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槲皮素下调hTERT表达对肝癌HepG2细胞生长影响研究被引量：7: 1; 作者宋建宁汤利华 +3 位作者康楷胡赞斓 Tong-Chuan He 李铁军《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第4期128-131,共4页; 目的观察槲皮素对肝癌HepG2细胞生长及对hTERT基因表达的影响。方法以台盼蓝拒染法计数肝癌细胞的生长抑制率,透射电镜从形态变化上了解凋亡的发生,流式细胞术检测细胞周期变化,western-blot、RT-PCR检测hTERT基因表达改变,PCR-TRAP法... 展开更多; 关键词槲皮素肝癌HEPG2细胞凋亡 HTERT; 在线阅读下载PDF 职称材料

双氢青蒿素对人骨肉瘤细胞株143B增殖和凋亡的作用被引量：16: 2; 作者刘跃亮罗进勇 +2 位作者张彦何通川曾照芳《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1719-1723,共5页; 目的观察双氢青蒿素(dihydroarteminin,DHA)对人骨肉瘤细胞143B的增殖和凋亡的影响以及可能的机制。方法体外培养人骨肉瘤细胞株143B;MTT比色法和克隆形成实验检测不同浓度DHA对骨肉瘤细胞存活与克隆形成能力的影响。Hoechst 33258染色... 展开更多; 关键词双氢青蒿素人骨肉瘤细胞细胞增殖细胞凋亡 WNT信号通路 Β-CATENIN; 在线阅读下载PDF 职称材料

人S100A6-GST融合蛋白的原核表达和纯化被引量：8: 3; 作者苗静琨赖天霞 +5 位作者左国伟李星星王嫣蒋薇何通川周兰《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第10期1009-1012,共4页; 目的:制备人S100A6-GST融合蛋白,为研究人S100A6((hS100A6)蛋白的功能奠定基础。方法:从pHAHA-hS100A6中双酶切获取hS100A6基因,亚克隆至原核表达载体pGST-moluc,构建pGST-moluc-hS100A6,转化BL21后,IPTG诱导重组菌表达hS100A6蛋白,SDS-... 展开更多; 关键词人S100A6基因融合蛋白原核表达蛋白纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

外源性S100A6对人骨肉瘤细胞株U2OS的增殖、凋亡及β-catenin表达的影响被引量：10: 4; 作者陈英华卫佳 +5 位作者李星星吴丽美马闻张彦何通川周兰《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期817-821,共5页; 目的:探讨外源性S100A6对骨肉瘤细胞株U2OS的生物学作用及其可能机制。方法:MTT法检测S100A6对U2OS细胞增殖的影响及浓度依赖性,台盼蓝拒染法计数活细胞检测S100A6对U2OS增殖作用的时间依赖性,Hoechst染色检测细胞凋亡,Westernblot法及... 展开更多; 关键词 S100A6 骨肉瘤 β—catenin; 在线阅读下载PDF 职称材料

HBX基因重组腺病毒载体的构建被引量：6: 5; 作者冯涛何通川宋文鑫《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2004年第3期273-275,278,共4页; 目的 :构建携HBX基因的腺病毒载体 ,为进一步研究HBX基因的功能 ,为阐明HBV感染导致肝癌的机制研究建立基础。方法 :采用PCR技术从HBV全基因组DNA中扩增HBX基因 ;将HBX基因亚克隆至质粒 pHAHA ,构建质粒 pHAHA-HBX ,酶切pHAHA -HBX质粒 ... 展开更多; 关键词基因 HHX HBV 腺病毒载体乙型肝炎; 在线阅读下载PDF 职称材料

人S100A2-GST融合蛋白原核表达和纯化被引量：3: 6; 作者卫佳王胜 +6 位作者苗静琨陈英华李星星吴丽美左国伟何通川周兰《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第12期1427-1430,共4页; 目的:制备人S100A2-GST融合蛋白(Human S100A2-GST fusion protein,hS100A2-GST),为进一步研究人hS100A2蛋白的功能及其与其它因子或系统的相互作用奠定基础。方法:从pHAHA-hS100A2中双酶切获取hS100A2基因,亚克隆至原核表达载体pGST-mo... 展开更多; 关键词人S100A2-GST融合蛋白诱导表达蛋白纯化蛋白鉴定; 在线阅读下载PDF 职称材料

Wnt/β-连环蛋白信号途径活性的分析系统的建立被引量：2: 7; 作者冯涛周兰何通川《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2004年第4期413-416,共4页; 目的 :建立Wnt/ β -连环蛋白信号途径功能活性的分析系统。方法 :首先构建一个表达 β -连环蛋白 -绿色荧光蛋白的融合蛋白的载体 ,pCMV -bcGFP ;再用之转染HEK2 93细胞 ,用G4 18和LiCl筛选出稳定表达该融合蛋白的细胞 ,克隆建株并鉴... 展开更多; 关键词 Wnt/β-连环蛋白信号途径 β-连环蛋白-绿色荧光蛋白功能分析系统; 在线阅读下载PDF 职称材料

HBx基因重组逆转录病毒载体的构建及表达: 8; 作者吴明军毕杨 +3 位作者黄佳祎赵迎泽何通川冯涛《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第6期568-570,587,共4页; 目的:构建携带HBx基因的重组逆转录病毒载体,为进一步研究HBx基因在HBV相关性HCC(原发性肝癌)发病机制中的作用以及建立肝癌动物模型奠定基础。方法:根据基因库中已公布的HBx序列设计引物,采用PCR技术从HBx腺病毒质粒中扩增出HBx基因。... 展开更多; 关键词 HBX基因逆转录病毒载体 PCR WESTERN BLOTTING; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名槲皮素下调hTERT表达对肝癌HepG2细胞生长影响研究被引量：7: 1; 作者宋建宁汤利华康楷胡赞斓 Tong-Chuan He 李铁军; 机构重庆市第九人民医院重庆医科大学附属第二医院芝加哥大学医学中心分子肿瘤研究室重庆医科大学附属第一医院; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 2007年第4期128-131,共4页; 基金国家杰出青年基金(30225026); 文摘目的观察槲皮素对肝癌HepG2细胞生长及对hTERT基因表达的影响。方法以台盼蓝拒染法计数肝癌细胞的生长抑制率,透射电镜从形态变化上了解凋亡的发生,流式细胞术检测细胞周期变化,western-blot、RT-PCR检测hTERT基因表达改变,PCR-TRAP法检测端粒酶活性。结果台盼蓝拒染法计数显示槲皮素抑制肝癌HepG2细胞增殖的作用明显,且呈浓度和时间依赖性,槲皮素处理48h后的Ic50为25.5μm。形态学检测显示出细胞凋亡的特征变化,流式细胞仪检测表明经10～20μm/L的槲皮素处理,肝癌HepG2细胞周期阻滞于G0/G1期,且HepG2细胞hTERT蛋白和mRNA表达降低,端粒酶活性受抑制。结论槲皮素能抑制肝癌细胞的生长,呈时间、剂量依赖性,能诱导HepG2细胞发生凋亡,其抑制增生与诱导凋亡的机制可能与下调hTERT基因表达,抑制端粒酶活性,破坏端粒稳定性有关。; 关键词槲皮素肝癌HEPG2细胞凋亡 HTERT; Keywords Quercetin Hepatocarcinoma HepG2 cell Apoptosis hTERT gene; 分类号 R735.7 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名双氢青蒿素对人骨肉瘤细胞株143B增殖和凋亡的作用被引量：16: 2; 作者刘跃亮罗进勇张彦何通川曾照芳; 机构重庆医科大学检验医学院美国芝加哥大学医学中心分子肿瘤学研究室; 出处《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1719-1723,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(No 31071304,81172017); 文摘目的观察双氢青蒿素(dihydroarteminin,DHA)对人骨肉瘤细胞143B的增殖和凋亡的影响以及可能的机制。方法体外培养人骨肉瘤细胞株143B;MTT比色法和克隆形成实验检测不同浓度DHA对骨肉瘤细胞存活与克隆形成能力的影响。Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡的形态变化。构建β-Catenin荧光素酶报告基因(β-Catenin-Luc,p-Top)检测DHA作用143B后细胞内β-Catenin活性变化。不同浓度的DHA作用后,Western blot检测与细胞增殖(如PC-NA、Cyclin D1、c-Myc)、凋亡(如Bad、Bcl-2、Caspase-3)密切相关的标志物蛋白质表达变化。结果 DHA作用于143B细胞24 h后,MTT结果显示143B细胞的增殖活性受到明显抑制,且其克隆形成能力减弱(P<0.05),在DHA浓度达35μmol.L-1时,抑制效率最明显。Western blot结果显示PC-NA表达下调;而促凋亡蛋白Bad和Caspase-3表达上调,Bcl-2蛋白表达明显减弱。结论双氢青蒿素具有较明显的抑制人骨肉瘤细胞的增殖且促进其凋亡的作用,可能通过下调细胞增殖相关蛋白PCNA、Bcl-2和上调促凋亡蛋白Bad和Caspase-3,启动凋亡程序,致143B细胞发生凋亡。; 关键词双氢青蒿素人骨肉瘤细胞细胞增殖细胞凋亡 WNT信号通路 Β-CATENIN; Keywords dihydroarteminin（DHA） human-osteosarcoma proliferation apoptosis Wnt signaling pathway β-Catenin; 分类号 R739.7 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人S100A6-GST融合蛋白的原核表达和纯化被引量：8: 3; 作者苗静琨赖天霞左国伟李星星王嫣蒋薇何通川周兰; 机构重庆医科大学生物医学工程系美国芝加哥大学医学中心分子肿瘤研究室; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第10期1009-1012,共4页; 基金国家自然科学基金(30340039) 2003年教育部"春晖计划"科研启动经费资助项目 2004年重庆市留学回国人员启动基金。; 文摘目的:制备人S100A6-GST融合蛋白,为研究人S100A6((hS100A6)蛋白的功能奠定基础。方法:从pHAHA-hS100A6中双酶切获取hS100A6基因,亚克隆至原核表达载体pGST-moluc,构建pGST-moluc-hS100A6,转化BL21后,IPTG诱导重组菌表达hS100A6蛋白,SDS-PAGE及WesternBlot鉴定表达产物,Glutathion-Sepharose4B球珠分离纯化。结果:重组菌株表达出与理论预测值相符的一个约36ku的hS100A6融合蛋白,纯化后的融合蛋白的产量为3mg/L菌液,纯度约92%。结论:成功构建了hS100A6-GST原核表达质粒,在大肠杆菌中表达纯化后得到较高浓度的hS100A6-GST融合蛋白,为hS100A6蛋白功能的研究打下了基础。; 关键词人S100A6基因融合蛋白原核表达蛋白纯化; Keywords hS 100A6 gene Fusion protein Prokaryotic expression Protein purification; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名外源性S100A6对人骨肉瘤细胞株U2OS的增殖、凋亡及β-catenin表达的影响被引量：10: 4; 作者陈英华卫佳李星星吴丽美马闻张彦何通川周兰; 机构重庆医科大学生物医学工程系、重庆市生物医学工程学重点实验室、重庆市超声医学工程重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地美国芝加哥大学医学中心分子肿瘤研究室; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期817-821,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(30772548); 文摘目的:探讨外源性S100A6对骨肉瘤细胞株U2OS的生物学作用及其可能机制。方法:MTT法检测S100A6对U2OS细胞增殖的影响及浓度依赖性,台盼蓝拒染法计数活细胞检测S100A6对U2OS增殖作用的时间依赖性,Hoechst染色检测细胞凋亡,Westernblot法及免疫细胞化学法检测细胞内β-catenin的表达变化。结果:S100A6作用3d时,浓度为30、100、300和1000μg/ml的重组S100A6(GST-S100A6)组的OD值分别比相应浓度的GST对照组的OD值减少20.5%、23.7%、32.2%和36.8%,P<0.05;蛋白浓度为100μg/ml时,GST-S100A6组的细胞数在前2d与GST组相似,第3、4、5d的细胞数分别降低到GST组的59%、46%、48%,P<0.05;GST-S100A6干预3d后细胞凋亡率增高3.16倍,P<0.01;免疫细胞化学法测得经GST-S100A6处理3d后β-catenin的平均光密度值比GST组增加22.9%,P<0.01;经携带S100A6基因的重组腺病毒(Ad-S100A6)处理3d后,Westernblot法检测细胞中β-catenin的校正灰度值为1.4204±0.1999,比对照组(Ad-GFP组,0.9996±0.1000)显著增高,P<0.01。结论:外源性S100A6能够抑制U2OS细胞的增殖、促进其凋亡和增加U2OS细胞中β-catenin水平。; 关键词 S100A6 骨肉瘤 β—catenin; Keywords S 100A6 Osteosarcoma β-catenin; 分类号 R730.231 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HBX基因重组腺病毒载体的构建被引量：6: 5; 作者冯涛何通川宋文鑫; 机构重庆医科大学基础医学院生物化学教研室芝加哥大学医学中心分子肿瘤研究室; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2004年第3期273-275,278,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目( 3 0 3 712 74); 文摘目的 :构建携HBX基因的腺病毒载体 ,为进一步研究HBX基因的功能 ,为阐明HBV感染导致肝癌的机制研究建立基础。方法 :采用PCR技术从HBV全基因组DNA中扩增HBX基因 ;将HBX基因亚克隆至质粒 pHAHA ,构建质粒 pHAHA-HBX ,酶切pHAHA -HBX质粒 ,将HAHA -HBX片段克隆到腺病毒载体 pAd -Track -CMV中 ,得到 pAdTrack -CMV -HBX ,同时与 pAdEasy - 1共转染 2 93细胞 ,确定转染效率。检测培养上清病毒中HBX的存在。结果 :将PCR扩增HBX片段成功克隆到腺病毒载体中 ,并经序列分析证实 ;建立了产病毒细胞株 ,证实重组病毒中含有HBX基因。结论; 关键词基因 HHX HBV 腺病毒载体乙型肝炎; Keywords Gene HBX HBV Adenovirus vector Hepatitis B; 分类号 Q781 [生物学—分子生物学] R512.62 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人S100A2-GST融合蛋白原核表达和纯化被引量：3: 6; 作者卫佳王胜苗静琨陈英华李星星吴丽美左国伟何通川周兰; 机构重庆医科大学生物医学工程系美国芝加哥大学医学中心分子肿瘤研究室; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2008年第12期1427-1430,共4页; 基金国家自然科学基金(30340039) 教育部“春晖计划”科研启动经费资助项目(2003年) 2004年重庆市留学回国人员启动基金; 文摘目的:制备人S100A2-GST融合蛋白(Human S100A2-GST fusion protein,hS100A2-GST),为进一步研究人hS100A2蛋白的功能及其与其它因子或系统的相互作用奠定基础。方法:从pHAHA-hS100A2中双酶切获取hS100A2基因,亚克隆至原核表达载体pGST-moluc,构建pGST-moluc-hS100A2,转化BL21后酶切鉴定,IPTG诱导重组菌表达融合蛋白hS100A2-GST,再经过Glutathion-Sepharose4B球珠分离纯化、SDS-PAGE及Western Blot鉴定,Bradford法蛋白定量。结果:XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切该重组质粒后获得2个片段,分别约300bp和5kb,提示pGST-moluc-hS100A2构建正确;重组菌株经过IPTG诱导后,表达分子量约为36kD的蛋白,产率达5mg/L菌液;Glutathion-Sepharose4B球珠纯化后,该融和蛋白纯度达92%;Western Blot显示该蛋白可以被S100A2的抗体特异识别,证实其为hS100A2-GST融合蛋白。结论:成功构建了hS100A2-GST原核表达质粒pGST-moluc-hS100A2;该质粒可在大肠杆菌中诱导表达hS100A2-GST融合蛋白,产率高;应用Glutathion-Sepharose4B球珠可获得纯度达92%的该蛋白。为后续有关hS100A2的研究打下了基础。; 关键词人S100A2-GST融合蛋白诱导表达蛋白纯化蛋白鉴定; Keywords HumanS100A2-GST fusion protein Induced expression Protein purification Protein identification; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Wnt/β-连环蛋白信号途径活性的分析系统的建立被引量：2: 7; 作者冯涛周兰何通川; 机构重庆医科大学基础医学院生物化学教研室重庆医科大学生物医学工程系芝加哥大学医学中心分子肿瘤研究室; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2004年第4期413-416,共4页; 基金国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 3 40 0 3 9) 教育部春晖计划项目资助 ( 0 3 ); 文摘目的 :建立Wnt/ β -连环蛋白信号途径功能活性的分析系统。方法 :首先构建一个表达 β -连环蛋白 -绿色荧光蛋白的融合蛋白的载体 ,pCMV -bcGFP ;再用之转染HEK2 93细胞 ,用G4 18和LiCl筛选出稳定表达该融合蛋白的细胞 ,克隆建株并鉴定。结果 :成功获得稳定表达该融合蛋白的细胞株 ,即 2 93-bc -GFP细胞株 ;在荧光显微镜下以及蛋白质印迹分析证实 :所获得的 2 93-bc -GFP细胞株表达该融合蛋白的基础水平极低 ;用Wnt1和LiCl处理后可以明显地使该融合蛋白在细胞内的水平升高。结论 :上述结果提示该分析系统是以Wnt依赖的方式、受 β -连环蛋白调节的。该分析系统可以用作一个功能报告系统 ,以鉴定肿瘤发生中导致 β-连环蛋白信号途径失调的潜在的上游因子 ,也同样可以用于筛选那些特异抑制人类肿瘤中; 关键词 Wnt/β-连环蛋白信号途径 β-连环蛋白-绿色荧光蛋白功能分析系统; Keywords Wnt/β-catenin signaling pathway β-catenin and GFP fusion protein Functional assay system; 分类号 Q781 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HBx基因重组逆转录病毒载体的构建及表达: 8; 作者吴明军毕杨黄佳祎赵迎泽何通川冯涛; 机构重庆医科大学基础医学研究所美国芝加哥大学医学中心分子肿瘤研究室重庆医科大学生物化学与分子生学教研室; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第6期568-570,587,共4页; 基金国家自然科学基金资助课题(NO30371274); 文摘目的:构建携带HBx基因的重组逆转录病毒载体,为进一步研究HBx基因在HBV相关性HCC(原发性肝癌)发病机制中的作用以及建立肝癌动物模型奠定基础。方法:根据基因库中已公布的HBx序列设计引物,采用PCR技术从HBx腺病毒质粒中扩增出HBx基因。将HBx基因克隆到逆转录病毒载体pSEB-HUS质粒中。酶切、PCR及测序鉴定后经脂质体介导转染L02细胞,Western Blotting检测HBx蛋白的表达。结果:PCR、酶切及测序鉴定证实目的基因正确克隆至逆转录病毒质粒pSEB-HUS中,目的基因序列与GENE BANK报道一致,转染L02细胞后荧光显微镜可观察到GFP的表达。Western Blotting检测可见HBx蛋白的表达。结论:成功构建HBx重组逆转录病毒载体。; 关键词 HBX基因逆转录病毒载体 PCR WESTERN BLOTTING; Keywords HBx gene Retroviral ector PCR Western Blotting; 分类号 Q781 [生物学—分子生物学] R512.62 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	槲皮素下调hTERT表达对肝癌HepG2细胞生长影响研究	宋建宁汤利华康楷胡赞斓 Tong-Chuan He 李铁军	《生物技术通报》 CAS CSCD	2007	7	在线阅读下载PDF 职称材料
2	双氢青蒿素对人骨肉瘤细胞株143B增殖和凋亡的作用	刘跃亮罗进勇张彦何通川曾照芳	《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心	2012	16	在线阅读下载PDF 职称材料
3	人S100A6-GST融合蛋白的原核表达和纯化	苗静琨赖天霞左国伟李星星王嫣蒋薇何通川周兰	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD	2007	8	在线阅读下载PDF 职称材料
4	外源性S100A6对人骨肉瘤细胞株U2OS的增殖、凋亡及β-catenin表达的影响	陈英华卫佳李星星吴丽美马闻张彦何通川周兰	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2009	10	在线阅读下载PDF 职称材料
5	HBX基因重组腺病毒载体的构建	冯涛何通川宋文鑫	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD	2004	6	在线阅读下载PDF 职称材料
6	人S100A2-GST融合蛋白原核表达和纯化	卫佳王胜苗静琨陈英华李星星吴丽美左国伟何通川周兰	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD	2008	3	在线阅读下载PDF 职称材料
7	Wnt/β-连环蛋白信号途径活性的分析系统的建立	冯涛周兰何通川	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD	2004	2	在线阅读下载PDF 职称材料
8	HBx基因重组逆转录病毒载体的构建及表达	吴明军毕杨黄佳祎赵迎泽何通川冯涛	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料