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体外沉默二牛龙牛儿基转移酶Ⅰ对舌癌细胞迁移和侵袭的影响
被引量:
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作者
陈正岗
王树人
+8 位作者
李敬华
韩金宏
王奇民
童磊
刘文君
杨芳
郭庆圆
郭大伟
王莹
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第6期576-582,共7页
目的应用RNA干扰技术,体外沉默二牛龙牛儿基转移酶Ⅰ(GGTase-Ⅰ),研究其在舌癌迁移、侵袭中的作用。方法登录Genebank确定人GGTase-Ⅰ基因序列,针对GGTase-Ⅰ的基因序列设计并构建3条si RNA,分别将RNA干扰组(GGTase-Ⅰsi RNA1、GGTase-...
目的应用RNA干扰技术,体外沉默二牛龙牛儿基转移酶Ⅰ(GGTase-Ⅰ),研究其在舌癌迁移、侵袭中的作用。方法登录Genebank确定人GGTase-Ⅰ基因序列,针对GGTase-Ⅰ的基因序列设计并构建3条si RNA,分别将RNA干扰组(GGTase-Ⅰsi RNA1、GGTase-Ⅰsi RNA2、GGTase-Ⅰsi RNA3)、阴性对照组(NC-si RNA)和空白对照组转染至舌癌细胞Cal-27,实时定量聚合酶链反应(q RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞转染后GGTase-Ⅰ、Rho A基因的m RNA、蛋白表达;选取沉默效率最高的一组si RNA作为实验组,蛋白质印迹法检测各组细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达,GST-pull down实验检测GTP-Rho A蛋白的表达,划痕实验检测细胞迁移能力变化,Transwell小室检测细胞侵袭能力变化。结果干扰后细胞的GGTase-Ⅰm RNA、蛋白表达明显下降(P<0.05),Rho A m RNA和蛋白表达无明显改变,MMP-2、MMP-9、GTP-Rho A的表达下降,迁移、侵袭能力明显下降(P<0.05)。结论抑制GGTase-Ⅰ表达,可降低舌癌细胞的迁移、侵袭能力,对GGTase-Ⅰ的深入研究可能为舌癌的治疗提供新的有效分子靶点。
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关键词
二牛龙牛儿基转移酶I
RHOA
舌癌
迁移
侵袭
基质金属蛋白酶-2
基质金属蛋白酶-9
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题名
体外沉默二牛龙牛儿基转移酶Ⅰ对舌癌细胞迁移和侵袭的影响
被引量:
1
1
作者
陈正岗
王树人
李敬华
韩金宏
王奇民
童磊
刘文君
杨芳
郭庆圆
郭大伟
王莹
机构
青岛市市立
医院
口腔科
上海交通大学医学院附属第九
人民医院
口腔
颌面外科
胶州市人民医院口腔科
青岛市市立
医院
中心实验室
烟台市
口腔
医院
青岛市市立
医院
耳鼻喉科
济南市第四
人民医院
口腔科
潍坊医学院
口腔
医学院
出处
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第6期576-582,共7页
基金
国家自然科学基金面上项目(81372908)
青岛市卫计委计划项目(2014-WJZD009,2013-WSZD011)~~
文摘
目的应用RNA干扰技术,体外沉默二牛龙牛儿基转移酶Ⅰ(GGTase-Ⅰ),研究其在舌癌迁移、侵袭中的作用。方法登录Genebank确定人GGTase-Ⅰ基因序列,针对GGTase-Ⅰ的基因序列设计并构建3条si RNA,分别将RNA干扰组(GGTase-Ⅰsi RNA1、GGTase-Ⅰsi RNA2、GGTase-Ⅰsi RNA3)、阴性对照组(NC-si RNA)和空白对照组转染至舌癌细胞Cal-27,实时定量聚合酶链反应(q RT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞转染后GGTase-Ⅰ、Rho A基因的m RNA、蛋白表达;选取沉默效率最高的一组si RNA作为实验组,蛋白质印迹法检测各组细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的表达,GST-pull down实验检测GTP-Rho A蛋白的表达,划痕实验检测细胞迁移能力变化,Transwell小室检测细胞侵袭能力变化。结果干扰后细胞的GGTase-Ⅰm RNA、蛋白表达明显下降(P<0.05),Rho A m RNA和蛋白表达无明显改变,MMP-2、MMP-9、GTP-Rho A的表达下降,迁移、侵袭能力明显下降(P<0.05)。结论抑制GGTase-Ⅰ表达,可降低舌癌细胞的迁移、侵袭能力,对GGTase-Ⅰ的深入研究可能为舌癌的治疗提供新的有效分子靶点。
关键词
二牛龙牛儿基转移酶I
RHOA
舌癌
迁移
侵袭
基质金属蛋白酶-2
基质金属蛋白酶-9
Keywords
geranylgeranyltransferase I
RhoA
tongue squamous cancer
migration
invasion
matrix metallo- proteinase-2
matrix metalloproteinase-9
分类号
R739.86 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
体外沉默二牛龙牛儿基转移酶Ⅰ对舌癌细胞迁移和侵袭的影响
陈正岗
王树人
李敬华
韩金宏
王奇民
童磊
刘文君
杨芳
郭庆圆
郭大伟
王莹
《华西口腔医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2017
1
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