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栀子大黄汤在酒精性肝病小鼠模型中的保护作用 被引量:3
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作者 侯逸文 张荣杰 +3 位作者 纪龙珊 李茜 高月求 李曼 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2023年第12期2873-2884,共12页
目的 阐明栀子大黄汤(ZZDHT)通过改善肝脏中性粒细胞的氧化应激治疗酒精性肝病(ALD)的作用。方法 (1)运用网络药理学方法筛选ZZDHT的化学成分及其对应的作用靶点,分析其治疗ALD的潜在靶点和相关功能通路。(2)使用非靶代谢组学技术检测ZZ... 目的 阐明栀子大黄汤(ZZDHT)通过改善肝脏中性粒细胞的氧化应激治疗酒精性肝病(ALD)的作用。方法 (1)运用网络药理学方法筛选ZZDHT的化学成分及其对应的作用靶点,分析其治疗ALD的潜在靶点和相关功能通路。(2)使用非靶代谢组学技术检测ZZDHT在小鼠血清和肝脏中代谢物变化情况,配制两倍中剂量浓度的ZZDHT予以灌胃,分别于灌胃后6个时间点(10 min、30 min、1 h、2 h、4 h、6 h)取小鼠血清和肝组织,混合进行后续质谱分析(用药组,18只)。对照组(18只)予以等量生理盐水灌胃。使用超高液相色谱技术,快速分离和鉴定ZZDHT在血清和肝组织中的代谢物,对ZZDHT有效成分进行验证。(3)8周龄C57BL/6J雄性小鼠随机均分为对照组、模型组、ZZDHT低剂量[ZZDHT(L)]组、ZZDHT中剂量[ZZDHT(M)]组、ZZDHT高剂量[ZZDHT(H)]组(每组10只),除对照组外,其余各组建立ALD小鼠模型(NIAAA模型小鼠),用药组在造模的同时分别进行ZZDHT低、中、高剂量的灌胃,对照组和模型组使用等量生理盐水灌胃。检测血清ALT、AST和TG的表达水平;PCR测得肝脏相关炎性、氧化应激和中性粒细胞指标基因表达水平;ELISA法测定血清中炎症和氧化应激相关指标;SOD、GSH-Px、MDA检测肝脏氧化应激水平;通过HE染色、MPO染色以及油红染色观察小鼠肝组织损伤、中性粒细胞浸润及脂质沉积情况。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 (1)通过筛选共得到ZZDHT的53个有效活性成分,227个靶点基因,ALD的靶点基因共8 685个,两者共同的靶点基因222个。核心通路包括interleukin-6 signaling、TNF signaling pathway等。(2)非靶代谢分析得出ZZDHT在小鼠肝脏中代谢物有225个,在血清中代谢物有227个,共同代谢物有126个。分析得到肝脏代谢物核心通路有glycerolipid metabolism、inflammatory mediator regulation of TRP channels等,血清代谢物核心通路有AMPK signaling pathway、Oxidative phosphorylation等,均与氧化应激和炎症相关通路有关。(3)与模型组相比,ZZDHT(L)、ZZDHT(M)、ZZDHT(H)组小鼠血清ALT、AST和TG水平均明显降低(P值均<0.05),ZZDHT(M)组小鼠肝组织Ly6g、Ncf1、Ncf2、IL-6、TNF-α、IL-1β、MDA、4-HNE、Gp91、P22水平均明显降低(P值均<0.05),SOD水平明显升高(P<0.05),ZZDHT(M)组小鼠血清4-HNE水平明显降低、GSH-Px水平明显升高(P值均<0.05)。ZZDHT(M)组小鼠肝脏中脂肪沉积和中性粒细胞浸润均明显改善(P值均<0.05)。结论 ZZDHT可显著改善NIAAA模型小鼠的氧化应激和炎症反应。 展开更多
关键词 肝疾病 酒精性 栀子大黄汤 氧化性应激 模型 动物
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基于关键细胞信号转导效应靶标建立抗肝纤维化中药的生物活性评价与质量控制新方法 被引量:2
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作者 薛静波 彭渊 +1 位作者 刘洪亮 刘成海 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2020年第4期1213-1218,共6页
中药质量是制约中医药发展的重要瓶颈,指纹图谱等基于成分分析的中药质控方法存在效应成分不明及与活性作用不符等局限,亟需发展基于生物活性评价的新方法。立足于扶正化瘀方抗肝纤维化的长期临床与药理研究积累,以及国际临床试验的重... 中药质量是制约中医药发展的重要瓶颈,指纹图谱等基于成分分析的中药质控方法存在效应成分不明及与活性作用不符等局限,亟需发展基于生物活性评价的新方法。立足于扶正化瘀方抗肝纤维化的长期临床与药理研究积累,以及国际临床试验的重要需求,本文提出以下假说:扶正化瘀存在抗肝纤维化的主要药理靶标群,药物对该靶标群基因转录活性的影响,可良好反映其抗肝纤维化药效。首先,本研究选择肝星状细胞、肝内皮细胞、肝细胞与巨噬细胞等4种细胞系,考察溶媒、作用浓度与时间等因素对扶正化瘀细胞效应的影响,建立扶正化瘀体外标准给药方法;其次,基于细胞信号通路,蛋白芯片与网络药理相结合发现扶正化瘀抗肝纤维化的关键药理靶标;最后,构建表征中药靶标基因转录活性的报告基因质粒与稳转细胞株,比较不同批次扶正化瘀对靶标的基因转录活性、细胞生物活性与模型动物肝纤维化的影响,并指纹图谱分析其成分。以建立抗肝纤维化中药的生物活性评价与质量控制新方法,促进中药产品质量提高与创新药物研发。 展开更多
关键词 中药质量控制 生物活性 细胞信号转导 扶正化瘀片 抗肝纤维化
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