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人IL-17F融合蛋白在E.coli中表达及其生物学活性研究被引量：2: 1; 作者谢宇锋盛伟华 +1 位作者缪竞诚杨吉成《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1086-1091,共6页; 目的:构建重组原核表达载体pGEX-5X-3/hIL-17F,使其在大肠杆菌中表达,获得GST-hIL-17F融合蛋白,并研究其生物学活性。方法:利用PCR法从自行构建的含hIL-17F基因的pUCm-T/hIL-17F载体中扩增其成熟肽基因序列,亚克隆于pGEX-5X-3中,构建原... 展开更多; 关键词白细胞介素17F GST-融合蛋白生长抑制血管形成; 在线阅读下载PDF 职称材料

人IL-24基因的克隆及在COS-7细胞中的表达被引量：12: 2; 作者陈雄艳盛伟华 +3 位作者谢宇锋缪竞诚白艳艳杨吉成《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期672-676,共5页; 目的 :克隆人IL 2 4基因 ,构建真核表达载体 ,在COS 7细胞中进行表达 ,并检测重组表达蛋白hIL 2 4的抗肿瘤活性。方法 :分离人外周血单个核细胞 ,提取细胞总RNA ,采用RT PCR技术克隆人IL 2 4基因 ,将其重组于pUC19,双脱氧末端终止法测... 展开更多; 关键词人IL-24 克隆表达 COS-7细胞凋亡; 在线阅读下载PDF 职称材料

人IL-24基因在CHO细胞中的表达及其抗肿瘤效应被引量：11: 3; 作者缪竞诚陈雄艳 +2 位作者盛伟华谢宇锋杨吉成《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期567-570,共4页; 目的构建人IL-24基因真核表达载体,在CHO细胞中进行稳定表达,并检测重组表达蛋白rhIL-24的抗肿瘤活性。方法将测序验证的人IL-24基因亚克隆至真核表达载体pcDNA3,构建重组真核表达载体pcDNA3-hIL-24,转染CHO细胞进行稳定表达,经RT-PCR... 展开更多; 关键词人白细胞介素-24 稳定转染 CHO细胞凋亡; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组人IL-18在大肠杆菌中的表达及其抗肿瘤作用被引量：1: 4; 作者张海峰盛伟华 +5 位作者缪竞诚谢宇锋李丽娥马丽丽庄文卓杨吉成《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期141-144,共4页; 目的:获取rhIL-18原核表达产物并研究其活性。方法:用本室构建的含基因重组表达载体PBV220-IL-18的大肠杆菌DH5α,经42℃热诱导表达和包涵体提取纯化后获取rhIL-18蛋白;采用ELISA试剂盒检测rhIL-18刺激PBMC分泌IFN-γ的活性及MTT法检测... 展开更多; 关键词白介素18 基因表达免疫调节功能抗肿瘤活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人IL-17F融合蛋白在E.coli中表达及其生物学活性研究被引量：2: 1; 作者谢宇锋盛伟华缪竞诚杨吉成; 机构苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1086-1091,共6页; 文摘目的:构建重组原核表达载体pGEX-5X-3/hIL-17F,使其在大肠杆菌中表达,获得GST-hIL-17F融合蛋白,并研究其生物学活性。方法:利用PCR法从自行构建的含hIL-17F基因的pUCm-T/hIL-17F载体中扩增其成熟肽基因序列,亚克隆于pGEX-5X-3中,构建原核表达载体pGEX-5X-3/hIL-17F,并在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导表达包涵体融合蛋白,经纯化后进行Westernblot鉴定。MTT法分析GST-hIL-17F纯品蛋白对人脐静脉内皮细胞ECV304的生长抑制作用,ELISA法检测对ECV304内皮细胞表达IL-6、IFN-γ和TNF-α的生物学作用,并采用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)法分析其对血管形成的影响结果:GST-hIL-17F融合蛋白在大肠杆菌BL21中获得了高效表达,约占菌体总蛋白的55%,能产生约41kD的融合蛋白,且Westernblot证实确为GST-hIL-17F目的蛋白。GST-hIL-17F具有明显抑制ECV304内皮细胞增殖和上调表达IL-6的生物学效应,并具有显著的抗血管形成活性。结论:hIL-17F重组原核表达和血管形成抑制效应的初步研究已获成功,为进一步研究rhIL-17F的抗血管形成机制和临床应用奠定了基础。; 关键词白细胞介素17F GST-融合蛋白生长抑制血管形成; Keywords IL-17F GST-fusion protein Growth inhibition Angiogenesis; 分类号 R392.13 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人IL-24基因的克隆及在COS-7细胞中的表达被引量：12: 2; 作者陈雄艳盛伟华谢宇锋缪竞诚白艳艳杨吉成; 机构苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期672-676,共5页; 基金江苏省高校自然科学研究项目 (0 1KJB180 0 0 1); 文摘目的 :克隆人IL 2 4基因 ,构建真核表达载体 ,在COS 7细胞中进行表达 ,并检测重组表达蛋白hIL 2 4的抗肿瘤活性。方法 :分离人外周血单个核细胞 ,提取细胞总RNA ,采用RT PCR技术克隆人IL 2 4基因 ,将其重组于pUC19,双脱氧末端终止法测定其核苷酸序列 ,构建真核重组表达载体pcDNA3 hIL 2 4 ,进行双酶切和PCR鉴定 ,以质粒pcDNA3 hIL 2 4转染COS 7细胞进行瞬时表达 ,用RT PCR检测mRNA表达 ,并用MTT法、TUNEL法和流式细胞术检测其诱导肿瘤细胞凋亡的活性。结果 :成功获得 6 2 1bp的人IL 2 4基因 ,测序正确 ,经双酶切和PCR鉴定真核表达质粒构建正确 ,以脂质体转染COS 7细胞后 ,用RT PCR法、MTT法、TUNEL法和流式细胞术检测表明COS 7细胞可表达hIL 2 4 ,且所表达的人IL 2 4具有较强的诱导A5 4 9肺腺癌细胞凋亡的作用。结论 :人IL 2 4基因的瞬时表达和凋亡效应的初步研究已获成功 ,为研究人IL 2; 关键词人IL-24 克隆表达 COS-7细胞凋亡; Keywords Human IL-24 Cloning Expression COS-7 cell Apoptosis; 分类号 R392.13 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人IL-24基因在CHO细胞中的表达及其抗肿瘤效应被引量：11: 3; 作者缪竞诚陈雄艳盛伟华谢宇锋杨吉成; 机构苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室; 出处《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期567-570,共4页; 基金苏州大学医学发展基金资助项目(NoEE134517); 文摘目的构建人IL-24基因真核表达载体,在CHO细胞中进行稳定表达,并检测重组表达蛋白rhIL-24的抗肿瘤活性。方法将测序验证的人IL-24基因亚克隆至真核表达载体pcDNA3,构建重组真核表达载体pcDNA3-hIL-24,转染CHO细胞进行稳定表达,经RT-PCR鉴定后用MTT法、Ho-echst染色和流式细胞术检测CHO细胞表达的rhIL-24诱导A549人肺腺癌细胞凋亡的抗肿瘤效应,用ELISA检测其刺激免疫细胞分泌IL-6和IFN-γ的功能。结果经双酶切和PCR鉴定,重组真核表达载体构建正确,人IL-24在CHO细胞中获得稳定表达,且所表达的人IL-24具有较强的诱导A549人肺腺癌细胞凋亡及上调免疫细胞表达IL-6和IFN-γ的免疫刺激活性。结论人IL-24基因的稳定表达和抗肿瘤效应的实验研究,为进一步研究人IL-24抗肿瘤的分子机制及潜在的应用奠定了基础。; 关键词人白细胞介素-24 稳定转染 CHO细胞凋亡; Keywords human IL-24 stable transfection CHO cell apoptosis; 分类号 R-329.25 [医药卫生] R342.3 [医药卫生—基础医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组人IL-18在大肠杆菌中的表达及其抗肿瘤作用被引量：1: 4; 作者张海峰盛伟华缪竞诚谢宇锋李丽娥马丽丽庄文卓杨吉成; 机构苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室; 出处《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期141-144,共4页; 基金江苏省高校自然科学研究项目(01KJB180001); 文摘目的:获取rhIL-18原核表达产物并研究其活性。方法:用本室构建的含基因重组表达载体PBV220-IL-18的大肠杆菌DH5α,经42℃热诱导表达和包涵体提取纯化后获取rhIL-18蛋白;采用ELISA试剂盒检测rhIL-18刺激PBMC分泌IFN-γ的活性及MTT法检测其对NK细胞杀伤K562细胞自然杀伤活性;同时用荷瘤小鼠模型检测其体内抗瘤功能。结果:诱导含重组表达载体PBV220-IL-18的大肠杆菌DH5α后,蛋白电泳显示出一条相对分子量(Mr)为18 000的蛋白条带;10μgrhIL-18蛋白体外刺激PBMC后,其分泌IFN-γ的能力与对照组相比提高了8倍,细胞毒性提高3倍;同时rhIL-18蛋白能明显抑制肿瘤生长和延长荷瘤鼠生存期。结论:获得了有免疫调节功能和抗肿瘤活性的rhIL-18蛋白,为今后IL-18重组产物的研制和开展肿瘤的生物治疗提供了实验依据。; 关键词白介素18 基因表达免疫调节功能抗肿瘤活性; Keywords IL- 18 Gene expression Immune regulation Anti-tumor activity; 分类号 R392.12 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人IL-17F融合蛋白在E.coli中表达及其生物学活性研究	谢宇锋盛伟华缪竞诚杨吉成	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2006	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	人IL-24基因的克隆及在COS-7细胞中的表达	陈雄艳盛伟华谢宇锋缪竞诚白艳艳杨吉成	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2004	12	在线阅读下载PDF 职称材料
3	人IL-24基因在CHO细胞中的表达及其抗肿瘤效应	缪竞诚陈雄艳盛伟华谢宇锋杨吉成	《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心	2006	11	在线阅读下载PDF 职称材料
4	重组人IL-18在大肠杆菌中的表达及其抗肿瘤作用	张海峰盛伟华缪竞诚谢宇锋李丽娥马丽丽庄文卓杨吉成	《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2006	1	在线阅读下载PDF 职称材料