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人胚胎生殖干细胞的分离和体外培养 被引量:11
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作者 陈永珍 朱旻 +1 位作者 张苏 李芳 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期295-297,F004,共4页
目的:体外培养人胚胎生殖干细胞(EG),在不添加细胞因子的培养条件下,观察细胞生长情况。方法:取5~10周人胚胎的生殖腺嵴和肠背系膜,进行组织块培养,采用组织化学及免疫细胞化学技术对培养的细胞进行鉴定。结果:培养4d后,在成纤维细胞... 目的:体外培养人胚胎生殖干细胞(EG),在不添加细胞因子的培养条件下,观察细胞生长情况。方法:取5~10周人胚胎的生殖腺嵴和肠背系膜,进行组织块培养,采用组织化学及免疫细胞化学技术对培养的细胞进行鉴定。结果:培养4d后,在成纤维细胞的上面出现EG细胞集落;培养2周后,显示细胞呈圆形,胞质染成深蓝色;细胞染色体均为正常的二倍体核型;碱性磷酸酶活性强阳性;并检测到SSEA-1。结论:体外培养人胚胎生殖腺嵴,利用源于自身胚胎组织的成纤维细胞作为饲养层,可观察到EG细胞集落的形成;培养的细胞初步鉴定为人胚胎干细胞。 展开更多
关键词 生殖干细胞 体外培养 免疫细胞化学技术 碱性磷酸酶活性 培养的细胞 成纤维细胞 分离 人胚胎干细胞 细胞集落 组织块培养 细胞染色体 培养条件 细胞因子 细胞生长 组织化学 胚胎组织 初步鉴定 生殖腺 二倍体 强阳性 饲养层
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人胚胎成纤维细胞对人胚胎生殖细胞生长的作用 被引量:6
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作者 陈永珍 李芳 +3 位作者 陈谦 余水长 朱旻 张苏 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期625-628,共4页
目的:研究人胚胎成纤维细胞对人胚胎生殖细胞(EG细胞)生长的作用。方法:采用组织块体外培养法体外培养人EG细胞,不添加任何细胞因子,利用源于胚胎组织自身的成纤维细胞作为饲养层,收集培养3 d和9 d的上清液,用抗体夹心ABC- ELISA法定量... 目的:研究人胚胎成纤维细胞对人胚胎生殖细胞(EG细胞)生长的作用。方法:采用组织块体外培养法体外培养人EG细胞,不添加任何细胞因子,利用源于胚胎组织自身的成纤维细胞作为饲养层,收集培养3 d和9 d的上清液,用抗体夹心ABC- ELISA法定量检测其白血病抑制因子(LIF)、干细胞生长因子(SCF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的含量。培养的细胞用免疫细胞化学法进行SSEA-3、OCT-4的检测。结果:培养9 d的上清液中3种因子均含量为LIF 55.25 pg/ml、SCF90.39 pg/ml、 bFGF 26.06 pg/ml,均高于培养3 d相应的平均含量。培养的细胞SSEA-3、OCT-4呈强阳性表达。结论:上清液中LIF、SCF和bF- GF的含量与胚胎成纤维细胞的生长呈正比,胚胎成纤维细胞能分泌这些细胞因子,以维持EG细胞体外增殖并抑制其分化。 展开更多
关键词 生殖细胞 成纤维细胞 胚胎 细胞生长
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人胚胎生殖干细胞移植对大鼠心肌梗死的影响(英文) 被引量:1
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作者 陈永珍 张于娟 +1 位作者 朱旻 张苏 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期474-479,共6页
目的:探讨直接注射移植人胚胎生殖干细胞对大鼠心肌梗死的影响。方法:缝扎SD大鼠左冠状动脉前降支,建立心肌梗死模型。取5~10周人胚胎生殖腺嵴,组织块体外培养,生物学鉴定为人胚胎生殖干细胞(hEG)。将其直接注射于大鼠急性心肌... 目的:探讨直接注射移植人胚胎生殖干细胞对大鼠心肌梗死的影响。方法:缝扎SD大鼠左冠状动脉前降支,建立心肌梗死模型。取5~10周人胚胎生殖腺嵴,组织块体外培养,生物学鉴定为人胚胎生殖干细胞(hEG)。将其直接注射于大鼠急性心肌梗死边缘。于移植后1d、1、2、4周处死大鼠,免疫组织化学方法观察心肌特异转录因子GATA-4和抗人细胞核抗体MAB1281在移植细胞的表达。结果:免疫组织化学显示移植组MAB1281检测阳性,GATA-4在移植细胞阳性表达。结论:hEG细胞直接注射移植大鼠心肌梗死处,细胞能存活并呈现向心肌细胞分化的表现,显示出正常心肌细胞的光镜结构。 展开更多
关键词 人胚胎生殖干细胞 细胞移植 心肌梗死
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传代培养人胚胎生殖干细胞的生物学鉴定
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作者 陈永珍 张苏 +1 位作者 朱旻 陈谦 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期694-696,F0003,共4页
目的:通过对传代培养至第5代细胞分子标记物的表达分析,鉴定传代培养的细胞为人胚胎生殖干细胞(embrgonic germ stem cells,EGCs)。方法:取5~10周人胚胎的生殖腺嵴和肠背系膜,进行组织块体外培养人EGCs,挑选传代培养至第5代生长良好... 目的:通过对传代培养至第5代细胞分子标记物的表达分析,鉴定传代培养的细胞为人胚胎生殖干细胞(embrgonic germ stem cells,EGCs)。方法:取5~10周人胚胎的生殖腺嵴和肠背系膜,进行组织块体外培养人EGCs,挑选传代培养至第5代生长良好的细胞,采用免疫细胞化学法分别检测SSEA-1、SSEA-3、Oct-4、hTERT的表达。结果:组织块体外培养得到的细胞,经免疫细胞化学法显示的单个细胞或细胞集落,均阳性表达SSEA- 1、SSEA-3、Oct-4、hTERT。结论:组织块体外传代培养第5代所获得的细胞,为未分化的人EGCs。 展开更多
关键词 胚胎生殖干细胞 阶段特异性胚胎抗原 OCT-4 人端粒酶逆转录酶
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抗生殖免疫抗体与不明原因反复自然流产的关系 被引量:12
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作者 陈永珍 朱旻 张苏 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期40-41,共2页
目的 :为探讨抗生殖免疫抗体与不明原因反复自然流产的关系。方法 :采用ELISA法检测 5 2例不明原因反复自然流产(流产组 )血清抗精子抗体 (AsAb)、抗子宫内膜抗体 (EmAb)、抗卵巢抗体 (AovAb)、抗心磷脂抗体 (AcAb)和抗绒毛膜促性腺激... 目的 :为探讨抗生殖免疫抗体与不明原因反复自然流产的关系。方法 :采用ELISA法检测 5 2例不明原因反复自然流产(流产组 )血清抗精子抗体 (AsAb)、抗子宫内膜抗体 (EmAb)、抗卵巢抗体 (AovAb)、抗心磷脂抗体 (AcAb)和抗绒毛膜促性腺激素抗体 (AhcGAb)的含量。结果 :流产组AsAb阳性 2 6 .92 % ,EmAb阳性 4 2 .30 % ,AovAb阳性 30 .76 % ,AcA阳性 4 6 .15 %和Ahc GAb阳性 4 8.0 7% ;流产组的各项抗生殖免疫抗体检出率均明显高于对照组。结论 :以上 5种抗生殖免疫抗体可干扰卵的发育成熟、排卵、受精、胚泡着床和胚胎发育等过程。抗生殖免疫抗体与不明原因反复自然流产关系十分密切。 展开更多
关键词 抗生殖免疫抗体 不明原因 反复自然流产 ASAB阳性 抗子宫内膜抗体 对照组 抗卵巢抗体 育成 成熟 排卵
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改良的火棉胶切片技术 被引量:7
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作者 张苏 陈永珍 朱旻 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期255-255,260,共2页
火棉胶切片方法在组织学上是一种比较传统的方法,在神经学和系统解剖学的制片中也是常用的方法之一,有着诸多的优点。火棉胶切片能减少组织的收缩和硬化,减低组织破碎和分离,保持组织原有的结构和形态完整,还能展示较大较厚的组织... 火棉胶切片方法在组织学上是一种比较传统的方法,在神经学和系统解剖学的制片中也是常用的方法之一,有着诸多的优点。火棉胶切片能减少组织的收缩和硬化,减低组织破碎和分离,保持组织原有的结构和形态完整,还能展示较大较厚的组织切片。对于较大的较坚硬的组织或比较脆弱易于松散的组织和易于塌陷的器官等的制作,其优越性是石蜡切片所不能替代的。本文报告用改良的火棉胶切片技术制作人子宫切片,操作更简便易行,且切片完整、各层结构清楚。 展开更多
关键词 火棉胶切片技术 改良 组织学 系统解剖学 切片方法 组织切片 石蜡切片 神经学
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抗生殖免疫抗体与女性不孕的关系 被引量:7
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作者 陈永珍 朱旻 张苏 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期609-610,共2页
在女性不孕症的病因中,目前认为免疫因素尤为重要.其中直接干扰生殖过程的抗生殖抗体有抗精子抗体(AsAb)、抗子宫内膜抗体(EmAb)、抗卵巢抗体(AovAb)、抗绒毛膜促性腺激素抗体(AhCGAb)和抗心磷脂抗体(AcA)等.本研究通过用免疫酶联吸附试... 在女性不孕症的病因中,目前认为免疫因素尤为重要.其中直接干扰生殖过程的抗生殖抗体有抗精子抗体(AsAb)、抗子宫内膜抗体(EmAb)、抗卵巢抗体(AovAb)、抗绒毛膜促性腺激素抗体(AhCGAb)和抗心磷脂抗体(AcA)等.本研究通过用免疫酶联吸附试验(ELISA法),测定女性不孕症患者血清中抗生殖免疫抗体的含量变化,探讨与不孕症患者的关系,为临床上女性不孕症的诊断治疗提供理论依据. 展开更多
关键词 抗生殖免疫抗体 女性 不孕 抗精子抗体 抗子宫内膜抗体 免疫酶联吸附试验
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