期刊文献+
共找到6篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
ING4基因对人胃癌细胞SGC-7901生物行为的影响 被引量:8
1
作者 黄俊琼 孙万邦 +1 位作者 张海峰 杨吉成 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期612-614,617,共4页
目的:研究人ING4对人胃癌细胞SGC-7901的影响,探讨其作用机制。方法:将重组腺病毒质粒pAd-ING4用PacI线性化,经脂质体转染QBI-293A细胞,获得重组病毒Ad-ING4。Ad-ING4感染人SGC-7901细胞,RT-PCR及Western blot分析ING4和p21表达,MTT法检... 目的:研究人ING4对人胃癌细胞SGC-7901的影响,探讨其作用机制。方法:将重组腺病毒质粒pAd-ING4用PacI线性化,经脂质体转染QBI-293A细胞,获得重组病毒Ad-ING4。Ad-ING4感染人SGC-7901细胞,RT-PCR及Western blot分析ING4和p21表达,MTT法检测Ad-ING4对细胞生长的影响,激光共聚焦显微镜检测细胞凋亡。结果:Ad-ING4感染后,SGC-7901细胞中有ING4 mRNA和蛋白质表达,细胞生长受到明显抑制,与野生型SGC-7901细胞相比,p21表达水平增高,细胞凋亡率明显增高,P<0.05。结论:ING4可通过上调p21表达发挥抑制SGC-7901细胞生长、诱导细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 ING4 AD-ING4 人SGC-7901细胞 P21
在线阅读 下载PDF
腺病毒介导的ING4基因抑制胃癌细胞生长及其分子机制 被引量:2
2
作者 陆向东 杨吉成 +3 位作者 谭洁 程晓赪 周俊东 李汉冲 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1221-1228,共8页
目的:研究肿瘤生长抑制基因4(inhibitor of growth family4,ING4)体外对胃癌细胞SGC-7901的生长抑制及其分子机制。方法:将携带有人ING4基因的重组复制缺陷型腺病毒(Ad-hING4)感染胃癌细胞SGC-7901,RT-PCR法检测腺病毒介导的外源性hING... 目的:研究肿瘤生长抑制基因4(inhibitor of growth family4,ING4)体外对胃癌细胞SGC-7901的生长抑制及其分子机制。方法:将携带有人ING4基因的重组复制缺陷型腺病毒(Ad-hING4)感染胃癌细胞SGC-7901,RT-PCR法检测腺病毒介导的外源性hING4基因的转录,MTT法检测hING4基因对SGC-7901细胞的生长抑制作用,激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察hING4基因诱导SGC-7901细胞凋亡的形态学改变,流式细胞仪(FACS)检测hING-4基因诱导胃癌细胞SGC-7901的凋亡率及细胞周期改变,免疫细胞化学分析凋亡相关因子bcl-2和bax的改变。结果:Ad-hING4感染SGC-7901细胞后,RT-PCR结果提示有hING4目的基因的转录,该基因表达可以显著抑制SGC-7901细胞的生长,诱导S期减少、G2/M期阻滞和凋亡,hING4基因能使SGC-7901细胞中bcl-2的表达下调和bax的表达上调。结论:重组腺病毒Ad-hING4对胃癌细胞SGC-7901具有显著的生长抑制及凋亡诱导作用,其作用机制可能与下调bcl-2基因和上调bax基因的表达有关。 展开更多
关键词 ING4 腺病毒载体 基因治疗 胃癌 细胞凋亡
在线阅读 下载PDF
人IL-31的克隆表达及对表皮角化细胞的影响 被引量:10
3
作者 黄俊琼 孙万邦 +4 位作者 谢宇锋 盛伟华 缪竞诚 杜联峰 杨吉成 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期369-373,共5页
目的克隆人IL-31基因,构建真核表达载体,研究人IL-31对表皮角化细胞HaCaT的影响及其作用机制。方法PMA、PHA刺激正常人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR克隆人IL-31基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)A,进行PC... 目的克隆人IL-31基因,构建真核表达载体,研究人IL-31对表皮角化细胞HaCaT的影响及其作用机制。方法PMA、PHA刺激正常人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR克隆人IL-31基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)A,进行PCR和双酶切鉴定,并进行序列测定。将重组质粒转染CHO细胞,用RT-PCR和Western blot分析rhIL-31在CHO细胞中的表达。用Ni2+树脂纯化his融合蛋白,用不同剂量rhIL-31刺激HaCaT细胞,利用Transwell穿孔板检测HaCaT细胞培养上清对外周血单个核细胞的趋化作用,荧光定量PCR检测rhIL-31对HaCaT表达趋化因子的影响,Western blot检测STAT3磷酸化。结果成功获得全长人IL-31基因,测序正确,经双酶切、PCR和序列测定鉴定,真核表达质粒构建正确,可在CHO细胞中表达;该目的蛋白刺激人表皮角化细胞HaCaT,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞表达趋化因子MDC、TARC、I-309;细胞STAT3磷酸化增加。结论IL-31作用于正常人表皮角化细胞,细胞培养上清对外周血单个核细胞有趋化作用,HaCaT细胞趋化因子表达增加,细胞STAT3磷酸化增加,提示IL-31可通过STAT3发挥作用。 展开更多
关键词 人IL-31 表皮角化细胞趋化因子 趋化作用 STAT3
在线阅读 下载PDF
rhLIF与IL-24基因协同诱导HL-60细胞的凋亡 被引量:3
4
作者 郁心 叶震敏 +2 位作者 盛伟华 杨吉成 缪竞诚 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期772-777,共6页
目的:构建能稳定表达白血病抑制因子(LIF)的转基因细胞,并研究所表达的LIF与IL-24基因在诱导HL-60细胞凋亡方面的协同作用。方法:用真核表达质粒pcDNA3-LIF转染ECV304细胞,G418筛选阳性细胞,收集阳性细胞和培养上清,RT-PCR检测LIFmRNA... 目的:构建能稳定表达白血病抑制因子(LIF)的转基因细胞,并研究所表达的LIF与IL-24基因在诱导HL-60细胞凋亡方面的协同作用。方法:用真核表达质粒pcDNA3-LIF转染ECV304细胞,G418筛选阳性细胞,收集阳性细胞和培养上清,RT-PCR检测LIFmRNA的表达。同时在已转化重组腺病毒质粒的大肠杆菌中抽提质粒pAdEasy-1-pTrack-CMV-IL-24,用PacI酶切使重组腺病毒质粒线性化,脂质体转染QBI-293A细胞,收获Ad-IL-24腺病毒子。将重组病毒子(Ad-IL-24)感染HL-60细胞,同时加入含LIF的培养上清,并设对照组,RT-PCR检测IL-24 mRNA表达,光镜下观察HL-60细胞形态的变化,激光扫描共聚焦显微镜观察细胞凋亡改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫细胞化学分析凋亡因子的改变。结果:成功构建能稳定表达LIF蛋白的转基因细胞;获得高滴度的重组腺病毒Ad-IL-24,用它感染HL-60细胞后,能检测到IL-24 mRNA的表达。各种检测方法表明LIF、IL-24基因都能抑制HL-60细胞生长、诱导凋亡,且两者具有协同作用。结论:LIF、IL-24基因都能抑制HL-60细胞生长,诱导凋亡,两者具有协同作用。 展开更多
关键词 LIF IL-24基因 HL-60细胞 凋亡
在线阅读 下载PDF
hIFN-λ1(hIL-29)基因及在COS-7细胞中瞬时表达和抗病毒效应 被引量:2
5
作者 王建红 马丽丽 +5 位作者 谢宇锋 盛伟华 缪竞诚 吴康 陈雄艳 杨吉成 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期744-746,751,共4页
目的:克隆hIFN-λ1基因,构建pcDNA3.1A-IFN-λ1表达质粒,并在真核细胞中获得表达,以进一步研究rhIFN-λ1的生物学特性。方法:采用RT-PCR法从病毒诱导的A549细胞mRNA中克隆hIFN-λ1基因,并重组于pcDNA3.1A真核表达载体上。结果:经双酶切... 目的:克隆hIFN-λ1基因,构建pcDNA3.1A-IFN-λ1表达质粒,并在真核细胞中获得表达,以进一步研究rhIFN-λ1的生物学特性。方法:采用RT-PCR法从病毒诱导的A549细胞mRNA中克隆hIFN-λ1基因,并重组于pcDNA3.1A真核表达载体上。结果:经双酶切和PCR鉴定及DNA序列分析,发现所克隆的基因与GenBank公布的序列一致,并在COS-7细胞中获得了有效瞬时表达。结论:成功克隆了hIFN-λ1基因,并成功地获得了瞬时表达,其rhIFN-λ1表达产物具有抗病毒活性。 展开更多
关键词 λ1-干扰素 基因克隆 COS-7细胞 表达
在线阅读 下载PDF
CTL前体频率对CD8+CTL应答类型的影响 被引量:1
6
作者 黄俊琼 项吉姆 +3 位作者 杨吉成 蒋伙刚 梁厚凤 何应中 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期738-740,共3页
目的:探讨CTL前体的频率对CTL应答类型的影响。方法:用重组鼠IL-4和GM-CSF诱导小鼠骨髓来源DC发育成熟,卵清蛋白-Ⅰ(OVA-Ⅰ)多肽激活DC,流式细胞术(FCM)分析DCOVA表型;用OVA特异CD8+T细胞和DCOVA接种Iab-/-C57BL/6小鼠,FCM检测小鼠体内... 目的:探讨CTL前体的频率对CTL应答类型的影响。方法:用重组鼠IL-4和GM-CSF诱导小鼠骨髓来源DC发育成熟,卵清蛋白-Ⅰ(OVA-Ⅰ)多肽激活DC,流式细胞术(FCM)分析DCOVA表型;用OVA特异CD8+T细胞和DCOVA接种Iab-/-C57BL/6小鼠,FCM检测小鼠体内OVA特异性CTL及特异性CTL对OVA特异性脾细胞的体内细胞毒作用,并观察DCOVA免疫后小鼠肺肿瘤的生长情况。结果:经OVA-Ⅰ多肽刺激后,DC表面有高水平CD11c、CD80、CD54、Iab、Kb分子及pMHCⅠ复合体表达;注射不同剂量(0×106、0.25×106、0.5×106、1×106、5×106)OVA特异性CD8+T细胞后,小鼠外周血OVA特异CTL占CD8+T细胞的百分比分别为0.01%、1.31%±0.21%、2.34%±0.17%、3.11%±0.25%、4.23%±0.32%,注射CD8+T细胞组OVA特异CTL百分比均较对照组明显增高(P<0.05),未接种CD8+ T细胞的野生型C57BL/6小鼠外周血OVA特异CTL为2.45%±0.22%;各剂量组CFSElow细胞数不变,CFSEhigh细胞随着CD8+T细胞数的增加而逐渐减少,小鼠肺肿瘤数随接种CD8+T细胞数的增加而减少(P<0.05)。结论:增加CTL前体频率可使CTL应答类型由CD4+T细胞依赖型转变为CD4+T细胞非依赖型。 展开更多
关键词 CTL前体 频率 CTL应答 CD4+T细胞
在线阅读 下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部