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中性粒细胞CD64指数在恶性血液病伴肺部感染中的临床价值 被引量：5
1
作者 徐茵 董伟民 +4 位作者 林艳 郭嫣婷 刘佳 徐婷 顾伟英 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1601-1606,共6页
目的:探讨中性粒细胞CD64指数在恶性血液病伴肺部感染中的临床价值。方法:采用队列研究方法,回顾性分析就诊于苏州大学附属第三医院的恶性血液病伴肺部感染患者(125例)的临床资料,将患者诊疗过程划分为未发生感染阶段(T1)、出现感染症... 目的:探讨中性粒细胞CD64指数在恶性血液病伴肺部感染中的临床价值。方法:采用队列研究方法,回顾性分析就诊于苏州大学附属第三医院的恶性血液病伴肺部感染患者(125例)的临床资料,将患者诊疗过程划分为未发生感染阶段(T1)、出现感染症状并使用抗菌药物前(T2)、抗感染治疗1周后(T3)、停用抗菌药物后(T4)4个阶段,比较CD64指数、C反应蛋白(CRP)、血细胞计数和免疫细胞水平在感染发生前后(T1 vs T2)的差异,探寻CD64指数与其他指标间的相关性;观察有统计学差异的指标在病程中的变化趋势,并比较CD64指数和CRP的诊断效能;回访存活患者出院30 d内是否发生再感染,比较再感染和未再感染患者出院前(T4)各指标的复查结果,寻找再感染的危险因素。结果:患者发生感染前后,CD64指数、CRP、CD14^(+)HLA-DR^(+)、CD4^(+)和淋巴细胞计数存在明显差异(均P<0.05),CD64指数与CD14^(+)HLA-DR^(+)之间存在负相关(r=-0.395,P<0.001),与CD3^(+)之间存在负相关(r=-0.187,P=0.047),与淋巴细胞计数之间存在负相关(r=-0.230,P=0.006),与CRP之间存在正相关(r=0.313,P<0.001)。CD64指数的曲线下面积为0.790(95%CI:0.711-0.868),敏感性为59.6%,特异性为89.2%,cut-off值为0.488;CRP的曲线下面积为0.754(95%CI:0.667-0.841),敏感性为72.7%,特异性为73.0%,cut-off值为0.457;CD64指数联合CRP的曲线下面积为0.835(95%CI:0.762-0.907),敏感性为74.7%,特异性为78.4%,cut-off值为0.531。发生再感染的患者与未再感染患者在出院前的复查指标中仅有CD14^(+)HLA-DR^(+)(F=8.524,P=0.004)和CD64指数(F=9.993,P=0.002)比较存在差异。CD64指数升高为患者出院后30 d内再感染发生的独立危险因素(HR=1.790,95%CI:1.343-2.386,P<0.001)。结论:CD64指数在恶性血液病伴肺部感染的患者中具有诊断价值,其特异性高于CRP,联合使用两个指标可提高诊断敏感性。CD64指数对感染治疗结束后30 d内再感染具有预测价值。 展开更多
关键词 中性粒细胞CD64 恶性血液病 肺部感染
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两种白血病细胞抗原负载DC的体外诱导特异性CTL应答的比较 被引量：12
2
作者 盛立霞 邱国强 +3 位作者 谢晓宝 顾伟英 王志林 吴浩清 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期205-209,共5页
目的: 比较树突状细胞(DC)与白血病细胞融合及白血病细胞冻融抗原负载DC两种白血病DC疫苗诱导抗原特异性CTL应答的能力.方法: 采用羟乙基淀粉-Ficoll两步法分离外周血单个核细胞(PBMC), 通过贴壁2 h获得黏附的单核细胞, 用GM-CSF加IL- ... 目的: 比较树突状细胞(DC)与白血病细胞融合及白血病细胞冻融抗原负载DC两种白血病DC疫苗诱导抗原特异性CTL应答的能力.方法: 采用羟乙基淀粉-Ficoll两步法分离外周血单个核细胞(PBMC), 通过贴壁2 h获得黏附的单核细胞, 用GM-CSF加IL- 4诱导培养5 d收获细胞.将细胞分为4组: A组将K562细胞或原代慢性粒细胞白血病(CML)细胞在500 g/L PEG-100 mL/L DMSO诱导下与DC融合; B组加入相应细胞数量的白血病细胞冻融抗原; C组将K562细胞或CML细胞与DC共培养; D组: 单独DC培养组.融合前以红色荧光染料PKH26标记K562细胞, 采用流式细胞仪(FCM)检测PKH26/FITC-抗HLA-ABC抗体双标细胞并评估融合率.培养的第6天, 加入TNF-α诱导DC成熟, 然后分别与自体T细胞共培养, 用MTT比色法检测各组CTL对靶细胞的杀伤活性.结果: GM-CSF加IL- 4和TNF-α依次诱导成熟的DC具有经典的DC的形态和表型特征, 在PEG-DMSO的介导下, DC与白血病细胞的融合率为(17.33～29.94)%.两种抗原负载方案激活的CTL均对表达K562抗原的细胞具有特异性的细胞毒作用.在效靶比相同时, 融合组诱导CTL的杀伤活性强于冻融抗原致敏DC组.结论: 与冻融抗原致敏的DC相比, DC与白血病细胞融合细胞递呈抗原的效率更高, 体外诱导的CTL特异性杀伤靶细胞的作用更强, 有可能用于白血病的免疫治疗. 展开更多
关键词 树突状细胞 白血病细胞 细胞融合 冻融抗原 特异性CTL
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CD4^+CD25^+Treg在急性淋巴细胞白血病患者外周血中的表达及其体外实验研究 被引量：7
3
作者 李爱华 邱国强 +4 位作者 顾伟英 凌云 翁开枝 谭琪 曹祥山 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期439-442,共4页
目的初步探讨CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+ regulatory T cells,CD4+CD25+Treg)在急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)患者化疗前及化疗缓解后外周血中的表达水平,并研究患者血清能否诱导外周血CD4+CD25-T细胞转化为... 目的初步探讨CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+ regulatory T cells,CD4+CD25+Treg)在急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)患者化疗前及化疗缓解后外周血中的表达水平,并研究患者血清能否诱导外周血CD4+CD25-T细胞转化为CD4+CD25+Treg。方法①采用流式细胞术分别检测ALL初诊组、化疗完全缓解或部分缓解组及正常对照组外周血中CD4+CD25+T细胞所占比例,然后通过荧光定量RT-PCR检测各组外周血中转录因子Foxp3mRNA的表达水平,并逐层分析比较。②采集正常人外周血单个核细胞后,对照组用正常人血清,实验组用患者血清并分别设浓度梯度进行培养,72h后采用流式细胞术、荧光定量RT-PCR分别检测CD4+CD25+T细胞和Foxp3mRNA表达。结果ALL化疗缓解组CD4+CD25+T细胞及Foxp3mRNA表达水平均明显高于ALL初诊组和正常对照组(P<0.05),后两者之间CD4+CD25+T细胞水平无统计学差异(P>0.05),但ALL初诊组Foxp3mRNA含量较正常对照组明显升高(P<0.01),差异具有统计学意义;并且血清培养对照组CD4+CD25+T细胞水平及Foxp3mRNA含量均明显低于实验组(P<0.05),且其表达并不随血清浓度的增加而升高。结论CD4+CD25+Foxp3+Treg在ALL初诊组及化疗缓解组患者外周血中比例明显升高,且初步表明患者血清中的可溶性物质可诱导外周血CD4+CD25+T细胞转化为CD4+CD25+Treg,提示CD4+CD25+Treg可能是ALL免疫抑制的一个重要原因。 展开更多
关键词 急性淋巴细胞白血病 CD4^+CD25^+TREG FOXP3
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间充质干细胞对混合淋巴细胞反应体系中T淋巴细胞的免疫调节作用 被引量：7
4
作者 宣旻 邱国强 谢晓宝 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期433-435,共3页
目的:探讨间充质干细胞(MSC)在体外对T淋巴细胞免疫调节作用的特点。方法:通过Ficoll梯度密度离心法分离出正常人骨髓单个核细胞,体外培养扩增MSC,获取第3代细胞。将其按照不同的比例加入双向混合淋巴细胞培养(MLC)体系中,在第3、5天,采... 目的:探讨间充质干细胞(MSC)在体外对T淋巴细胞免疫调节作用的特点。方法:通过Ficoll梯度密度离心法分离出正常人骨髓单个核细胞,体外培养扩增MSC,获取第3代细胞。将其按照不同的比例加入双向混合淋巴细胞培养(MLC)体系中,在第3、5天,采用MTT比色法检测各组MLC中的T淋巴细胞的增殖情况,再用流式细胞术分析其与MSC共孵育前后细胞表面标记的变化情况。结果:加入了MSC的MLC体系中,MSC对T淋巴细胞的增殖抑制具有剂量依赖性,且随着时间延长,抑制程度增强;其中,CD4+T细胞亚群受抑不如CD8+T细胞亚群显著;另外,T淋巴细胞表面CD25的表达虽然较对照组有所下降,但是CD4、CD25共表达的细胞却较对照组有明显的上升趋势。T淋巴细胞表面活化抗原HLA-DR的表达较对照组有轻度减低。结论:MSC在体外能够明显抑制T淋巴细胞的增殖,其主要是针对CD8+T细胞(CTL)。另外,它还能下调活化T淋巴细胞上一些较特异的表面标记CD25和HLA-DR的表达。 展开更多
关键词 间充质干细胞(MSC) 混合淋巴细胞培养 表面标记
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多发性骨髓瘤患者外周血Th1/Th2及CD4^+CD25^+Tregs的表达分析 被引量：3
5
作者 曾美秀 邱国强 +1 位作者 韩文敏 谢晓宝 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期382-384,共3页
目的:检测多发性骨髓瘤(MM)患者外周血T辅助细胞亚群(Th1/Th2)及调节性T细胞(CD4+CD25+Tregs)数量和比例的变化,探讨其T细胞免疫功能状态及临床意义。方法:流式细胞术(FCM)检测31例MM患者及20例健康志愿者外周静脉血Th1/Th2及CD4+CD25+T... 目的:检测多发性骨髓瘤(MM)患者外周血T辅助细胞亚群(Th1/Th2)及调节性T细胞(CD4+CD25+Tregs)数量和比例的变化,探讨其T细胞免疫功能状态及临床意义。方法:流式细胞术(FCM)检测31例MM患者及20例健康志愿者外周静脉血Th1/Th2及CD4+CD25+Tregs的比例并分析比较。结果:(1)II、III期MM患者Th1细胞比例较对照组降低,III期Th2细胞比例较对照组及I期降低,差异具有显著性;II、III期MM患者CD4+CD25+、CD4+CD25high、CD4+CD25highCD127low细胞比例均高于正常组,III期CD4+CD25high、CD4+CD25highCD127low较I期增高,差异具有显著性。(2)化疗后复发组MM患者Th1细胞比例较对照组降低,初诊组及化疗后复发组Th2细胞比例较对照组及稳定期组降低,差异具有显著性;初诊组及化疗后复发组CD4+CD25+、CD4+CD25high、CD4+CD25highCD127low细胞比例均高于正常组,复发组CD4+CD25+、CD4+CD25high、CD4+CD25highCD127low明显高于稳定组及初诊组,差异具有显著性。(3)相关性分析Th1、Th2细胞与CD4+CD25+Tregs存在不同程度的负相关(均P<0.05或0.01)。结论:MM患者外周血Th1、Th2细胞比例降低,调节性T细胞比例增高,两者相互调节,并与疾病临床分期、病情进展相关,对指导治疗也有一定的价值。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 流式细胞术 TH亚群 CD4+CD25+调节性T细胞
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多发性骨髓瘤患者外周血CD4^+ CD25^+和CD8^+ CD28^-调节性T细胞研究 被引量：2
6
作者 贾丽 谢晓宝 +3 位作者 邱国强 钱新瑜 周民 肖溶 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1033-1037,共5页
目的:探讨CD4+CD25+和CD8+CD28-调节性T细胞(Tregs)在多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中的变化及意义。方法:采用流式细胞术检测38例MM患者及20例健康对照外周血CD4+CD25+和CD8+CD28-Tregs水平。分别采用溴甲酚绿法、透射免疫比浊法测定患... 目的:探讨CD4+CD25+和CD8+CD28-调节性T细胞(Tregs)在多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中的变化及意义。方法:采用流式细胞术检测38例MM患者及20例健康对照外周血CD4+CD25+和CD8+CD28-Tregs水平。分别采用溴甲酚绿法、透射免疫比浊法测定患者血清白蛋白(Alb)、β2-微球蛋白(β2-MG)。结果:初诊MM患者外周血CD4+CD25+/high、CD4+CD25highCD127low及CD8+CD28-Tregs比率均明显升高;CD4+CD25+/high和CD4+CD25highCD127lowTregs比率在各临床分期均较对照组升高,随分期增高呈现增加趋势,且CD4+CD25high和CD4+CD25highCD127lowTregs在Ⅲ期患者显著高于Ⅰ期患者;CD8+CD28-Tregs在Ⅱ、Ⅲ期显著高于正常对照,且Ⅱ期高于Ⅰ期,Ⅲ期高于Ⅱ期,逐期递增,而在Ⅰ期与对照组比较无显著差异;CD4+CD25+/high和CD4+CD25highCD127lowTregs比率在进展期和稳定期均较对照组升高,但两期之间比较无明显差异,而CD8+CD28-Tregs在进展期高于稳定期及对照组,稳定期和对照组间比较无明显差异;CD4+CD25highTregs和CD4+CD25highCD127lowTregs比率与Alb水平均呈负相关。结论:MM患者体内存在CD4+CD25+Tregs和CD8+CD28-Tregs异常增加,可能是MM免疫逃逸的一个重要机制,这些变化同临床分期、病情进展及预后存在一定程度相关性。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 CD4+ CD25+调节性T细胞 CD8+ CD28-调节性T细胞
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一例AML-M2患者初发和缓解期转录组测序SNV结果比较分析 被引量：2
7
作者 高攀科 曹祥山 刘琰 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期666-670,共5页
本研究旨在进一步阐明急性髓系白血病的发病机制,筛选新的肿瘤特异性突变。利用高通量测序的方法对1例初诊的部分分化型急性髓系白血病(AML-M2)患者发病期及缓解期外周血样本进行转录组测序,通过对初诊时和缓解后表达基因的比较,筛选可... 本研究旨在进一步阐明急性髓系白血病的发病机制,筛选新的肿瘤特异性突变。利用高通量测序的方法对1例初诊的部分分化型急性髓系白血病(AML-M2)患者发病期及缓解期外周血样本进行转录组测序,通过对初诊时和缓解后表达基因的比较,筛选可能与白血病发生相关的单核苷酸变异(SNV)。结果表明:Reads在基因上分布均匀,覆盖完整,检测到大部分基因的表达。通过对SNV的筛选,共检测到29881个基因突变,包括28113个种系突变和752个体突变,其中编码区获得性突变11个(P<0.05),包括ZRSR1、MLXIP、TLN1、LAP3、HK3。结论:高通量测序作为一种无偏的检测基因突变的新方法,可以发现肿瘤相关新突变。MLXIP可能是AML M2新的分子标志物。 展开更多
关键词 高通量测序 单核苷酸变异 急性髓系白血病 AML—M2 转录组测序技术
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MiR-10a在急性髓系白血病不同FAB亚型中的表达及与耐药关系的研究 被引量：3
8
作者 支勇金 支枫 +10 位作者 王榕 薛莲 顾伟英 王彪 董伟民 李海乾 凌云 邱国强 王志林 曹祥山 刘琰 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期29-33,共5页
目的:探讨miR-10a在FAB不同亚型急性髓系白血病(AML)中的表达及其与AML耐药性的关系。方法:应用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测miR-10a在急性髓系白血病细胞株HL-60、U937、HL-60/ADR(阿霉素耐药株)、40例初治AML患者及16例非恶... 目的:探讨miR-10a在FAB不同亚型急性髓系白血病(AML)中的表达及其与AML耐药性的关系。方法:应用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测miR-10a在急性髓系白血病细胞株HL-60、U937、HL-60/ADR(阿霉素耐药株)、40例初治AML患者及16例非恶性血液病患者骨髓细胞中的表达,并分析其与AML临床特征的相关关系。结果:miR-10a在HL-60细胞株中的表达高于U937细胞株中的表达(P<0.05),在初治AML患者中的表达高于非恶性血液病组中的表达(P<0.01),在AML M3型患者中的表达高于M1、M2、M4型中的表达(P<0.05),在HL-60/ADR耐药株中的表达明显高于敏感株HL-60中的表达(P<0.01);除M3型外,经一疗程标准方案诱导化疗后未完全缓解组的miR-10a表达高于完全缓解组中的表达(P<0.01)。结论:miR-10a的高表达可能与早幼粒细胞的过度增生有关,并且与非M3型的急性髓系白血病细胞的耐药密切相关。 展开更多
关键词 miRNA-10a 白血病 髓系 急性 耐药
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细胞因子诱导K562/MDR1分化为具有多药耐药特征的树突状细胞的实验研究 被引量：1
9
作者 盛立霞 谢晓宝 +3 位作者 欧阳桂芳 王怡 朱慧玲 黄河 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期489-494,共6页
目的:研究多药耐药基因1(multidrug resistance gene1,MDR1)转染的K562细胞是否能够在细胞因子诱导下向树突状细胞(DC)诱导分化,获得多药耐药特性的K562来源的DC。方法:将K562/MDR1和K562细胞分别用GM-CSF+IL-4诱导培养DC,并以TNF-α促... 目的:研究多药耐药基因1(multidrug resistance gene1,MDR1)转染的K562细胞是否能够在细胞因子诱导下向树突状细胞(DC)诱导分化,获得多药耐药特性的K562来源的DC。方法:将K562/MDR1和K562细胞分别用GM-CSF+IL-4诱导培养DC,并以TNF-α促进DC成熟,于第14天收获细胞K562/MDR1-DC及K562-DC。通过流式细胞仪(FCM)检测细胞分化前后的CD1a、CD83、CD80、CD86、HLA-ABC和HLA-DR的表达;异基因混合淋巴细胞反应(Allo-MLR)检测其抗原递呈功能;流式细胞仪检测Pgp的表达及细胞内柔红霉素(DNR)的蓄积浓度;MTT法测定K562/MDR1-DC及K562-DC对化疗药物长春新碱(VCR)、阿霉素(ADM)的IC50。结果:K562/MDR1和K562细胞均能在适当细胞因子组合下分化为具有DC形态特征和表型特征的K562/MDR1-DC及K562-DC,K562/MDR1-DC在Allo-MLR反应中显示出比K562-DC更强的抗原递呈功能。与K562-DC相比,K562/MDR1-DC具有膜Pgp分子的高表达和对胞内DNR的外排作用,对化疗药物VCR、ADM有较高的IC50。结论:转染MDR1基因不影响K562向树突状细胞分化的能力;并且K562/MDR1-DC具有Pgp的高表达,获得多药耐药特征。 展开更多
关键词 树突细胞 细胞因子类 P糖蛋白 K562细胞 柔红霉素/药理学 基因 转染
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