分子鉴别诊断(MDD)技术在呼吸道病原体检测中的应用 被引量：10

1

作者 韩卫宁 张正姬 +5 位作者 雅雪蓉 季伟 衡伟 夏瑜 许元根 史智扬 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1146-1148,1151,共4页

目的:以靶序列富集多重PCR(Tem-PCR)和液相芯片(xMAP)检测技术结合,建立常见呼吸道病原体的分子鉴别诊断(MDD)平台,对其可靠性进行评估,并用于临床样品的检测。方法:采集苏州大学附属儿童医院呼吸科住院病例呼吸道灌洗液样品22例和苏州... 目的:以靶序列富集多重PCR(Tem-PCR)和液相芯片(xMAP)检测技术结合,建立常见呼吸道病原体的分子鉴别诊断(MDD)平台,对其可靠性进行评估,并用于临床样品的检测。方法:采集苏州大学附属儿童医院呼吸科住院病例呼吸道灌洗液样品22例和苏州大学附属第一医院呼吸内科门诊病例咽拭子样品20例,使用Tem-PCR技术对样品的核酸进行多重扩增,以液相芯片技术进行高通量的多重检测。结果:对已知样品的检测表明该平台具有高度的特异性和敏感性。对42例临床样品进行检测的结果显示,22例呼吸道灌洗液的阳性检出率为63.6%。呼吸道灌洗液阳性检出率高于门诊病例咽拭子样品的阳性检出率,RNA病原体(以病毒为主)的阳性率高于DNA病原体(以细菌为主)的阳性率。结论:建立了呼吸道病原体的MDD平台,具备了对呼吸道传染性疾病的高通量快速诊断能力。 展开更多

关键词 tem-PCR xMAP 分子鉴别诊断(MDD)

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肺癌中PD-L1表达和调节性T细胞浸润的关系及意义 被引量：18

2

作者 沈吟芳 穆传勇 +3 位作者 陈延斌 郭凌川 朱晔涵 黄建安 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期418-421,425,共5页

目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中程序性死亡受体配体1(programmed death receptor ligand1,PD-L1)表达和调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)浸润的关系及临床意义。方法采用免疫组化法检测78例NSCLC组织中P... 目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中程序性死亡受体配体1(programmed death receptor ligand1,PD-L1)表达和调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)浸润的关系及临床意义。方法采用免疫组化法检测78例NSCLC组织中PD-L1表达和Treg浸润情况,分析二者之间的相关性及与NSCLC临床病理特征的关系。结果肺癌组织中PD-L1的表达显著高于癌旁组织(52.5%vs 6.4%),肺癌组织中Treg浸润亦明显高于癌旁组织[(18.63±16.67)个/HPF vs(2.96±2.97)个/HPF]。晚期肺癌组织中PD-L1的表达高于早期肺癌组织(70.0%vs 41.7%),晚期肺癌组织中Treg浸润亦明显高于早期肺癌组织(73.3%vs 35.4%),有淋巴结转移组中PD-L1表达和Treg浸润均明显高于无淋巴结转移组,PD-L1表达和Treg浸润程度与淋巴结转移及临床分期相关(P<0.05)。肺癌组织中PD-L1表达和Foxp3+Treg的浸润密度呈正相关(rs=0.611,F=78.82,P=0.023)。结论肺癌微环境中PD-L1表达和Treg浸润呈正相关,二者可能共同参与肺癌的进展和免疫逃逸。 展开更多

关键词 肺肿瘤 程序性死亡受体配体1 调节性T细胞 免疫逃逸

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肺癌恶性胸腔积液中树突状细胞的诱导及生物学特性 被引量：5

3

作者 闫廷赞 黄建安 +2 位作者 朱一蓓 黄勇 张学光 《中国肺癌杂志》 CAS 2007年第1期58-60,共3页

关键词 恶性胸腔积液 树突状细胞 生物学特性 肺癌 免疫活性细胞 恶性肿瘤 免疫治疗 发病率

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复方三七饮对博莱霉素致大鼠肺纤维化TGF-β1/Smads信号通路的影响 被引量：10

4

作者 吴娟娟 凌春华 +3 位作者 何焕荣 孙钢 顾振纶 嵇冰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期927-930,共4页

目的探讨复方三七饮(CPNG)对博莱霉素(BLM)致大鼠肺纤维化的干预作用及其机制。方法雄性SD大鼠60只,随机分为6组:正常组、模型组、醋酸泼尼松组、CPNG大、中、小剂量组[CPNG(H、M、L)],每组10只。经气管内注入BLM(5 mg/kg)制备大鼠肺纤... 目的探讨复方三七饮(CPNG)对博莱霉素(BLM)致大鼠肺纤维化的干预作用及其机制。方法雄性SD大鼠60只,随机分为6组:正常组、模型组、醋酸泼尼松组、CPNG大、中、小剂量组[CPNG(H、M、L)],每组10只。经气管内注入BLM(5 mg/kg)制备大鼠肺纤维化模型。造模第2天,治疗组分别灌服醋酸泼尼松3.33 mg/(kg·d)、CPNG大、中、小剂量(100、50、25)mg/(kg·d),正常组和模型组大鼠灌服等体积的蒸馏水,1次/d。28 d后处死大鼠,HE染色和Masson染色进行肺组织病理学观察;碱水法测定肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量;Western blot法检测TGF-β1、Smad2、Smad7蛋白的表达水平。结果与模型组大鼠比较,肺组织的病理组织学HE和Masson染色显示CPNG能明显减轻大鼠肺泡炎和肺纤维化程度(P<0.01);CPNG各剂量组大鼠肺组织中HYP降低(P<0.01);CPNG各剂量组TGF-β1、Smad2蛋白的表达水平降低(P<0.01),Smad7蛋白表达水平升高(P<0.01)。结论复方三七饮对博莱霉素致大鼠肺纤维化具有一定的防治作用,可能与调节TGF-β1/Smads信号通路有关。 展开更多

关键词 复方三七饮 博莱霉素 肺纤维化 TGF-Β1 SMADS信号通路

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PD-L1分子在肺癌细胞株上的表达及其生物学意义 被引量：8

5

作者 陈成 穆传勇 +4 位作者 瞿秋霞 朱一蓓 孙静 张学光 黄建安 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第8期859-863,共5页

背景与目的目前研究表明,多种人类肿瘤大量表达的PD-L1分子参与了肿瘤免疫逃逸,其机制主要在于肿瘤细胞通过高表达PD-L1分子,与T细胞上的受体PD-1的结合,传递负性调控信号,导致肿瘤抗原特异性T细胞的凋亡和免疫无能。本文着重探讨PD-L1... 背景与目的目前研究表明,多种人类肿瘤大量表达的PD-L1分子参与了肿瘤免疫逃逸,其机制主要在于肿瘤细胞通过高表达PD-L1分子,与T细胞上的受体PD-1的结合,传递负性调控信号,导致肿瘤抗原特异性T细胞的凋亡和免疫无能。本文着重探讨PD-L1分子在肺癌细胞株上的表达及其对T细胞杀伤效应的调节作用。方法采用常规方法从健康人外周血单个核细胞诱导DCs,并经凋亡肿瘤细胞和激发型CD40单克隆抗体刺激获得成熟DCs,与自体T细胞共育后获得肿瘤特异性CTL细胞;流式细胞术检测肺癌细胞上PD-L1分子的表达;JAM法和单抗阻断实验分析CTL细胞对肺癌细胞株的杀伤效应,ELISA法检测细胞培养上清中IFN-γ的含量。结果经凋亡肿瘤细胞负载的成熟DCs可诱导自体T细胞分化为肿瘤特异性CTL;H1299高表达PD-L1分子(90.3±4.2)%,而A549低表达PD-L1分子(19.4±5.2)%;CTL对A549具有高效特异的杀伤力,而对H1299不能高效杀伤;联合应用PD-L1单抗可促进CTL对H1299的杀伤作用和IFN-γ的分泌(P<0.05)。结论在肺癌细胞株上表达的PD-L1分子,可降低CTL对肺癌细胞的杀伤效应。 展开更多

关键词 细胞毒T细胞 肺肿瘤 PD-L1

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腺病毒介导的ING4基因对人肺腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其分子机制 被引量：4

6

作者 黄锦宏 杨吉成 +3 位作者 凌春华 赵大国 谢宇锋 由振华 《中国肺癌杂志》 CAS 北大核心 2014年第2期142-147,共6页

背景与目的肿瘤生长抑制因子4(inhibitor of growth 4,ING4)基因是一种重要的肿瘤抑制因子,研究发现ING4基因对多种肿瘤细胞具有抑癌作用。本研究旨在探讨ING4基因对人肺腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其潜在的作用机制。方法采用SPC-A... 背景与目的肿瘤生长抑制因子4(inhibitor of growth 4,ING4)基因是一种重要的肿瘤抑制因子,研究发现ING4基因对多种肿瘤细胞具有抑癌作用。本研究旨在探讨ING4基因对人肺腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用及其潜在的作用机制。方法采用SPC-A1细胞株建立肺腺癌裸鼠移植瘤模型,15只荷瘤裸鼠随机等分为PBS组、腺病毒组(Ad-GFP组)、腺病毒介导的ING4组(Ad-ING4组),上述各组进行局部干预用药,动态测量肿瘤体积,治疗结束后摘取瘤体称重并计算瘤重抑瘤率;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测瘤体内细胞凋亡情况,免疫组织化学SP法检测天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、环氧化酶-2(COX-2)、Fas与FasL的表达。结果 Ad-ING4组的肿瘤体积、瘤重均呈现明显下降,与Ad-GFP组抑瘤率(1.31%±0.31%)比较,差异有统计学意义(P<0.05),其抑瘤率为(33.17%±5.24%);Ad-ING4组的凋亡指数为(69.23%±6.53%),与PBS组(17.04%±1.10%)、Ad-GFP组(18.81%±1.93%)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。SP法检测结果显示,Ad-ING4可明显上调Caspase-3、Fas与FasL表达,下调COX-2表达。结论 ING4具有抑制肺腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用,该作用机制可能与诱导肿瘤细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 生长抑制因子4 肺肿瘤 移植瘤

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微血栓形成对非小细胞肺癌患者术后的影响 被引量：1

7

作者 张秀芹 蔡礼鸣 黄建安 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期401-403,共3页

目的 ：探讨微小血栓形成对非小细胞肺癌手术预后的影响。方法 ：对60例肺癌手术标本进行HE染色观察肺细小动脉内微小血栓形成,计数微血栓形成的血管数目,分析微血栓形成与肺癌术后预后的关系。结果：60例肺癌手术患者中,35例发现微小... 目的 ：探讨微小血栓形成对非小细胞肺癌手术预后的影响。方法 ：对60例肺癌手术标本进行HE染色观察肺细小动脉内微小血栓形成,计数微血栓形成的血管数目,分析微血栓形成与肺癌术后预后的关系。结果：60例肺癌手术患者中,35例发现微小血栓形成,其中腺癌28例,低分化癌29例;Ⅰ期2例,Ⅱ期18例,Ⅲ期15例,Ⅰ-Ⅲ期肺癌中有微小血栓形成的血管根数具有显著差异（P〈0.05）;微血栓在腺癌及低分化癌中明显,与淋巴结转移、TNM分期及5年生存时间有关（P〈0.05）。结论：肺癌手术患者存在微小血栓,微小血栓的形成不利于肺癌术后的预后。 展开更多

关键词 肺癌 微小血栓 预后

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慢病毒介导EGFL7沉默对肺癌A549细胞体外生物学行为的影响

8

作者 沈笑春 黄建安 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期667-672,共6页

目的:通过慢病毒介导沉默表皮生长因子样结构域7基因(epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7)在肺癌A549细胞的表达,探讨EGFL7对A549细胞的增殖、凋亡、侵袭和血管生成的影响。方法:利用慢病毒介导靶向EGFL7的shRNA(LV-RNAi)转染... 目的:通过慢病毒介导沉默表皮生长因子样结构域7基因(epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7)在肺癌A549细胞的表达,探讨EGFL7对A549细胞的增殖、凋亡、侵袭和血管生成的影响。方法:利用慢病毒介导靶向EGFL7的shRNA(LV-RNAi)转染A549细胞,实验分三组:LV-RNAi组(转染LV-RNAi),LV-NC组(转染空病毒)和对照组(A549细胞)。Real-time PCR和Western blotting分别检测LV-RNAi感染对A549细胞EGFL7 mRNA和蛋白水平表达的影响,MTT法和流式细胞术分别检测沉默EGFL7对A549细胞增殖和凋亡的影响,Transwell侵袭实验和鸡胚绒毛尿囊膜(chick embryo chorioallantoic membrane,CAM)实验分别检测沉默EGFL7对A549细胞侵袭和血管生成能力的影响。结果:慢病毒稳定高效地转染A549细胞,LV-RNAi组细胞内EGFL7 mRNA[(0.18±0.03)vs(0.98±0.05)、(1.03±0.09),P<0.05]和蛋白表达较LVNC组和对照组显著降低。与LV-NC组及对照组相比,沉默EGFL7对LV-RNAi组A549细胞的增殖活力[感染120 h时:(0.73±0.22)vs(0.79±0.08)vs(0.81±0.11),P>0.05]与和凋亡率[感染120 h时:(1.92%±0.06)vs(2.11%±0.07)vs(1.85%±0.13),P>0.05]均无显著影响;同时,LV-RNAi组A549细胞侵袭入下室细胞数[(61.7±14.5)vs(272.8±21.5)、(286.6±40.0)/mm2,P<0.05]与血管生成指数[(31.7±4.1)vs(96.3±4.4)、(103.3±6.5),P<0.05]均显著减少。结论:沉默EGFL基因能够抑制A549细胞侵袭和血管生成能力,但不影响其增殖与凋亡。 展开更多

关键词 EGFL7 肺癌 血管生成 侵袭 RNA干扰

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1例ALK阳性肺肉瘤样癌报道 被引量：4

9

作者 缪晔红 凌琳 +1 位作者 张秀琴 黄建安 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期366-370,共5页

肺肉瘤样癌（pulmonary sarcomatoid carcinoma,PSC）是一类罕见的含有肉瘤形态细胞或肉瘤样分化的非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）,在所有肺癌中所占比例为0.1%-0.4%。PSC恶性程度高,预后差,平均生存期仅13.3个月,... 肺肉瘤样癌（pulmonary sarcomatoid carcinoma,PSC）是一类罕见的含有肉瘤形态细胞或肉瘤样分化的非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）,在所有肺癌中所占比例为0.1%-0.4%。PSC恶性程度高,预后差,平均生存期仅13.3个月,低于其他类型NSCLC。PSC对放化疗不敏感,首选治疗方法为手术治疗,但多数患者发现时已处于疾病晚期，失去手术指征，且术后复发率较高，故治疗存在一定难度。 展开更多

关键词 肺肉瘤样癌 ALK 非小细胞肺癌 肉瘤样 平均生存期 预后差 恶性程度 学术期刊评价 靶向药物 气管镜

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Endoglin在非小细胞肺癌中的表达及临床意义 被引量：2

10

作者 李蒙蒙 陆沈栋 +3 位作者 刘欣欣 赵军 张洪涛 凌春华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期581-584,共4页

目的研究不同转移潜能非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系中以及癌与癌旁组织中endoglin(ENG)的表达情况,探讨ENG在NSCLC的发生发展和转移复发中的作用。方法体外培养5株NSCLC细胞及1株正常支气管上皮细胞(HBE),随机选取22例NSCLC手术切除后癌... 目的研究不同转移潜能非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系中以及癌与癌旁组织中endoglin(ENG)的表达情况,探讨ENG在NSCLC的发生发展和转移复发中的作用。方法体外培养5株NSCLC细胞及1株正常支气管上皮细胞(HBE),随机选取22例NSCLC手术切除后癌与癌旁组织样本,分别采用real time PCR及Western blot法检测其中ENG mRNA和蛋白表达情况。采用χ2检验分析ENG的表达和临床资料之间的相关性。结果高转移性3株肺癌细胞系中ENG mRNA和蛋白表达显著升高,而正常细胞株及低转移性2株肺癌细胞中ENG表达缺失。22例肺癌样本中,其中19例癌组织中ENG mRNA和蛋白呈阳性表达(86.36%),且表达量明显高于相对应的癌旁组织(P<0.01)。ENG表达与患者临床病理特征年龄、性别、肿瘤大小、临床分期、病理分级、组织类型等均无关,而与患者淋巴结转移情况密切相关(P<0.01)。结论 ENG在NSCLC中的表达与淋巴结转移显著相关,有可能作为预测NSCLC转移及预后的分子标志。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 ENDOGLIN 转移

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EML4-ALK融合基因阳性肺腺癌合并淋巴瘤1例并文献复习 被引量：1

11

作者 刘丽 衡伟 《中国肺癌杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期89-91,共3页

近年来随着分子生物学研究的不断深入,靶向治疗成为当前肺癌治疗的趋势。目前肺癌个体化的最佳治疗效果日益受到重视,棘皮动物微管相关蛋白4-间变型淋巴瘤激酶(echinoderm microtubule associated protein like4 anaplastic lymphoma ki... 近年来随着分子生物学研究的不断深入,靶向治疗成为当前肺癌治疗的趋势。目前肺癌个体化的最佳治疗效果日益受到重视,棘皮动物微管相关蛋白4-间变型淋巴瘤激酶(echinoderm microtubule associated protein like4 anaplastic lymphoma kinase,EML4-ALK)融合基因作为新兴生物标记物是当前肺癌治疗领域研究热点。与此同时,随着抗肿瘤治疗水平的不断提高,生存期明显延长,发生多原发癌(multiple primary carcinomas,MPC)的机会增多。EML4-ALK融合基因阳性的肺腺癌合并淋巴瘤发生于同一患者文献报道罕见。本文报道1例ALK融合基因阳性的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)合并淋巴瘤病例,同时对异时性肺癌合并淋巴瘤的文献进行复习。 展开更多

关键词 肺肿瘤 淋巴瘤 治疗 第二原发癌 间变性淋巴瘤激酶

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