目的:研究携带第10号染色体缺失的磷酸脂酶和张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homologue-deleted chromosome ten gene,PTEN)的腺病毒表达载体对A549肺癌细胞体内外生长的抑制作用。方法:从人外周血淋巴细胞中通过RT-PCR扩增出...目的:研究携带第10号染色体缺失的磷酸脂酶和张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homologue-deleted chromosome ten gene,PTEN)的腺病毒表达载体对A549肺癌细胞体内外生长的抑制作用。方法:从人外周血淋巴细胞中通过RT-PCR扩增出PTEN基因片段,将其克隆到pAdTrack-CMV转移载体上,构建了PTEN重组腺病毒载体。体外用MTT法检测Ad-PTEN对A549肺癌细胞生长的抑制作用,以流式细胞术检测肿瘤细胞的周期和凋亡率。建立荷瘤裸鼠模型,体内检测Ad-PTEN对A549肺癌细胞移植瘤生长的影响,以免疫组化法检测移植瘤中微血管密度。结果:克隆的PTEN基因测序结果与基因Bank数据库完全相符。Ad-PTEN体外感染A549肺癌细胞48h后其凋亡率为10.5%,明显高于对照细胞;4d后细胞生长与对照组细胞相比抑制了57%。肺癌细胞移植瘤治疗结束时,Ad-PTEN组瘤重为(0.58±0·29)g,对照组瘤重为(1.42±0.24)g,其生长抑制达59%(P<0.05);同时移植瘤中微血管密度降低约49%(P<0.05)。结论:成功构建的Ad-PTEN腺病毒载体能在体内外抑制A549肺癌细胞及其移植瘤的生长。展开更多
文摘目的:研究携带第10号染色体缺失的磷酸脂酶和张力蛋白同源基因(phosphatase and tensin homologue-deleted chromosome ten gene,PTEN)的腺病毒表达载体对A549肺癌细胞体内外生长的抑制作用。方法:从人外周血淋巴细胞中通过RT-PCR扩增出PTEN基因片段,将其克隆到pAdTrack-CMV转移载体上,构建了PTEN重组腺病毒载体。体外用MTT法检测Ad-PTEN对A549肺癌细胞生长的抑制作用,以流式细胞术检测肿瘤细胞的周期和凋亡率。建立荷瘤裸鼠模型,体内检测Ad-PTEN对A549肺癌细胞移植瘤生长的影响,以免疫组化法检测移植瘤中微血管密度。结果:克隆的PTEN基因测序结果与基因Bank数据库完全相符。Ad-PTEN体外感染A549肺癌细胞48h后其凋亡率为10.5%,明显高于对照细胞;4d后细胞生长与对照组细胞相比抑制了57%。肺癌细胞移植瘤治疗结束时,Ad-PTEN组瘤重为(0.58±0·29)g,对照组瘤重为(1.42±0.24)g,其生长抑制达59%(P<0.05);同时移植瘤中微血管密度降低约49%(P<0.05)。结论:成功构建的Ad-PTEN腺病毒载体能在体内外抑制A549肺癌细胞及其移植瘤的生长。
