE通路阻断对糖尿病大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)迁移能力的影响并探讨其可能机制。以晚期糖基化终产物受体(RAGE)抗体预孵VSMCs后,再用晚期糖基化终产物(AGEs)刺激VSMCs细胞,Transwell法检测VSMCs迁移能力变化,MTT法及ELISA分别检测VSMCs增殖及p27蛋白表达的变化,DCFH法测定VSMCs细胞内活性氧(ROS)水平,RT-PCR法测定NOX1 mRNA表达水平。结果显示:RAGE抗体可以明显抑制AGEs诱导的VSMCs迁移作用(P<0.01),且抑制迁移作用较其抑制增殖作用强,细胞ROS水平降低(P<0.01),NOX1 mRNA表达量下降但P27蛋白表达变化不大。实验结果表明,用RAGE抗体阻断AGEs-RAGE通路可以抑制VSMCs的迁移,其机制可能与其下调NOX1mRNA表达从而降低细胞内氧化应激水平有关。 展开更多
关键词 晚期糖基化终产物 晚期糖基化终产物受体 糖尿病 血管平滑肌细胞 迁移 靶点 信号传导
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加味五味消毒饮提取物对糖尿病大鼠牙周组织的保护作用 被引量:1
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作者 向敏 张雅琴 +4 位作者 吴萍萍 高振宇 刘竞天 顾瑶华 王建梅 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2012年第11期1223-1228,共6页
目的:观察加味五味消毒饮提取物(modi-fied wuweixiaoduyin extracts,MWE)对糖尿病(diabetic mellitus,DM)大鼠牙周组织的保护作用并探讨其初步机制。方法:以栓线法结合注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ,50mg/kg)法制备糖尿病性牙周... 目的:观察加味五味消毒饮提取物(modi-fied wuweixiaoduyin extracts,MWE)对糖尿病(diabetic mellitus,DM)大鼠牙周组织的保护作用并探讨其初步机制。方法:以栓线法结合注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ,50mg/kg)法制备糖尿病性牙周炎动物模型。实验分5组,正常对照组、模型组、氨基胍(Aminoguanidine,AG)阳性组(100mg/kg)、MWE治疗小剂量组(20g生药/kg)和大剂量组(40g生药/kg),每组动物数10只。灌胃给药治疗6周后处死大鼠,测定空腹血糖值和糖化血红蛋白(GHb)水平,ELISA法测定血清晚期糖基化终产物(AGEs)浓度,牙周探针测量牙周袋深度,X光牙片机检查大鼠左上颌牙槽骨组织变化,免疫组化法检测牙龈组织AGEs受体(receptor for AGEs,RAGE)蛋白表达。结果:治疗6周后,MWE几乎没有降血糖作用,但与模型组相比,治疗组牙周袋深度下降,GHb和AGEs水平降低(P<0.01),骨小粱排列紊乱状况和牙槽骨水平吸收有所改善,RAGE蛋白表达水平也有下降。结论:MWE对糖尿病大鼠牙周组织具有保护作用,其机制可能与干扰AGEs-RAGE信号通路有关。 展开更多
关键词 加味五味消毒饮 糖尿病 牙周炎 晚期 糖基化产物 晚期糖基化产物受体 炎症反应
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分枝结构特异性内切酶-1(FEN1)突变体N266D表达纯化及功能分析 被引量:1
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作者 邱秀芹 史崔颖 +4 位作者 孙洪芳 王晓晓 杜佳慧 郭志刚 刘松柏 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期34-37,48,共5页
人源分枝结构特异性内切酶-1(Flap endonuclease 1,FEN1)作为DNA复制及DNA修复过程中重要的参与者,在维护基因组稳定和完整性方面具有不可替代的作用。尽管FEN1在很多肿瘤细胞中的表达都发生异常,但FEN1基因体细胞突变或遗传突变事件在... 人源分枝结构特异性内切酶-1(Flap endonuclease 1,FEN1)作为DNA复制及DNA修复过程中重要的参与者,在维护基因组稳定和完整性方面具有不可替代的作用。尽管FEN1在很多肿瘤细胞中的表达都发生异常,但FEN1基因体细胞突变或遗传突变事件在人体细胞中却很少发生,发表的文献报道较少。前期在白血病患者骨髓细胞中发现了FEN1基因的一种N266D杂合突变体,基于此,成功构建了FEN1-N266D在原核及真核中的表达重组质粒,纯化了原核FEN1-WT、FEN1-N266D蛋白;通过TAMRA标记的DNA底物,检测了FEN、GEN和EXO的3种酶活性,结果发现N266D突变体的FEN、GEN及EXO活性基本不变;RTCA方法检测发现N266D蛋白过表达使细胞增殖能力受到抑制。通过以上对FEN1突变体N266D蛋白的核酸酶活性及对细胞增殖能力影响的分析,为进一步探讨FEN1突变体N266D在肿瘤发生进展中的潜在功能奠定了基础。 展开更多
关键词 FEN1 基因突变体 核酸酶活性 细胞增殖
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FLT3-ITD插入长度对32D细胞增殖、凋亡及靶向抑制剂敏感性的影响
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作者 刘松柏 董豪杰 +3 位作者 王隽 邱桥成 薛胜利 李凌 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期1034-1038,共5页
目的:研究FLT3-ITD突变体ITD插入长度对细胞增殖能力、凋亡及靶向抑制剂敏感性的影响,为临床分级治疗FLT3-ITD突变型急性髓系白血病提供数据参考。方法:从先前解析出的ITD序列中挑选3个位置相同或相邻的不同大小的ITD序列,构建FLT3-ITD... 目的:研究FLT3-ITD突变体ITD插入长度对细胞增殖能力、凋亡及靶向抑制剂敏感性的影响,为临床分级治疗FLT3-ITD突变型急性髓系白血病提供数据参考。方法:从先前解析出的ITD序列中挑选3个位置相同或相邻的不同大小的ITD序列,构建FLT3-ITD真核表达质粒;利用慢病毒包被系统建立FLT3-ITD稳定表达32D细胞株;检测FLT3-ITD细胞株细胞增殖情况,经靶向抑制剂AC220处理后的其增殖抑制及凋亡情况。结果:成功构建了ITD1、ITD2和ITD3三株FLT3-ITD稳定表达32D细胞株;ITD1、ITD2和ITD3细胞株在无IL3因子培养基生长条件下48 h后的增殖倍数分别是2.3、3.7和4.3倍;在FLT3小分子抑制剂AC220加药条件下,ITD1、ITD2和ITD3细胞株增殖抑制IC50值分别是0.183、0.446和0.836 nmol/L,凋亡率分别是88.6%、34.2%和16.1%。结论:插入ITD长度长的FLT3-ITD突变体表达细胞在增殖能力和耐受靶向抑制剂AC220的能力方面均增强。 展开更多
关键词 FLT3-ITD 急性髓系白血病 插入长度 细胞增殖 凋亡
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