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两株鼠抗人PD-1单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定 被引量：6
1
作者 明志君 吴海竞 +3 位作者 张光波 胡玉敏 邱玉华 张学光 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期501-503,506,共4页
目的:制备鼠抗人PD-1单克隆抗体(mAb)及鉴定其生物学特性。方法:以基因转染细胞PD-1/L929为免疫原,免疫BALB/c小鼠;采用淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,经选择性克隆化培养及流式细胞术(FCM)分析,筛选分泌鼠抗人PD-1分子mAb的杂交瘤细... 目的:制备鼠抗人PD-1单克隆抗体(mAb)及鉴定其生物学特性。方法:以基因转染细胞PD-1/L929为免疫原,免疫BALB/c小鼠;采用淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,经选择性克隆化培养及流式细胞术(FCM)分析,筛选分泌鼠抗人PD-1分子mAb的杂交瘤细胞株;采用Ig亚型快速定性试纸法、染色体核型分析、Western blot、竞争结合抑制试验及肿瘤细胞株测定等方法对mAb进行生物学特性鉴定。结果:获得了2株持续稳定分泌鼠抗人PD-1mAb的杂交瘤细胞株,命名为1F2和5F10。对其生物学特性的鉴定结果表明,均为条带相对分子质量在(Mr)55000左右的免疫球蛋白,具有不同的PD-1结合位点;1F2mAb可识别SKHep-1和7721细胞株表面的PD-1分子,而5F10可识别Raji细胞株的PD-1分子。结论:成功获得了2株鼠抗人PD-1杂交瘤及其分泌的mAb。 展开更多
关键词 PD-1 杂交瘤 单克隆抗体
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