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先天性巨结肠相关性小肠结肠炎动物模型造模方法的对比研究
1
作者 王婷婷 徐铃琪 +4 位作者 龚元 李娜 杨献 周慧婷 黄顺根 《临床小儿外科杂志》 CSCD 北大核心 2024年第9期830-836,共7页
目的比较不同先天性巨结肠相关性小肠结肠炎(Hirschsprung-associated enterocolitis,HAEC)动物模型的造模方法,为HAEC发病机制的研究寻找更加可靠的动物模型。方法将24只21日龄斯泼累格·多雷(Sprague-Dawley,SD)大鼠随机分为实验... 目的比较不同先天性巨结肠相关性小肠结肠炎(Hirschsprung-associated enterocolitis,HAEC)动物模型的造模方法,为HAEC发病机制的研究寻找更加可靠的动物模型。方法将24只21日龄斯泼累格·多雷(Sprague-Dawley,SD)大鼠随机分为实验组和对照组,实验组用0.5%苯扎氯铵处理,对照组用生理盐水处理;造模3周后实验组使用大肠杆菌JM83按照每日1×109 CFU的剂量灌胃,对照组采用等量生理盐水灌胃,随后观察两组大鼠的饮食、活动及排便情况。另外选择21日龄EdnrB^(-/-)小鼠作为实验组,同日龄野生型小鼠作为对照组,每组各5只;解剖后根据肠道大体形态将实验组小鼠肠段分为狭窄段和扩张段,采用H&E染色评估处理后肠道组织的病理变化,采用Western blot检测相关肠道屏障蛋白的表达变化。结果成功采用苯扎氯铵包裹后大肠杆菌灌胃的方法建立HAEC大鼠模型,成功验证21日龄EdnrB^(-/-)小鼠作为HAEC的动物模型。两种动物模型的实验组与对照组相比,均可见活动减慢、腹部明显膨隆;解剖后可见远端肠管明显狭窄,近端肠管扩张。H&E染色发现两种动物模型的狭窄段神经节细胞团均有明显缺如,扩张段见大量炎症细胞聚集,对照组无明显异常。Western blot显示,HAEC患儿扩张肠段E-Cadherin蛋白相对表达量为0.15±0.01,低于对照组肠段的1.13±0.08(t=12.940,P<0.001);Occludin蛋白相对表达量为0.21±0.01,低于对照组肠段的0.99±0.01(t=95.030,P<0.001)。苯扎氯铵包裹诱导模型扩张肠段的Occludin蛋白相对表达量为0.14±0.01,低于对照组肠段的0.94±0.04(t=12.020,P<0.001);Claudin3蛋白相对表达量为0.34±0.01,低于对照组肠段的0.99±0.01(t=38.240,P<0.001)。EdnrB^(-/-)小鼠模型扩张肠段的E-Cadherin蛋白相对表达量为0.28±0.01,低于对照组肠段的0.97±0.03(t=25.360,P<0.001);Occludin蛋白相对表达量为0.32±0.01,低于对照组肠段的1.13±0.02(t=43.710,P<0.001);Claudin3蛋白相对表达量为0.17±0.01,低于对照组肠段的1.19±0.03(t=36.960,P<0.001)。以上差异均具有统计学意义,与临床患儿情况相符。结论苯扎氯铵包裹后大肠杆菌灌胃的化学诱导模型及EdnrB基因敲除后的自发性动物模型都与HAEC的临床和病理特征符合,可用于HAEC病因与发病机制的研究。但EdnrB^(-/-)小鼠作为与HD发病机制相关基因的基因敲除小鼠,不予干预而自然发生小肠结肠炎,能更好地模拟临床HAEC的病程发展和生理病理变化。 展开更多
关键词 HIRSCHSPRUNG病 小肠结肠炎 疾病模型 动物 方案评价 对比研究
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尿IGFBP-7对危重症患儿急性肾损伤的早期预测价值 被引量：5
2
作者 戴小妹 陈娇 +3 位作者 陆春久 王雪芹 柏振江 李艳红 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期277-281,共5页
目的探讨尿胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP-7)对危重症患儿急性肾损伤(AKI)的早期预测价值。方法选择2012年5月至8月儿童重症监护病房(PICU)收治的患儿为研究对象。分为轻度AKI(AKI 1期)、严重AKI(AKI2和3期)和非AKI组。检测入PICU第... 目的探讨尿胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP-7)对危重症患儿急性肾损伤(AKI)的早期预测价值。方法选择2012年5月至8月儿童重症监护病房(PICU)收治的患儿为研究对象。分为轻度AKI(AKI 1期)、严重AKI(AKI2和3期)和非AKI组。检测入PICU第一个24小时尿IGFBP-7水平,并于入PICU 24小时内行儿童死亡风险Ⅲ(PRISMⅢ)评分。以多因素logistic回归分析评估在校正混杂因素后尿IGFBP-7与AKI的关系,用受试者工作特征曲线(ROC)及曲线下面积(AUC)评价尿IGFBP-7对危重症患儿AKI的早期预测价值。结果共纳入危重症患儿144例,21例(14.6%)在样本采集120小时内发生AKI,其中严重AKI 11例。严重AKI组入PICU第一个24小时的尿IGFBP-7水平、PRISMⅢ评分均高于轻度AKI及无AKI组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析显示,在校正年龄、体质量、PRISMⅢ评分后,尿IGFBP-7是严重AKI的独立危险因素(OR=2.93,95%CI:1.07～8.03,P=0.037),预测危重症患儿严重AKI的AUC值为0. 79(95%CI:0. 66～0. 92,P=0. 001)。结论尿IGFBP-7是危重症患儿严重AKI的独立预测指标,具有早期预测价值。 展开更多
关键词 急性肾损伤 胰岛素样生长因子结合蛋白7 儿童死亡风险评分Ⅲ 危重症患儿
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低出生体重大鼠肾组织中lncRNA表达谱的差异分析 被引量：1
3
作者 黄慧 王雪芹 +2 位作者 孙云清 李根 李艳红 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期644-649,共6页
目的应用长链非编码RNA(lncRNA)基因芯片技术分析低出生体重(LBW)大鼠肾组织中lncRNA的表达情况。方法通过妊娠和哺乳期给予22%常规饲料建立Control组和6%低蛋白饲料建立LBW组大鼠模型。酸消化法计数生后10 d大鼠的肾小球数目;lncRNA芯... 目的应用长链非编码RNA(lncRNA)基因芯片技术分析低出生体重(LBW)大鼠肾组织中lncRNA的表达情况。方法通过妊娠和哺乳期给予22%常规饲料建立Control组和6%低蛋白饲料建立LBW组大鼠模型。酸消化法计数生后10 d大鼠的肾小球数目;lncRNA芯片技术对两组大鼠肾脏表达的lncRNA进行差异筛选,生物信息学技术对差异显著的lncRNA与肾脏发育密切相关的编码基因mRNA行相关性分析。实时定量PCR(qRT-PCR)验证芯片结果并检测其在生后1 d和10 d大鼠肾组织中的表达水平。结果 LBW组大鼠生后1和10 d的体重、生后10 d的肾小球数目均低于Control组(均P<0.01),且肾小球数目与出生体重呈正相关(rs=0.73,P=0.003)。基因芯片和信息学分析显示两组差异表达的lncRNA 42个(折叠倍率≥2,P<0.05),其中16种lncRNA与丝裂原活化蛋白激酶4(MAPK4)mRNA表达显著相关(r=0.90,P<0.05)。qRT-PCR结果显示lncRNA TCONS00014139和TCONS00014138在生后1 d LBW组大鼠肾组织中相对高表达,生后10 d相对低表达,与肾单位数目呈正相关(P<0.01);lncRNA TCONS00017119在生后1和10 d LBW组肾组织持续高表达,与肾单位数目呈负相关(P=0.001)。结论两组大鼠肾组织中存在lncRNA的差异表达,且与肾脏发育密切相关的MAPK4 mRNA的表达有关,其中lncRNA TCONS00014139、TCONS00014138和TCONS00017119与肾单位数目显著相关,提示lncRNA在低出生体重大鼠肾脏发育障碍中可能发挥重要作用。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 低出生体重 肾发育 基因芯片
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