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人-鼠嵌合抗血小板单抗SZ-2 Fab片段基因的构建和表达研究
被引量：
1
1
作者
祝怀平
江淼
+1 位作者
戴克胜
阮长耿
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期71-73,79,共4页
目的:降低鼠源性抗血小板单克隆抗体SZ-2的免疫原性,为其进一步研究、应用奠定基础。方法:用Trizol试剂从SZ-2杂交瘤细胞抽提RNA,应用RT-PCR技术,扩增出SZ-2重链、轻链可变区基因,克隆人载体pUCm-T,测序分析。应用基因重组技术,将SZ-2...
目的:降低鼠源性抗血小板单克隆抗体SZ-2的免疫原性,为其进一步研究、应用奠定基础。方法:用Trizol试剂从SZ-2杂交瘤细胞抽提RNA,应用RT-PCR技术,扩增出SZ-2重链、轻链可变区基因,克隆人载体pUCm-T,测序分析。应用基因重组技术,将SZ-2轻、重链可变区基因与人免疫球蛋白γ1重链CH1和κ轻链恒区基因进行拼接,构建人-鼠嵌合Fab片段基 因表达质粒pSW1-2 Fab/Hu,并导入大肠杆菌XL1-blue诱导表达。以ELISA、Western blot和瑞斯托霉素诱导血小板聚集抑制试验,对表达产物进行检测、验证。结果:克隆的基因序列符合小鼠轻、重链可变区基因的特征;表达质粒pSW1-2Fab/Hu拼接正确;在大肠肝菌中的表达量约为180μg/L;表达产物具有与血小板GPIb结合的特性并可抑制瑞斯托霉素诱导血小板聚集。结论:成功地克隆了SZ-2可变区基因;并表达了可溶性人-鼠嵌合Fab基因工程抗体。
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关键词
嵌合抗体
单克隆抗体
可变区基因
血小板
基因表达
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职称材料
抗血小板膜糖蛋白单抗SZ-21嵌合Fab片段基因的构建和表达研究
2
作者
安广宇
董宁征
+1 位作者
白霞
阮长耿
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第3期274-276,共3页
目的为降低抗血小板膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21的免疫原性,克隆了SZ-21可变区基因,构建并表达人-鼠嵌合Fab基因工程抗体。方法利用基因克隆技术,从杂交瘤细胞系SZ-21克隆出轻、重链可变区基因,然后亚克隆到质粒pSW1中,构建成人-鼠嵌合Fab...
目的为降低抗血小板膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21的免疫原性,克隆了SZ-21可变区基因,构建并表达人-鼠嵌合Fab基因工程抗体。方法利用基因克隆技术,从杂交瘤细胞系SZ-21克隆出轻、重链可变区基因,然后亚克隆到质粒pSW1中,构建成人-鼠嵌合Fab片段基因质粒pSZ-21,在大肠杆菌中表达。结果pSZ-21基因构建正确,在大肠杆菌中表达出可溶性抗体片段,表达产物具有与血小板结合的活性。结论成功地克隆了SZ-21可变区基因,并表达了可溶性人-鼠嵌合Fab基因工程抗体。
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关键词
抗血小板膜糖蛋白
单克隆抗体
SZ-21可变区基因
构建
克隆
原核表达
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职称材料
题名
人-鼠嵌合抗血小板单抗SZ-2 Fab片段基因的构建和表达研究
被引量：
1
1
作者
祝怀平
江淼
戴克胜
阮长耿
机构
苏州大学附属第一医院血栓室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期71-73,79,共4页
文摘
目的:降低鼠源性抗血小板单克隆抗体SZ-2的免疫原性,为其进一步研究、应用奠定基础。方法:用Trizol试剂从SZ-2杂交瘤细胞抽提RNA,应用RT-PCR技术,扩增出SZ-2重链、轻链可变区基因,克隆人载体pUCm-T,测序分析。应用基因重组技术,将SZ-2轻、重链可变区基因与人免疫球蛋白γ1重链CH1和κ轻链恒区基因进行拼接,构建人-鼠嵌合Fab片段基 因表达质粒pSW1-2 Fab/Hu,并导入大肠杆菌XL1-blue诱导表达。以ELISA、Western blot和瑞斯托霉素诱导血小板聚集抑制试验,对表达产物进行检测、验证。结果:克隆的基因序列符合小鼠轻、重链可变区基因的特征;表达质粒pSW1-2Fab/Hu拼接正确;在大肠肝菌中的表达量约为180μg/L;表达产物具有与血小板GPIb结合的特性并可抑制瑞斯托霉素诱导血小板聚集。结论:成功地克隆了SZ-2可变区基因;并表达了可溶性人-鼠嵌合Fab基因工程抗体。
关键词
嵌合抗体
单克隆抗体
可变区基因
血小板
基因表达
Keywords
monoclonal antibody
chimeric Fab fragment
variable region genes
platelet
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
抗血小板膜糖蛋白单抗SZ-21嵌合Fab片段基因的构建和表达研究
2
作者
安广宇
董宁征
白霞
阮长耿
机构
苏州大学附属第一医院血栓室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第3期274-276,共3页
文摘
目的为降低抗血小板膜糖蛋白单克隆抗体SZ-21的免疫原性,克隆了SZ-21可变区基因,构建并表达人-鼠嵌合Fab基因工程抗体。方法利用基因克隆技术,从杂交瘤细胞系SZ-21克隆出轻、重链可变区基因,然后亚克隆到质粒pSW1中,构建成人-鼠嵌合Fab片段基因质粒pSZ-21,在大肠杆菌中表达。结果pSZ-21基因构建正确,在大肠杆菌中表达出可溶性抗体片段,表达产物具有与血小板结合的活性。结论成功地克隆了SZ-21可变区基因,并表达了可溶性人-鼠嵌合Fab基因工程抗体。
关键词
抗血小板膜糖蛋白
单克隆抗体
SZ-21可变区基因
构建
克隆
原核表达
Keywords
platelet
monoclonal antibody
variable region genes
cloning
prokaryotic expression
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人-鼠嵌合抗血小板单抗SZ-2 Fab片段基因的构建和表达研究
祝怀平
江淼
戴克胜
阮长耿
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
抗血小板膜糖蛋白单抗SZ-21嵌合Fab片段基因的构建和表达研究
安广宇
董宁征
白霞
阮长耿
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2001
0
在线阅读
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职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
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