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建立脑肿瘤裸小鼠原位移植模型的方法探讨 被引量:1
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作者 李如军 黄强 +3 位作者 董军 宋武超 王爱东 兰青 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2009年第6期544-547,共4页
目的探讨建立脑肿瘤裸小鼠原位移植模型的方法。方法于脑立体定向仪辅助定位下,分别将经体外培养的脑肿瘤干细胞球(SU-1和SU-2)和人多形性胶质母细胞瘤细胞系单细胞悬液缓慢注射至裸小鼠右侧尾状核;徒手将SHG44细胞皮下移植瘤组织块、... 目的探讨建立脑肿瘤裸小鼠原位移植模型的方法。方法于脑立体定向仪辅助定位下,分别将经体外培养的脑肿瘤干细胞球(SU-1和SU-2)和人多形性胶质母细胞瘤细胞系单细胞悬液缓慢注射至裸小鼠右侧尾状核;徒手将SHG44细胞皮下移植瘤组织块、人多形性胶质母细胞瘤体外细胞系移植成功获得的颅内肿瘤组织块和肺癌脑转移瘤组织块接种于裸小鼠右侧尾状核,HE染色检测不同来源肿瘤细胞致瘤率。结果细胞悬液注射法致瘤率为100%(45/45)。肿瘤组织块直接移植法致瘤率分别为:SHG44细胞皮下移植瘤为93.33%(14/15),人多形性胶质母细胞瘤体外细胞系移植瘤为98.46%(128/130),肺癌脑转移瘤为72.31%(47/65);裸小鼠死亡率为1.41%(3/213)。形成的可移植性肿瘤分为侵袭性明显和不明显两种类型,与亲本肿瘤特征一致。结论两种移植方法均可成功制备包括脑肿瘤干细胞在内的人胶质瘤裸小鼠原位移植模型,反映了亲本肿瘤最基本的致瘤性和侵袭性特征。细胞悬液注射法操作时间较长,但为体外培养的单个细胞和细胞球移植所必须;肿瘤组织块直接移植法可用于临床肿瘤、可移植性肿瘤的直接接种,操作时间短、效率高,适用于批量实验。 展开更多
关键词 脑肿瘤 神经胶质瘤 干细胞 异种移植模型抗肿瘤试验 小鼠 疾病模型 动物
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人脑胶质瘤细胞对诱导分化药物敏感性的研究 被引量:8
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作者 孙立军 黄强 +2 位作者 王爱东 兰青 杜子威 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期419-423,共5页
目的 优选人脑胶质瘤细胞诱导分化剂。方法 应用MTT法、形态学、GFAP免疫荧光等方法鉴定环已亚甲基二乙酰胺、二甲基甲酰胺、丁酸钠、二丁酰杯AMP、苯乙酸钠、苯丁酸钠、亚砷酸钠等7种诱导剂对人脑胶质瘤细胞系SHG-44的诱导分化效果。结... 目的 优选人脑胶质瘤细胞诱导分化剂。方法 应用MTT法、形态学、GFAP免疫荧光等方法鉴定环已亚甲基二乙酰胺、二甲基甲酰胺、丁酸钠、二丁酰杯AMP、苯乙酸钠、苯丁酸钠、亚砷酸钠等7种诱导剂对人脑胶质瘤细胞系SHG-44的诱导分化效果。结果 亚砷酸钠、苯乙酸钠抑制肿瘤细胞增殖效果较差,苯丁酸钠、二丁酰环AMP、丁酸钠在1-2mM即可明显诱导人脑胶质瘤细胞多分化,表现为增殖抑制,胞突增长,GFAP表达升高现象。结论 人脑胶质瘤细胞对诱导分化剂苯丁酸钠、二丁酰环AMP和丁酸钠较为敏感,值得深入研究。 展开更多
关键词 药物敏感性 胶质瘤 诱导 细胞分化 苯丁酸钠 二丁酰环AMP
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抗胶质瘤重组免疫毒素SZ39-PE40的原核表达、纯化及复性研究 被引量:3
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作者 罗良生 王爱东 黄强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期355-358,共4页
目的 构建抗胶质瘤重组免疫毒素SZ39 PE4 0基因并在大肠杆菌中表达。对主要以包涵体形式表达的产物进行变性和复性研究。方法 从质粒pVC85中克隆PE4 0基因 ,与抗胶质瘤的单链抗体 (ScFv) SZ39基因进行拼接 ,构建重组免疫毒素SZ39 PE... 目的 构建抗胶质瘤重组免疫毒素SZ39 PE4 0基因并在大肠杆菌中表达。对主要以包涵体形式表达的产物进行变性和复性研究。方法 从质粒pVC85中克隆PE4 0基因 ,与抗胶质瘤的单链抗体 (ScFv) SZ39基因进行拼接 ,构建重组免疫毒素SZ39 PE4 0基因 ,并在大肠杆菌中表达。对表达产物 (包涵体 )进行分离、纯化、变性及复性处理后 ,以ELISA及免疫荧光技术 ,检查其对胶质瘤细胞的结合活性。结果 SDS PAGE及Westernblot分析显示 ,表达产物的相对分子质量 (Mr)为 6 80 0 0左右 ,与SZ39 PE4 0融合蛋白的理论推算值相符。凝胶灰度扫描显示 ,其表达量占菌体总蛋白的 2 0 %。ELISA及免疫荧光技术均证实 ,经复性的SZ39 PE4 0融合蛋白具有结合胶质瘤细胞SHG 4的活性。结论成功地构建并在原核细胞中表达SZ39 PE4 0融合蛋白基因 ,复性的表达产物具有特异性识别胶质瘤细胞的活性 。 展开更多
关键词 胶质瘤 重组免疫毒素 变性 复性
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珠穆根散改善血管性痴呆大鼠记忆障碍的实验研究 被引量:7
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作者 王飞 冯慎远 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 2003年第1期31-34,共4页
目的 :研究珠穆根散对血管性痴呆大鼠记忆障碍的作用及其可能的作用机制。方法 :通过夹闭大鼠两侧颈总动脉 ,制作大鼠血管性痴呆模型。采用水迷宫和电迷宫 ,在喂药前和喂药结束后对大鼠进行行为检测以检验大鼠记忆能力的变化。喂药结束... 目的 :研究珠穆根散对血管性痴呆大鼠记忆障碍的作用及其可能的作用机制。方法 :通过夹闭大鼠两侧颈总动脉 ,制作大鼠血管性痴呆模型。采用水迷宫和电迷宫 ,在喂药前和喂药结束后对大鼠进行行为检测以检验大鼠记忆能力的变化。喂药结束后 ,用高效液相色谱──荧光检测法测定各组大鼠海马组织去甲肾上腺素的含量变化。用电镜观察各组大鼠海马CA3区超微结构的改变。结果 :喂珠穆根散 5 0天后 ,药物治疗组与治疗对照组相比 ,大鼠通过迷宫的时间显著缩短 (P <0 0 5 ) ,说明其记忆力有明显的改善 ;大鼠海马去甲肾上腺素含量明显增高(P <0 0 5 )。治疗对照组大鼠海马CA3区超微结构病变以神经元细胞核和核膜变化最为显著 ,珠穆根散治疗组大鼠海马CA3区超微结构病变明显减轻。结论 :珠穆根散对血管性痴呆大鼠记忆障碍有明显的改善作用 ,可能是与其调节去甲肾上腺素的代谢 ,增强海马CA3区神经元对缺血损伤的抵抗性有关。 展开更多
关键词 珠穆根散 血管性痴呆 大鼠 记忆障碍
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人脑胶质瘤干细胞SHG-44s的克隆及初步鉴定 被引量:33
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作者 王金鹏 黄强 +4 位作者 张全斌 董军 朱玉德 王爱东 兰青 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期604-606,610,共4页
目的:探讨人脑胶质瘤体外细胞系中存在肿瘤干细胞的可能性。方法:将SHG44细胞系和SHG44-9细胞株,分别应用含血清培养基(DMEM+10%FCS)和无血清培养基(DMEM/F12,添加bFGF、LIF和EGF)培养。用CD133免疫磁珠分离干细胞、Hoechst33342和NESTI... 目的:探讨人脑胶质瘤体外细胞系中存在肿瘤干细胞的可能性。方法:将SHG44细胞系和SHG44-9细胞株,分别应用含血清培养基(DMEM+10%FCS)和无血清培养基(DMEM/F12,添加bFGF、LIF和EGF)培养。用CD133免疫磁珠分离干细胞、Hoechst33342和NESTIN流式细胞仪、Nestin、NSE、GFAP免疫细胞化学染色检测肿瘤干细胞及其分化细胞。结果:CD133磁珠分离得到的干细胞的比例:在血清组SHG44和SHG44-9分别为0.021%和0.035%;无血清组分别为1.2%和2.3%。而Hoechst33342和CD133标记后流式细胞仪检测干细胞比例:血清组中SHG44、SHG44-9分别为1.5%、0.37%;无血清组分别为16.4%和29.1%。并且这些细胞能够增殖和分化成神经元和胶质细胞。而Nestin标记后SHG44、SHG44-9中分别有51.05%、77.53%阳性细胞。结论:体外长期传代培养的人脑胶质瘤细胞系中存在肿瘤干细胞SHG44s,CD133磁珠和Hoechst33342流式细胞仪分离和检测胶质瘤干细胞是行之有效的方法,而Nestin+细胞是干细胞分化后的祖细胞或前体细胞,不能作为分离和检测干细胞特异性标记物使用。 展开更多
关键词 肿瘤干细胞 胶质瘤 流式细胞仪 免疫细胞化学
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组织芯片/免疫组化检测CDC2/CyclinB1在胶质瘤中的联合表达及意义 被引量:7
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作者 翟德忠 黄强 +3 位作者 朱卿 董军 霍红梅 兰青 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期604-607,共4页
目的:探讨CDC2/CyclinB1在胶质瘤组织芯片中的表达及意义。方法:构建布有各级别人脑胶质瘤、人脑胶质瘤体外细胞系球体及其移植瘤组织、脑肿瘤干细胞、神经干细胞和相应的对照标本共118例的组织芯片,进行CDC2、CyclinB1的EnVision法免... 目的:探讨CDC2/CyclinB1在胶质瘤组织芯片中的表达及意义。方法:构建布有各级别人脑胶质瘤、人脑胶质瘤体外细胞系球体及其移植瘤组织、脑肿瘤干细胞、神经干细胞和相应的对照标本共118例的组织芯片,进行CDC2、CyclinB1的EnVision法免疫组化染色,分析其表达率、表达强度及联合表达情况。结果:CDC2、CyclinB1表达阳性率在71例人脑胶质瘤组织中分别为54.9%和52.1%。11例正常成人脑组织中分别为18.2%和9.0%,两者比较P<0.05。CDC2和CyclinB1的联合表达率为89.7%,两者表达呈正相关(r=0.90,P<0.01)。CDC2、CyclinB1的表达在不同级别人脑胶质瘤中也有差异(P<0.05),与病理级别分别呈正相关(r=0.982,P=0.018;r=0.959,P=0.041)。在体外培养的胶质瘤细胞球体、裸鼠皮下移植瘤、人胚胎脑和裸小鼠骨髓中均高表达,而脑肿瘤干细胞和神经干细胞球体未见表达。结论:CDC2和CyclinB1,随着脑胶质瘤恶性度增高而表达量增加;在神经干细胞、脑肿瘤干细胞低表达,而在SHG44和GBM细胞球体中高表达,表明其在肿瘤细胞分化抑制中起作用。这对进一步研究胶质瘤分子病因有重要价值。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 分子病因 组织芯片 CDC2 CYCLINB1
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人源化抗CD3单链抗体在大肠杆菌中的表达
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作者 罗良生 王爱东 黄强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期303-305,共3页
关键词 单链抗体 人源化 CD3 大肠杆菌
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