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人去唾液酸糖蛋白受体单克隆抗体制备及其初步应用被引量：2: 1; 作者李军陈磊 +3 位作者孙斌张妤钱海华殷正丰《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1055-1060,共6页; 目的制备人去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)的小鼠单克隆抗体,并应用该抗体检测ASGPR在细胞系和组织中的表达。方法对ASGPR H1大亚基进行序列分析,选取ASGPR1全长序列制备免疫原。通过RT-PCR合成ASGPR1cDNA,构建ASGPR1表达重组载体,在E.coli ... 展开更多; 关键词去唾液酸糖蛋白受体单克隆抗体肝肿瘤流式细胞术免疫组织化学; 在线阅读下载PDF 职称材料

快速大容量尾静脉注射法构建循环肝癌细胞肝转移小鼠模型被引量：2: 2; 作者时志龙孙斌 +3 位作者陈磊钱海华张孝峰殷正丰《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期574-577,共4页; 目的:通过快速大容量尾静脉注射方法构建循环肝癌细胞肝内复发转移小鼠模型。方法:40只C57BL/6J小鼠采用随机数字表法随机分为对照组和实验组(20只/组),对照组采用传统的缓慢小容量尾静脉注射法(2×10^(6)个肝癌Hepa1-6细胞/0.2 ml,... 展开更多; 关键词循环肝癌细胞 Hepa1-6细胞肝转移快速大容量尾静脉注射动物模型; 在线阅读下载PDF 职称材料

组蛋白泛素化修饰及其在DNA损伤应答中的作用被引量：6: 3; 作者张卿义张樱子 +2 位作者沈凯张舒羽曹建平《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期29-40,共12页; 泛素化修饰是真核生物细胞内重要的翻译后修饰类型,通过调节蛋白质活性、稳定性和亚细胞定位广泛参与细胞内各项信号传导与代谢过程,对维持正常生命活动具有重要意义。组蛋白作为染色质中主要的蛋白成分,与DNA复制转录、修复等行为密切... 展开更多; 关键词组蛋白泛素化修饰 DNA损伤应答串扰; 在线阅读下载PDF 职称材料

中期因子诱导肝癌细胞Hep3B抵抗失巢凋亡被引量：1: 4; 作者赵琳琳翟蓓蓓 +4 位作者孙斌陈磊钱海华施乐华殷正丰《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期565-568,共4页; 目的:探讨肝素结合分子中期因子(midkine,MK)对肝癌细胞Hep3B抵抗失巢凋亡的影响。方法:采用悬浮培养法建立人肝癌来源细胞系Hep3B失巢凋亡模型,以不同质量浓度(10、50、100 ng/ml)MK或PBS(对照组)处理失巢培养的肝癌细胞Hep3B,采用流... 展开更多; 关键词肝癌 HEP3B细胞中期因子失巢凋亡凋亡 BCL-2 CASPASE-3; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人去唾液酸糖蛋白受体单克隆抗体制备及其初步应用被引量：2: 1; 作者李军陈磊孙斌张妤钱海华殷正丰; 机构苏州大学医学部临床医学院第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤研究室; 出处《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1055-1060,共6页; 基金国家传染病重大专项课题(2012ZX10002012-010) 国家高技术研究发展计划("863"计划 +2 种基金 2007AA02Z461) 国家自然科学基金(81172207 81272669)~~; 文摘目的制备人去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)的小鼠单克隆抗体,并应用该抗体检测ASGPR在细胞系和组织中的表达。方法对ASGPR H1大亚基进行序列分析,选取ASGPR1全长序列制备免疫原。通过RT-PCR合成ASGPR1cDNA,构建ASGPR1表达重组载体,在E.coli BL21中表达后纯化,获得目的抗原。应用传统融合杂交瘤技术制备小鼠单克隆抗体,常规检测单抗亚类和效价,竞争抑制实验鉴定单抗特异性。用流式细胞术和免疫组织化学法分别检测ASGPR在多种肝源性与非肝源性细胞系以及多种肝组织中的表达。结果制备的单克隆抗体亚型为IgG1,效价达112 800。竞争抑制实验结果显示该单抗具有很好的ASGPR结合特异性,而且识别的肽段位于ASGPR胞外段。流式细胞术检测结果显示,ASGPR不同程度地表达于肝源性细胞系,但不表达于非肝源性细胞系。免疫组织化学检测结果显示,ASGPR专一性表达于正常肝组织和肝癌组织,在肝癌组织的表达与分化程度有关,高分化肝癌中的阳性率高于低分化肝癌(75.0%vs 28.6%,P<0.05)。结论成功制备高特异性人ASGPR小鼠单克隆抗体,适用于用流式细胞术和免疫组织化学法检测ASGPR表达,可用于临床病理鉴定原发性肝癌与转移性肝癌。; 关键词去唾液酸糖蛋白受体单克隆抗体肝肿瘤流式细胞术免疫组织化学; Keywords asialoglycoprotein receptor monoclonal antibodies liver neoplasms flow cytometry immunohistochemistry; 分类号 R392.116 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名快速大容量尾静脉注射法构建循环肝癌细胞肝转移小鼠模型被引量：2: 2; 作者时志龙孙斌陈磊钱海华张孝峰殷正丰; 机构苏州大学医学部临床医学院第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤研究室; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期574-577,共4页; 基金国家传染病重大专项课题资助项目(No.2012ZX10002012-10) 国家自然科学基金资助项目(No.81272669,No.81301830); 文摘目的:通过快速大容量尾静脉注射方法构建循环肝癌细胞肝内复发转移小鼠模型。方法:40只C57BL/6J小鼠采用随机数字表法随机分为对照组和实验组(20只/组),对照组采用传统的缓慢小容量尾静脉注射法(2×10^(6)个肝癌Hepa1-6细胞/0.2 ml,30 s内注射完毕),实验组采用改良的快速大容量尾静脉注射法(2×10^(6)个肝癌Hepa1-6细胞/2 ml,5 s内注射完毕)构建循环肝癌细胞肝内复发转移小鼠模型。4周后摘取肝、肺、肾、脾组织并行H-E染色,大体和镜下观察肝脏、肺脏、脾脏和肾脏的成瘤情况。结果:对照组小鼠只在肺脏有转移灶形成,成瘤率为95%(19/20),肝脏、肾脏、脾脏未见有转移灶形成。实验组小鼠在肝脏和肺脏同时形成转移灶,肺脏成瘤率为94.7%(18/19),肝脏成瘤率为100%(19/19),脾脏、肾脏未见转移灶形成。结论:快速大容量尾静脉注射法注射循环肝癌细胞构建的小鼠模型可以模拟肝癌根治性切除后残留的循环肝癌细胞导致早期肝癌肝内复发转移的过程。; 关键词循环肝癌细胞 Hepa1-6细胞肝转移快速大容量尾静脉注射动物模型; Keywords circulating hepatocellar carcinoma cell Hepa1-6 liver metastases rapid and vast tail vein injection animal model; 分类号 R735.7 [医药卫生—肿瘤] R730.2 [医药卫生—肿瘤] R73-3 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名组蛋白泛素化修饰及其在DNA损伤应答中的作用被引量：6: 3; 作者张卿义张樱子沈凯张舒羽曹建平; 机构苏州大学医学部第一临床医学院苏州大学医学部放射医学与防护学院; 出处《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期29-40,共12页; 基金国家级大学生创新创业训练计划(编号:201610285039Z 201610285045Z)资助~~; 文摘泛素化修饰是真核生物细胞内重要的翻译后修饰类型,通过调节蛋白质活性、稳定性和亚细胞定位广泛参与细胞内各项信号传导与代谢过程,对维持正常生命活动具有重要意义。组蛋白作为染色质中主要的蛋白成分,与DNA复制转录、修复等行为密切相关,是研究翻译后修饰的热点。DNA损伤后,组蛋白泛素化修饰通过调节核小体结构、激活细胞周期检查点、影响修复因子的招募与装配等诸多途径参与损伤应答。同时,组蛋白泛素化修饰还能调节其他位点翻译后修饰,并通过这种串扰(crosstalk)作用调节DNA损伤应答。本文介绍了组蛋白泛素化修饰的主要位点和相关组分(包括E3连接酶、去泛素化酶与效应分子),以及这些修饰作用共同编译形成的信号网络在DNA损伤应答中的作用,最后总结了目前该领域研究所面临的一些问题,以期为科研人员进一步探索组蛋白密码在DNA损伤应答中的作用提供参考。; 关键词组蛋白泛素化修饰 DNA损伤应答串扰; Keywords histone ubiquitylation DNA damage response(DDR) crosstalk; 分类号 Q75 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名中期因子诱导肝癌细胞Hep3B抵抗失巢凋亡被引量：1: 4; 作者赵琳琳翟蓓蓓孙斌陈磊钱海华施乐华殷正丰; 机构苏州大学医学部临床医学院肿瘤学系第二军医大学东方肝胆外科医院分子肿瘤研究室第二军医大学东方肝胆外科医院肝外四科; 出处《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期565-568,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.81272669 No.81272668) 国家传染病重大专项课题资助项目(No.2012ZX10002012-10)~~; 文摘目的:探讨肝素结合分子中期因子(midkine,MK)对肝癌细胞Hep3B抵抗失巢凋亡的影响。方法:采用悬浮培养法建立人肝癌来源细胞系Hep3B失巢凋亡模型,以不同质量浓度(10、50、100 ng/ml)MK或PBS(对照组)处理失巢培养的肝癌细胞Hep3B,采用流式细胞术检测Hep3B细胞的凋亡,采用Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2和caspase-3的表达。结果:随着悬浮培养时间的延长,肝癌细胞Hep3B失巢凋亡率逐渐升高,培养72 h后悬浮培养的Hep3B细胞凋亡率显著高于贴壁培养的Hep3B细胞凋亡率[(38.76±4.23)%vs(6.76±1.43)%,P<0.01]。不同质量浓度MK处理24 h后,悬浮培养Hep3B细胞的凋亡率均明显低于对照组,且与MK的浓度呈负相关关系(r=0.951,P=0.049);同时,MK处理后Hep3B细胞内抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显增加,而促凋亡蛋白caspase-3则明显下降。结论:MK可能通过上调Bcl-2蛋白表达和下调caspase-3蛋白的表达来提高肝癌细胞Hep3B在失巢状态下抵抗凋亡的能力。; 关键词肝癌 HEP3B细胞中期因子失巢凋亡凋亡 BCL-2 CASPASE-3; Keywords hepatocellular carcinoma Hep3B cell midkine （MK） anoikis apoptosis Bcl-2 caspase-3; 分类号 R735.7 [医药卫生—肿瘤] R730.54 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人去唾液酸糖蛋白受体单克隆抗体制备及其初步应用	李军陈磊孙斌张妤钱海华殷正丰	《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	快速大容量尾静脉注射法构建循环肝癌细胞肝转移小鼠模型	时志龙孙斌陈磊钱海华张孝峰殷正丰	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心	2014	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	组蛋白泛素化修饰及其在DNA损伤应答中的作用	张卿义张樱子沈凯张舒羽曹建平	《遗传》 CAS CSCD 北大核心	2019	6	在线阅读下载PDF 职称材料
4	中期因子诱导肝癌细胞Hep3B抵抗失巢凋亡	赵琳琳翟蓓蓓孙斌陈磊钱海华施乐华殷正丰	《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心	2013	1	在线阅读下载PDF 职称材料