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转染人CXCR4细胞株的构建及其生物学功能的研究
被引量：
1
1
作者
周时勇
杨明峰
+3 位作者
王雪峰
于葛华
成中芹
张学光
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期427-429,432,共4页
目的:构建稳定表达人CXCR4基因的L929细胞株,分析CXCR4分子对转基因细胞迁移能力的影响。方法:TRIzol一步法抽提人外周血单个核细胞(PBMC)总RNA,RT-PCR扩增出CXCR4基因,双酶切装入逆转录病毒载体pEGZ-Term,与辅助病毒载体用脂质体法共...
目的:构建稳定表达人CXCR4基因的L929细胞株,分析CXCR4分子对转基因细胞迁移能力的影响。方法:TRIzol一步法抽提人外周血单个核细胞(PBMC)总RNA,RT-PCR扩增出CXCR4基因,双酶切装入逆转录病毒载体pEGZ-Term,与辅助病毒载体用脂质体法共转染包装细胞293T,用其培养上清感染L929细胞72h后,经Zeocin筛选出稳定表达CXCR4分子的L929细胞株;利用微孔隔离小室检测转人CXCR4基因的L929细胞在SDF-1α作用下的迁移能力。结果:构建含CXCR4基因的重组逆转录病毒载体,经转染包装细胞293T后,筛选获得能稳定高表达人CXCR4蛋白的L929转基因细胞,转入人CXCR4基因的L929细胞在SDF-1α作用下介导迁移。结论:成功构建转染人CXCR4细胞株,为肿瘤迁移模型的研究和鼠抗人CXCR4mAb的制备打下基础。
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关键词
CXCR4
逆转录病毒
稳定表达
迁移
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职称材料
题名
转染人CXCR4细胞株的构建及其生物学功能的研究
被引量：
1
1
作者
周时勇
杨明峰
王雪峰
于葛华
成中芹
张学光
机构
苏州大学医学生物技术研究所江苏省干细胞研究重点实验室
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期427-429,432,共4页
基金
国家自然科学重点资助项目(30330540)
江苏省干细胞重点实验室基金(2005年度)
文摘
目的:构建稳定表达人CXCR4基因的L929细胞株,分析CXCR4分子对转基因细胞迁移能力的影响。方法:TRIzol一步法抽提人外周血单个核细胞(PBMC)总RNA,RT-PCR扩增出CXCR4基因,双酶切装入逆转录病毒载体pEGZ-Term,与辅助病毒载体用脂质体法共转染包装细胞293T,用其培养上清感染L929细胞72h后,经Zeocin筛选出稳定表达CXCR4分子的L929细胞株;利用微孔隔离小室检测转人CXCR4基因的L929细胞在SDF-1α作用下的迁移能力。结果:构建含CXCR4基因的重组逆转录病毒载体,经转染包装细胞293T后,筛选获得能稳定高表达人CXCR4蛋白的L929转基因细胞,转入人CXCR4基因的L929细胞在SDF-1α作用下介导迁移。结论:成功构建转染人CXCR4细胞株,为肿瘤迁移模型的研究和鼠抗人CXCR4mAb的制备打下基础。
关键词
CXCR4
逆转录病毒
稳定表达
迁移
Keywords
CXCR4
retrovirus
stable expression
migration
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
转染人CXCR4细胞株的构建及其生物学功能的研究
周时勇
杨明峰
王雪峰
于葛华
成中芹
张学光
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2006
1
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