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PD-L1分子在肺癌细胞株上的表达及其生物学意义被引量：8: 1; 作者陈成穆传勇 +4 位作者瞿秋霞朱一蓓孙静张学光黄建安《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第8期859-863,共5页; 背景与目的目前研究表明,多种人类肿瘤大量表达的PD-L1分子参与了肿瘤免疫逃逸,其机制主要在于肿瘤细胞通过高表达PD-L1分子,与T细胞上的受体PD-1的结合,传递负性调控信号,导致肿瘤抗原特异性T细胞的凋亡和免疫无能。本文着重探讨PD-L1... 展开更多; 关键词细胞毒T细胞肺肿瘤 PD-L1; 在线阅读下载PDF 职称材料

可溶性B7-H3在早期预测急性胰腺炎严重程度中的临床意义被引量：6: 2; 作者黄坚张光波 +3 位作者何广胜沈佳庆孔小明沈月平《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第22期3569-3572,共4页; 目的:探讨s B7-H3(可溶性B7-H3)对早期判断急性胰腺炎(AP)严重程度的临床价值。方法:选择AP患者75例(轻度MAP 30例、中度MSAP 20例、重度SAP 25例),对照组为健康(HC)组20例,采用双抗体夹心ELISA法测腹痛开始24 h血浆s B7-H3值,评价与胰... 展开更多; 关键词急性胰腺炎血清学检测 sB7-H3; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组hIL-17F原核蛋白表达和生物学活性初步研究被引量：2: 3; 作者刘高勤吴鸿雅 +3 位作者李龙标马珍妮陆培荣张学光《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期263-265,269,共4页; 目的:研制hIL-17F/His重组蛋白并初步研究其体外生物学活性。方法:RT-PCR法克隆得到hIL-17F基因序列。将测序正确的hIL-17F基因片段装入PQE3.0原核表达载体构建重组载体hIL-17F/PQE3.0。将该重组载体导入宿主菌M15,经异丙基B-D硫代半乳... 展开更多; 关键词 IL-17F 原核表达复性纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

一株识别肿瘤细胞上CD40突变体分子的单克隆抗体的研制及其生物学功能研究被引量：1: 4; 作者郑舒丹马泓冰 +4 位作者高超汪家敏孙静罗先富张学光《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期910-913,共4页; 目的:以本科室发现肿瘤细胞上表达的CD4078AA突变为基础,研制识别肿瘤细胞上CD40突变体分子的单克隆抗体(mAb),并对其生物学特性作初步分析。方法:以转人CD40突变体转基因细胞L929-CD40mu为免疫原,免疫6～8周龄的雌性BALB/c小鼠;采用B... 展开更多; 关键词 CD40 杂交瘤单克隆抗体突变体肿瘤细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

一株鼠抗人4-1BBL功能性单克隆抗体的研制及其生物学特性的研究: 5; 作者王旭东周斌 +3 位作者李文香於葛华张光波张学光《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期439-442,451,共5页; 目的:鼠抗人4-1BBL功能性单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定。方法:以高表达人4-1BBL分子的基因转染细胞L929/4-1BBL为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴瘤杂交瘤技术进行细胞融合,经流式细胞术分析和多次克隆化培养,筛选特异性... 展开更多; 关键词 4-1BBL 单克隆抗体共刺激信号杂交瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

pCEP4/hIL-17真核表达载体的构建及表达被引量：1: 6; 作者刘高勤吴鸿雅 +3 位作者居颂光李龙标陆培荣张学光《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1564-1568,共5页; 目的构建pCEP4/hIL-17载体及在真核细胞中表达hIL-17/mFc融合蛋白;初步研究IL-17生物学特性。方法采用RT-PCR的方法克隆hIL-17CDS段基因序列;将测序正确的hIL-17序列插入pCEP4质粒构建pCEP4/IL-17真核表达载体,转染中华仓鼠卵巢(CHO)细... 展开更多; 关键词人白细胞介素-17 真核表达 CHO细胞融合蛋白基因克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗人CD154人-鼠嵌合抗体Fab段的构建和表达: 7; 作者葛彦陈永井 +1 位作者瞿秋霞张学光《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期569-571,共3页; 目的:通过基因工程技术构建和表达抗人CD154人-鼠嵌合抗体Fab段。方法:从分泌鼠抗人CD154单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株4F1中提取总RNA,分别采用特异性引物扩增mAb VH和VL的DNA编码区基因。同时,从人脾脏细胞中克隆出免疫球蛋白恒定区... 展开更多; 关键词单克隆抗体 CD154 FAB; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名PD-L1分子在肺癌细胞株上的表达及其生物学意义被引量：8: 1; 作者陈成穆传勇瞿秋霞朱一蓓孙静张学光黄建安; 机构苏州大学附属第一医院呼吸内科苏州大学附属第一医院临床免疫学实验室苏州大学医学生物技术研究所; 出处《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第8期859-863,共5页; 基金国家自然科学基金(No.30770947) 江苏省卫生厅项目(No.H200712) 江苏省医学重点人才基金(No.RC2007075)资助~~; 文摘背景与目的目前研究表明,多种人类肿瘤大量表达的PD-L1分子参与了肿瘤免疫逃逸,其机制主要在于肿瘤细胞通过高表达PD-L1分子,与T细胞上的受体PD-1的结合,传递负性调控信号,导致肿瘤抗原特异性T细胞的凋亡和免疫无能。本文着重探讨PD-L1分子在肺癌细胞株上的表达及其对T细胞杀伤效应的调节作用。方法采用常规方法从健康人外周血单个核细胞诱导DCs,并经凋亡肿瘤细胞和激发型CD40单克隆抗体刺激获得成熟DCs,与自体T细胞共育后获得肿瘤特异性CTL细胞;流式细胞术检测肺癌细胞上PD-L1分子的表达;JAM法和单抗阻断实验分析CTL细胞对肺癌细胞株的杀伤效应,ELISA法检测细胞培养上清中IFN-γ的含量。结果经凋亡肿瘤细胞负载的成熟DCs可诱导自体T细胞分化为肿瘤特异性CTL;H1299高表达PD-L1分子(90.3±4.2)%,而A549低表达PD-L1分子(19.4±5.2)%;CTL对A549具有高效特异的杀伤力,而对H1299不能高效杀伤;联合应用PD-L1单抗可促进CTL对H1299的杀伤作用和IFN-γ的分泌(P<0.05)。结论在肺癌细胞株上表达的PD-L1分子,可降低CTL对肺癌细胞的杀伤效应。; 关键词细胞毒T细胞肺肿瘤 PD-L1; Keywords Cytotoxic T-Lymphocytes Lung neoplasms Human PD-L1 protein; 分类号 R734.2 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名可溶性B7-H3在早期预测急性胰腺炎严重程度中的临床意义被引量：6: 2; 作者黄坚张光波何广胜沈佳庆孔小明沈月平; 机构苏州大学附属第一医院急诊内科苏州大学附属第一医院临床免疫学实验室江苏省人民医院血液科苏州大学医学部公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室; 出处《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第22期3569-3572,共4页; 基金国家自然科学基金资助(编号:81300357); 文摘目的:探讨s B7-H3(可溶性B7-H3)对早期判断急性胰腺炎(AP)严重程度的临床价值。方法:选择AP患者75例(轻度MAP 30例、中度MSAP 20例、重度SAP 25例),对照组为健康(HC)组20例,采用双抗体夹心ELISA法测腹痛开始24 h血浆s B7-H3值,评价与胰腺炎严重程度关联性的敏感度和特异度,及与临床检测指标相关性分析。结果:腹痛24 h血浆s B7-H3值,AP组显著高于对照组(t=3.925,P=0.0002),MAP组与HC相相比差异没有显著性,MSAP组和SAP组均显著高于HC组(P<0.05和P<0.01)和MAP组(P<0.05和P<0.01);SAP组显著高于MSAP组(P<0.01)。s B7-H3与LDH、hs-CRP、WBC呈线性正相关,与ALB、Ca(S)呈线性负相关(均P<0.05);s B7-H3对判断中度以上胰腺炎敏感度为88.9%,特异度为83.3%,判断SAP的敏感度为96%,特异度96%。结论:s B7-H3对急性胰腺炎严重程度早期判断有重要临床价值,同时有很高的敏感度、特异度,与临床判断严重程度指标呈线性相关。; 关键词急性胰腺炎血清学检测 sB7-H3; Keywords acute pancreatitis serological detection sBT-H3; 分类号 R576 [医药卫生—消化系统]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组hIL-17F原核蛋白表达和生物学活性初步研究被引量：2: 3; 作者刘高勤吴鸿雅李龙标马珍妮陆培荣张学光; 机构苏州大学附属第一医院眼科苏州大学附属第一医院临床免疫学实验室苏州大学附属第一医院血液学研究所; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期263-265,269,共4页; 基金国家自然科学基金重点资助项目(30972120); 文摘目的:研制hIL-17F/His重组蛋白并初步研究其体外生物学活性。方法:RT-PCR法克隆得到hIL-17F基因序列。将测序正确的hIL-17F基因片段装入PQE3.0原核表达载体构建重组载体hIL-17F/PQE3.0。将该重组载体导入宿主菌M15,经异丙基B-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后产生hIL-17F/His重组蛋白,并用Western blot实验确认。结果:原核表达的hIL-17F/His重组蛋白变性、复性后,经过HiTrapTM亲和层析得到纯品蛋白。体外活性实验表明,该融合蛋白具有上调人巨噬细胞TNF-α、IL-6等分子表达的作用,并促进He-La细胞的增殖。结论:制备了具有生物学活性的hIL-17F/His重组蛋白,为进一步研究该分子独特的生物学功能奠定了基础。; 关键词 IL-17F 原核表达复性纯化; Keywords IL-17F prokaryotic expression renaturation purification; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一株识别肿瘤细胞上CD40突变体分子的单克隆抗体的研制及其生物学功能研究被引量：1: 4; 作者郑舒丹马泓冰高超汪家敏孙静罗先富张学光; 机构苏州大学医学生物技术研究所苏州大学附属第一医院临床免疫学重点实验室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期910-913,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(30571690) 国家高技术研究发展计划(863)资助项目(2006AA02A254) 国家重点基础研究发展计划(973)资助项目(2007CB512402); 文摘目的:以本科室发现肿瘤细胞上表达的CD4078AA突变为基础,研制识别肿瘤细胞上CD40突变体分子的单克隆抗体(mAb),并对其生物学特性作初步分析。方法:以转人CD40突变体转基因细胞L929-CD40mu为免疫原,免疫6～8周龄的雌性BALB/c小鼠;采用B淋巴细胞融合技术,将免疫小鼠脾脏细胞与Sp2/0融合,以L929-CD40mu转基因细胞为抗体筛选阳性细胞,免疫荧光标记法对杂交瘤进行反复筛选和多次的克隆化培养;采用快速定性试纸法及竞争抑制结合试验分析该mAb的亚类及抗原识别位点;免疫印迹法对该mAb进行鉴定;采用MTT法分析mAb在体外对肿瘤细胞的抑制增殖效应以及PI-annexinⅤ方法进行细胞凋亡测定。结果:获得1株稳定分泌鼠抗人CD40mumAb的杂交瘤细胞株(命名为10C5),该mAb能特异性地识别人肿瘤细胞株HO8910表达的CD40突变体分子,而不识别正常扁桃体B淋巴细胞及血管内皮细胞表达的CD40分子,并且能够在体外促进肿瘤细胞凋亡。结论:成功地研制出1株特异性识别肿瘤细胞上CD40突变体分子的mAb,该mAb具有体外抑制肿瘤细胞生长并促进其凋亡的作用。; 关键词 CD40 杂交瘤单克隆抗体突变体肿瘤细胞; Keywords CD40 hybridoma monoclonal antibody mutant tumor cell; 分类号 Q813.2 [生物学—生物工程]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名一株鼠抗人4-1BBL功能性单克隆抗体的研制及其生物学特性的研究: 5; 作者王旭东周斌李文香於葛华张光波张学光; 机构苏州大学医学生物技术研究所苏州大学附属第一医院临床免疫学实验室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期439-442,451,共5页; 基金国家自然科学基金青年科学基金项目(30400394) 国防科工委重点项目(A3820060130)资助; 文摘目的:鼠抗人4-1BBL功能性单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定。方法:以高表达人4-1BBL分子的基因转染细胞L929/4-1BBL为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴瘤杂交瘤技术进行细胞融合,经流式细胞术分析和多次克隆化培养,筛选特异性杂交瘤细胞株;采用Ig亚型快速定性试纸法、染色体核型分析、竞争结合抑制试验、间接免疫荧光法对单抗的生物学特性进行鉴定,并采用体外细胞计数和ELISA检测分析单抗对单核细胞的作用。结果:获得1株持续、稳定分泌鼠抗人4-1BBL单抗的杂交瘤细胞株,命名为3E7。该单抗能识别人白血病细胞株和单核细胞表面的4-1BBL分子。对单抗生物学功能的研究结果表明,该单抗能有效地促进外周血单核细胞体外生长,并促进IL-6和TNF-α的分泌。结论:成功地获得了一株鼠抗人4-1BBL功能性单克隆抗体3E7,该单抗能特异地识别人4-1BBL分子,并有效地通过激发4-1BBL逆向信号通路促进单核细胞的体外生长及细胞因子的分泌。; 关键词 4-1BBL 单克隆抗体共刺激信号杂交瘤; Keywords 4-1BBL Monoclonal antibody Costimulatory signals Hybridoma; 分类号 R392.12 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名pCEP4/hIL-17真核表达载体的构建及表达被引量：1: 6; 作者刘高勤吴鸿雅居颂光李龙标陆培荣张学光; 机构苏州大学附属第一医院眼科苏州大学附属第一医院临床免疫学实验室; 出处《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1564-1568,共5页; 基金国家自然科学基金面上项目资助课题(No30972120); 文摘目的构建pCEP4/hIL-17载体及在真核细胞中表达hIL-17/mFc融合蛋白;初步研究IL-17生物学特性。方法采用RT-PCR的方法克隆hIL-17CDS段基因序列;将测序正确的hIL-17序列插入pCEP4质粒构建pCEP4/IL-17真核表达载体,转染中华仓鼠卵巢(CHO)细胞后,筛选阳性表达细胞株;并用RT-PCR、ELISA和Western blot等法鉴定IL-17基因的mRNA和蛋白表达;流式细胞术分析纯化的蛋白对Raji细胞表达的hIL-17受体的结合能力;以体外实验验证其促炎症作用。结果成功构建了pCEP4/hIL-17重组载体,并在CHO细胞中稳定表达;所获得hIL-17重组蛋白能稳定结合Raji细胞上的IL-17受体;体外刺激HeLa细胞,能明显促进IL-6等炎症因子的分泌。结论稳定表达hIL-17重组蛋白的CHO细胞系的建立,为进一步研究hIL-17的生物学功能奠定了良好的基础。; 关键词人白细胞介素-17 真核表达 CHO细胞融合蛋白基因克隆; Keywords human interleukin-17 eukaryotic expression chinese hamster ovary cell recombinant protein gene clone; 分类号 R341 [医药卫生—基础医学] R394.12 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗人CD154人-鼠嵌合抗体Fab段的构建和表达: 7; 作者葛彦陈永井瞿秋霞张学光; 机构苏州大学生物技术研究所苏州大学附属第一医院临床免疫学实验室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期569-571,共3页; 基金国家高技术研究发展计划(863)资助(2001AA215341) 江苏省自然科学基金资助项目(BK2001211); 文摘目的:通过基因工程技术构建和表达抗人CD154人-鼠嵌合抗体Fab段。方法:从分泌鼠抗人CD154单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株4F1中提取总RNA,分别采用特异性引物扩增mAb VH和VL的DNA编码区基因。同时,从人脾脏细胞中克隆出免疫球蛋白恒定区基因。利用基因重组技术构建嵌合Fab共表达载体pTXB1-Fab,利用大肠杆菌表达简单,高效,成本低廉的特点,对重组Fab进行原核表达。利用SDS-PAGE电泳、Western blot、流式细胞术对表达产物进行鉴定。结果:NCBI数据库BLAST显示,克隆的基因序列符合小鼠Ig可变区特征。表达质粒pTXB1-Fab构建正确,在大肠杆菌中实现可溶性表达。表达的人-鼠嵌合抗体与亲本抗体具有相同的识别位点。结论:成功地克隆获得阻断型抗人CD154 mAb(4F1)的轻链、重链可变区基因,成功构建pTXB1-Fab共表达载体,在大肠杆菌中实现可溶性表达,为人源化抗体的制备奠定了技术基础。; 关键词单克隆抗体 CD154 FAB; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	PD-L1分子在肺癌细胞株上的表达及其生物学意义	陈成穆传勇瞿秋霞朱一蓓孙静张学光黄建安	《中国肺癌杂志》 CAS	2009	8	在线阅读下载PDF 职称材料
2	可溶性B7-H3在早期预测急性胰腺炎严重程度中的临床意义	黄坚张光波何广胜沈佳庆孔小明沈月平	《实用医学杂志》 CAS 北大核心	2014	6	在线阅读下载PDF 职称材料
3	重组hIL-17F原核蛋白表达和生物学活性初步研究	刘高勤吴鸿雅李龙标马珍妮陆培荣张学光	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2011	2	在线阅读下载PDF 职称材料
4	一株识别肿瘤细胞上CD40突变体分子的单克隆抗体的研制及其生物学功能研究	郑舒丹马泓冰高超汪家敏孙静罗先富张学光	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
5	一株鼠抗人4-1BBL功能性单克隆抗体的研制及其生物学特性的研究	王旭东周斌李文香於葛华张光波张学光	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	pCEP4/hIL-17真核表达载体的构建及表达	刘高勤吴鸿雅居颂光李龙标陆培荣张学光	《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	抗人CD154人-鼠嵌合抗体Fab段的构建和表达	葛彦陈永井瞿秋霞张学光	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料