鸡毒支原体LC株全基因组分析及中国流行株多位点序列分型分析

1

作者 方焕新 李琪 +6 位作者 宋子昂 温家明 顾嘉运 王占新 覃健萍 于岩飞 张炜 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第10期5095-5103,共9页

鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)感染可引起鸡慢性呼吸道疾病(CRD),影响饲料转化率、产蛋率、孵化率及健苗率,给全球家禽产业造成严重经济损失。本研究旨在分析LC分离株的基因组特性及生物学特征,探索国内流行规律。从孵化厂... 鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)感染可引起鸡慢性呼吸道疾病(CRD),影响饲料转化率、产蛋率、孵化率及健苗率,给全球家禽产业造成严重经济损失。本研究旨在分析LC分离株的基因组特性及生物学特征,探索国内流行规律。从孵化厂中采集啄壳不全活胚进行MG分离,对分离株进行二代基因组测序及黏附相关蛋白变异分析。同时,对国内流行MG菌株进行多位点序列分型(MLST)分析。本研究从孵化厂的啄壳不全活胚中分离到一株MG菌株。基因组分析显示,MG基因组小,仅有953.4 kb,GC含量31.5%。注释显示721个编码区,编码密度89.3%,33个tRNA,2个CRISPR序列。功能富集于翻译、代谢和信号转导,具有高效蛋白质合成和环境适应能力,可能存在与毒力调控的相关基因。在黏附相关蛋白P1、P30和hwm3中发生11处氨基酸突变。MLST分析表明,该分离株属于ST-81型,与国内主要流行的ST-78和ST-36共同构成主要流行基因型。MG已成为孵化厂的重要污染因子,伴随着流行的多样性,显著增加了防控难度。本研究解析了LC株的基因组特征和生物学特性,并分析了国内主要流行ST型,这为病原生物学研究及疫苗菌株筛选提供了科学依据。 展开更多

关键词 鸡毒支原体 啄壳不全活胚 基因组 氨基酸突变 多位点序列分型

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禽白血病病毒p27蛋白单克隆抗体制备及抗原表位的鉴定

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作者 陈桂娥 容芳 +3 位作者 苟鑫 孙荣航 李作生 陈瑞爱 《动物医学进展》 北大核心 2025年第1期23-28,共6页

为制备禽白血病病毒(ALV)p27蛋白特异性单克隆抗体,利用原核表达系统表达并纯化ALV p27蛋白,将其作为免疫原免疫注射Balb/c小鼠,用杂交瘤细胞融合和ELISA等筛选出阳性单克隆抗体细胞,对制备的单克隆抗体的抗体亚型、效价及特异性进行鉴... 为制备禽白血病病毒(ALV)p27蛋白特异性单克隆抗体,利用原核表达系统表达并纯化ALV p27蛋白,将其作为免疫原免疫注射Balb/c小鼠,用杂交瘤细胞融合和ELISA等筛选出阳性单克隆抗体细胞,对制备的单克隆抗体的抗体亚型、效价及特异性进行鉴定,将目的蛋白截短成4段,初步鉴定单克隆抗体识别的抗原表位区域。结果表明,共筛选出4株单克隆细胞,其抗体亚类皆为IgG1型,其中3A1抗体效价为1∶64000,3B2为1∶256000,5F1为1∶128000,5G2为1∶8000;4株单克隆抗体识别的抗原表位在1-60 aa之间。研究结果为进一步建立ALV相关免疫学检测方法提供了重要的材料。 展开更多

关键词 禽白血病病毒 P27蛋白 单克隆抗体 抗原表位

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与新城疫病毒NP蛋白互作宿主细胞蛋白的筛选和鉴定

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作者 韩银 谢紫葳 +2 位作者 严舒可 徐飞 陈瑞爱 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第8期3942-3957,共16页

新城疫是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)强毒株引起的一种急性接触性传染病,临床上常导致呼吸系统和消化系统的临床症状,NDV的广泛流行给家禽养殖业造成了巨大经济损失。NP(nucleocapsid)是NDV的一种核衣壳蛋白,在病毒复制... 新城疫是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)强毒株引起的一种急性接触性传染病,临床上常导致呼吸系统和消化系统的临床症状,NDV的广泛流行给家禽养殖业造成了巨大经济损失。NP(nucleocapsid)是NDV的一种核衣壳蛋白,在病毒复制、介导免疫应答和引发细胞自噬方面具有重要作用,其是否存在其他相互作用的宿主蛋白尚不清楚。为了筛选与NDV NP互作的宿主蛋白,初步探索互作宿主蛋白对NDV复制的影响,为NDV抗病药物新靶点的筛选提供理论基础。利用真核表达载体pXJ40成功构建了NDV NP的真核表达质粒,通过免疫共沉淀、质谱分析、GST-pull down以及激光共聚焦等技术筛选出能与NP相互作用的宿主蛋白,进一步在DF-1细胞中通过敲低、过表达等方法探究互作宿主蛋白对NDV复制的影响。质谱结果筛选到与NP发生相互作用的潜在蛋白211个,对差异蛋白进行富集分析揭示了其可能发挥的生物学功能和参与的生物学过程,进一步验证了热休克蛋白家族成员70(HSP70)与NP相互作用,并且这种互作是由HSP70的SBD结构域介导的;NDV感染能下调宿主细胞内HSP70的表达;过表达HSP70能在蛋白和转录水平显著抑制病毒复制;敲低内源性HSP70和HSP70抑制剂均能显著促进NDV复制。本研究筛选出NDV NP的互作宿主蛋白HSP70,并且验证了过表达HSP70能显著抑制NDV复制,作为NDV感染的负调控因子,为设计以HSP70为靶点的抗病毒药物提供了新思路。 展开更多

关键词 新城疫病毒 NP HSP70蛋白 免疫共沉淀技术

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1例猫慢性肾衰竭病例分析报告 被引量：1

4

作者 陈思宇 邵明明 于亚南 《现代畜牧兽医》 2025年第1期56-61,共6页

慢性肾衰竭是指一个或两个肾脏的结构或功能损害持续3个月以上,功能单位绝对数量减少70%以上,由此产生的各种临床症状和代谢紊乱所组成的综合征。一患猫经初步临床诊断,再进一步通过影像学检查、血液学检查及细胞学检查确诊为慢性肾衰... 慢性肾衰竭是指一个或两个肾脏的结构或功能损害持续3个月以上,功能单位绝对数量减少70%以上,由此产生的各种临床症状和代谢紊乱所组成的综合征。一患猫经初步临床诊断,再进一步通过影像学检查、血液学检查及细胞学检查确诊为慢性肾衰竭。针对慢性肾衰竭导致的临床症状以及并发症,进行一周的药物治疗缓解症状,患猫恢复正常后出院,后续指导宠主对其进行饮食管理并按时复诊。通过分析该病例的治疗过程,可知掌握疾病病理知识,做到早期诊断、及时治疗,对延长患病猫寿命、改善生活水平具有重要作用。 展开更多

关键词 猫 慢性肾衰竭 肾功能 对称性二甲基精氨酸

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兽用生物制品实验动物福利初探

5

作者 盘伟岚 黄丽萍 陈佐彬 《广东畜牧兽医科技》 2013年第2期51-52,共2页

兽用生物制品实验动物的福利越来越受到人们的关注和重视,本文就兽用生物制品动物实验过程中的有关动物福利进行探讨。

关键词 实验动物 动物福利 动物实验

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共表达膜结合型与可溶性H9N2亚型禽流感病毒HA蛋白的重组基因Ⅶ型新城疫病毒的构建及免疫效果评价

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作者 吕亚迪 杨洁 +2 位作者 谢文婷 徐婷 陈瑞爱 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期2123-2134,共12页

旨在构建能高效稳定表达H9N2 AIV的HA蛋白的重组基因Ⅶ型新城疫病毒,有望开发抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗,为控制H9N2 AIV和NDV提供新的防御思路,对NDV疫苗载体的构建和优化有重要的参考意义。利用反向遗传技术,以rDHN3-mF... 旨在构建能高效稳定表达H9N2 AIV的HA蛋白的重组基因Ⅶ型新城疫病毒,有望开发抗新城疫和H9N2亚型禽流感病毒的二联疫苗,为控制H9N2 AIV和NDV提供新的防御思路,对NDV疫苗载体的构建和优化有重要的参考意义。利用反向遗传技术,以rDHN3-mF为骨架,在病毒基因组的P和M之间的非编码区插入全长膜结合HA和另外一个带有截短跨膜结构域的可溶性HA蛋白,获得了能高效稳定表达H9N2 AIV的HA蛋白的基因Ⅶ型NDV减毒株重组病毒rDHN3mF-HA和rDHN3mF-2HA。通过鸡胚接种、Western blot、血凝效价(HA)及平均鸡胚致死时间(MDT)等试验来检测重组病毒的稳定性以及生物学特性,将重组病毒以10~6 EID_(50·)只^(-1)剂量免疫7日龄SPF鸡并测定血凝抑制(HI)抗体,在免疫后28 d对各组进行攻毒保护试验。结果显示:重组病毒在鸡胚中连续传至十五代后HA基因无突变发生;Western blot证明重组病毒可稳定高效地表达特异性的HA蛋白;重组病毒的生长曲线说明了重组病毒与亲本毒株具有相似的复制特性和低毒力特征;重组病毒免疫组的SPF鸡均能产生针对NDV或者H9N2 AIV的特异性HI抗体;攻毒保护试验结果:重组病毒均能对攻毒后的鸡产生100%保护效果;喉、肛拭子检测结果说明重组病毒可显著减少NDV与H9N2 AIV的体外排毒;气管与肺qPCR检测结果显示攻毒后3 d, rDHN3mF-2HA较rDHN3mF-HA更显著地降低了脏器中H9N2 AIV含量。本研究成功构建了共表达膜结合型与可溶性H9N2亚型禽流感HA蛋白的基因Ⅶ型重组NDV,为H9N2 AIV和NDV的一种新型重组基因工程二联活载体疫苗的研制与应用奠定了基础。 展开更多

关键词 H9N2亚型禽流感病毒 HA蛋白 新城疫病毒 免疫原性 载体疫苗 免疫保护效率

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无独立后备隔离舍猪场的猪流行性腹泻驯化免疫方案 被引量：1

7

作者 王生富 黄红亮 +2 位作者 施增斌 李超平 王仁全 《今日养猪业》 2024年第4期20-23,共4页

【目的】旨在为缺乏后备隔离舍的猪场提供一种有效的母猪病毒性腹泻驯化方法,并为此类实践提供参考案例。【方法】根据场区流行毒株测序结果,选择同源性高的MaJ株,其毒价10^(7.0)TCID50/mL,采用6 mL/头的剂量进行返饲驯化,在驯化后14 d... 【目的】旨在为缺乏后备隔离舍的猪场提供一种有效的母猪病毒性腹泻驯化方法,并为此类实践提供参考案例。【方法】根据场区流行毒株测序结果,选择同源性高的MaJ株,其毒价10^(7.0)TCID50/mL,采用6 mL/头的剂量进行返饲驯化,在驯化后14 d和35 d,使用大华农新止泻威灭活疫苗进行加强免疫,以提高乳源抗体水平。【结果】经过对大日龄后备猪和妊娠猪进行猪流行性腹泻返饲驯化后,经产母猪初乳中的IgA抗体阳性率达到100%,这一结果表明,返饲驯化成功启动了黏膜免疫机制。而后续加强免疫灭活疫苗提高了乳源抗体水平,为保护哺乳仔猪提供了坚实的基础。【结论】通过对大日龄后备猪和妊娠猪进行病毒液驯化,结合临床症状观察、排毒检测和IgA型抗体检测结果,可以确认本次驯化达到了预期效果。该方法为不具备后备隔离舍的猪场进行母猪病毒性腹泻驯化提供了有效的途径和参考。 展开更多

关键词 后备隔离舍 猪流行性腹泻 返饲驯化 提高乳源抗体

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2012-2017年我国鸡传染性鼻炎流行态势分析 被引量：20

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作者 龚玉梅 张淑琼 +4 位作者 李淑芳 梅晨 侯婷 王宏俊 张培君 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2018年第4期3-5,共3页

2012-2017年,北京、山东、安徽、贵州、河北和广西等省市区送检鸡传染性鼻炎疑似病料125份,共分离到副鸡禽杆菌45株,其中A型15株,B型30株。表明近六年来我国的鸡传染性鼻炎以B型为主。

关键词 鸡传染性鼻炎 流行 分析

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猫细小病毒的分离与鉴定 被引量：13

9

作者 刘碧涛 任常宝 +3 位作者 张晓战 许冬蕾 郑良焰 唐兆新 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第9期124-127,共4页

为丰富猫细小病毒(FPV)流行病学资料和制备灭活疫苗,通过猫肾传代细胞(F81)培养方法从疑似感染FPV病猫粪便中分离病毒。对分离到的病毒进行理化性质分析和FPV特异性检测引物PCR鉴定,然后对FPV的VP2基因进行扩增测序。理化性质分析结果与... 为丰富猫细小病毒(FPV)流行病学资料和制备灭活疫苗,通过猫肾传代细胞(F81)培养方法从疑似感染FPV病猫粪便中分离病毒。对分离到的病毒进行理化性质分析和FPV特异性检测引物PCR鉴定,然后对FPV的VP2基因进行扩增测序。理化性质分析结果与FPV特性均相符,VP2基因测序结果与GenBank已发表的FPV标准株VP2基因序列对比分析,核苷酸序列同源性达到99.0%,证明该分离毒株为猫细小病毒。该毒株的成功分离进一步充实了我国FPV病毒库,也为灭活疫苗的制备奠定了基础。 展开更多

关键词 猫细小病毒 分离鉴定 聚合酶链反应

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多杀性巴氏杆菌类活疫苗活菌计数参考品的研究 被引量：6

10

作者 王秀丽 刘博 +9 位作者 辛凌翔 杜微 邓智昕 巫月生 袁沐 李建 张一帜 彭国瑞 蒋玉文 张媛 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2019年第9期34-37,42,共5页

为了研制多杀性巴氏杆菌类活疫苗活菌计数的参考品,以期更科学的评价活菌计数结果的有效性。制备一批猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗为参考品候选物,对其性状、纯粹、真空度、剩余水分进行检测,对其运输稳定性、均一性进行测定,组织协作标定... 为了研制多杀性巴氏杆菌类活疫苗活菌计数的参考品,以期更科学的评价活菌计数结果的有效性。制备一批猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗为参考品候选物,对其性状、纯粹、真空度、剩余水分进行检测,对其运输稳定性、均一性进行测定,组织协作标定对参考品候选物进行定值,用协作标定的方法统计参考品候选物24个月的保存期,将参考品应用于多杀性巴氏杆菌类活疫苗活菌计数的检验。结果表明,参考品的性状、纯粹检验、剩余水分和真空度测定均符合《中国兽药典》的规定,均一性试验结果显示,10瓶参考品候选物计数结果的变异系数为5.4%,小于10%,说明其均一性良好。协作标定的赋值范围为(4.2~5.6)×10^8 CFU/头份,保存期试验结果显示,参考品候选物在-70℃以下保存24个月菌数稳定。参考品的初步应用显示本参考品不仅可以为多杀性巴氏杆菌类活疫苗活菌计数提供参照物,而且可以用于控制多杀性巴氏杆菌类疫苗检验用马丁琼脂培养基的质量。 展开更多

关键词 参考品 活菌计数 多杀性巴氏杆菌 活疫苗

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伪狂犬病病毒Ra株对不同细胞增殖特性及致病性研究 被引量：2

11

作者 余文兰 张晓战 +3 位作者 黄红亮 刘碧涛 任常宝 唐兆新 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第11期164-168,共5页

本研究以伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)Ra株体外感染不同的细胞系为模型,研究PRV Ra株最适细胞系。试验采用ST细胞、PK-15细胞、Vero细胞、F81细胞、DF1细胞、MDCK细胞和CEF细胞7种细胞作为该毒株的接种对象,观察毒株在这几种... 本研究以伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)Ra株体外感染不同的细胞系为模型,研究PRV Ra株最适细胞系。试验采用ST细胞、PK-15细胞、Vero细胞、F81细胞、DF1细胞、MDCK细胞和CEF细胞7种细胞作为该毒株的接种对象,观察毒株在这几种细胞上病变特点、细胞病变时间及病毒增殖规律等并进行比较。观察结果发现,受试的各种细胞在PRV感染期间均能表现明显的细胞病变,但不同细胞在病变时间上存在较大差异,其中PK-15和ST细胞在感染后24h内出现明显细胞病变,时间最早。TCID50测定病毒增殖力结果表明,ST细胞在病毒增殖传代中毒力保持最好,与原毒株毒力相当,为106.9 TCID50/0.1mL。本试验结果表明,ST细胞是较适合于PRV Ra株体外研究的细胞系。 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒Ra株 细胞系 细胞病变效应 病毒滴度

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水牛生长分化因子9成熟肽基因克隆及重组蛋白质和多克隆抗体的制备 被引量：2

12

作者 刘玉鹏 彭中友 +4 位作者 郭日红 雷明明 于建宁 陈瑞爱 施振旦 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第2期346-351,共6页

为了获得水牛生长分化因子9(Growth differentiation factor 9,GDF9)重组蛋白质和抗GDF9抗体,根据GDF9基因编码区序列(GenBank:FJ529501.1)设计1对引物,用水牛基因组DNA为模板扩增水牛GDF9成熟肽基因序列,并与其他反刍动物的GDF9成熟肽... 为了获得水牛生长分化因子9(Growth differentiation factor 9,GDF9)重组蛋白质和抗GDF9抗体,根据GDF9基因编码区序列(GenBank:FJ529501.1)设计1对引物,用水牛基因组DNA为模板扩增水牛GDF9成熟肽基因序列,并与其他反刍动物的GDF9成熟肽基因序列进行同源性比较。将该序列克隆到表达载体pRSET-A的BamHⅠ和HindⅢ酶切位点之间以构建重组表达载体,并将重组表达载体转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),转化菌经IPTG诱导表达重组蛋白质。经Ni-NTA凝胶纯化后的重组蛋白质与矿物油佐剂混合免疫新西兰兔制备抗GDF9抗血清,使用ELISA方法检测血清抗体效价,从抗血清中进一步纯化GDF9抗体。结果显示,成功获得了水牛GDF9成熟肽基因序列,该序列在牛和其他反刍动物之间高度同源。成功构建了重组表达载体并转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),E.coli BL21(DE3)经IPTG诱导后表达了分子量为1.96×104的GDF9重组蛋白质,其最高表达量达到菌体蛋白质总量的30%左右。成功制备了抗GDF9抗血清,血清效价达到1∶51 200,抗血清经纯化后得到了高纯度的GDF9抗体。GDF9重组蛋白质和抗GDF9抗体有望应用于提高羊繁殖性能和促进动物胚胎发育的研究和技术开发。 展开更多

关键词 生长分化因子9 成熟肽 克隆和表达 多克隆抗体

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H9亚型禽流感病毒感染引起MDCK细胞内抗氧化功能的变化 被引量：3

13

作者 郑良焰 陈龙 +1 位作者 徐家华 唐兆新 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第11期175-179,共5页

将传代MDCK细胞以8×104/cm2的密度接种于6孔细胞培养板,H9亚型禽流感病毒以不同剂量0(对照组)、10-3(高剂量组)、10-4(中剂量组)、10-5×EID50(低剂量组)分别接种,检测H9亚型禽流感病毒对MDCK细胞内抗氧化功能的影响。结果表明... 将传代MDCK细胞以8×104/cm2的密度接种于6孔细胞培养板,H9亚型禽流感病毒以不同剂量0(对照组)、10-3(高剂量组)、10-4(中剂量组)、10-5×EID50(低剂量组)分别接种,检测H9亚型禽流感病毒对MDCK细胞内抗氧化功能的影响。结果表明,与对照组相比,高剂量H9亚型禽流感病毒接种MDCK细胞使细胞内过氧化氢(H2O2)和羟基自由基(·OH)含量均显著增加(P>0.05),细胞内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力均显著下降(P>0.05),细胞内的丙二醛(MDA)含量显著增加(P>0.05)。说明H9亚型禽流感病毒可显著提高MDCK细胞内活性氧自由基(ROS)含量,并降低抗氧化酶活力,阻碍ROS在细胞内的清除机制,引起细胞脂质过氧化作用,从而损伤细胞。 展开更多

关键词 H9亚型禽流感病毒 MDCK细胞 抗氧化功能

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稳定转染纤维素酶相关基因的猪胎儿成纤维细胞系的建立 被引量：1

14

作者 黄妙容 张献伟 +5 位作者 刘德武 邹娴 帅亮 袁玉娟 朱财林 吴珍芳 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期535-542,共8页

旨在构建带有双筛选标记的纤维素酶基因的腮腺特异性表达载体,筛选稳定转染该载体的猪胎儿成纤维细胞系,为制备转纤维素酶基因的转基因克隆猪提供核供体细胞。采用SOE-PCR和PCR方法,分别扩增获得筛选标记基因NEO-T2A-EGFP序列和纤维素... 旨在构建带有双筛选标记的纤维素酶基因的腮腺特异性表达载体,筛选稳定转染该载体的猪胎儿成纤维细胞系,为制备转纤维素酶基因的转基因克隆猪提供核供体细胞。采用SOE-PCR和PCR方法,分别扩增获得筛选标记基因NEO-T2A-EGFP序列和纤维素酶相关基因的融合序列SP-EGX-F2A-BGL1,构建腮腺特异性表达载体pPSP-SP-EGX-F2A-BGL1-CMV-NEO-T2A-EGFP,经PCR、酶切、测序鉴定正确后,通过脂质体转染猪胎儿成纤维细胞,利用G418抗性和绿色荧光蛋白进行稳定筛选,并利用PCR和Western blot进行检测。结果表明,成功构建了带双筛选标记的腮腺特异表达纤维素酶基因的表达载体,并获得稳定转染该载体的猪胎儿成纤维细胞系。该结果为生产腮腺特异表达纤维素酶的转基因克隆猪研究奠定基础。 展开更多

关键词 双筛选标记 纤维素酶 2A 猪胎儿成纤维细胞

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猪细小病毒M2株在ST细胞中培养条件优化 被引量：5

15

作者 唐满华 陈瑞爱 +5 位作者 何玲 李春红 梁桂益 廖翠银 陈振波 同戈 《现代畜牧兽医》 2013年第10期55-60,共6页

为探索猪细小病毒M2株在ST细胞中培养的适宜条件，将其分别以同步接毒法和单层接毒法接种于ST细胞，比较其接种效果，选择更有效的方法，再对其培养条件（细胞浓度、血清种类、血清含量和收毒时间等）进行优化。结果表明，同步接种法相... 为探索猪细小病毒M2株在ST细胞中培养的适宜条件，将其分别以同步接毒法和单层接毒法接种于ST细胞，比较其接种效果，选择更有效的方法，再对其培养条件（细胞浓度、血清种类、血清含量和收毒时间等）进行优化。结果表明，同步接种法相对于单层接种法更具优势。同步接毒，采用含量为5%的胎牛血清或6%的新生牛血清培养，细胞浓度控制在3.2×104～1.5×105个/mL内，在病毒接种后，80%以上细胞出现细胞病变时收获病毒，能获得较高病毒含量的病毒液。本研究结果为制备高效价的PPV- M2株病毒抗原提供了数据资料。 展开更多

关键词 猪细小病毒 ST细胞 培养条件

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地克珠利在鸡组织的残留检测 被引量：9

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作者 文丽 方炳虎 刘颖 《广东畜牧兽医科技》 2007年第4期39-41,共3页

地克珠利（Diclazuril），属三嗪苯乙腈化合物，于1986年由比利时Janssen公司开发，是一种高效、低毒的广谱抗球虫药，主要抑制子孢子和裂殖子增殖，对球虫的活性峰期随球虫的不同种属而异。为全面了解国产地克珠利饮水剂在鸡组织中的... 地克珠利（Diclazuril），属三嗪苯乙腈化合物，于1986年由比利时Janssen公司开发，是一种高效、低毒的广谱抗球虫药，主要抑制子孢子和裂殖子增殖，对球虫的活性峰期随球虫的不同种属而异。为全面了解国产地克珠利饮水剂在鸡组织中的残留状况，以科学制定相应的休药期，特进行了本试验。 展开更多

关键词 地克珠利饮水剂 残留检测 鸡组织 Janssen 抗球虫药 化合物 苯乙腈 比利时

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猪细小病毒CG-05株在ST细胞上的增殖规律研究 被引量：1

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作者 唐满华 陈瑞爱 +1 位作者 何玲 梁桂益 《中国兽药杂志》 2013年第1期14-16,22,共4页

通过将猪细小病毒CG-05株同步接种于ST细胞,测定不同时间收获的病毒液的TCID50和HA,研究了CG-05株病毒在ST细胞上的增殖规律。病毒接种后镜检观察接毒细胞,在接种病毒后24 h,即可在细胞较少的区域看到非常轻微的病变。测定病毒TCID50,... 通过将猪细小病毒CG-05株同步接种于ST细胞,测定不同时间收获的病毒液的TCID50和HA,研究了CG-05株病毒在ST细胞上的增殖规律。病毒接种后镜检观察接毒细胞,在接种病毒后24 h,即可在细胞较少的区域看到非常轻微的病变。测定病毒TCID50,检测到接毒后培养17h病毒已经明显增殖;当培养到40h左右,其TCID50即接近高峰,达到10-7.2/0.1mL以上,并进入平台期;继续培养,TCID50最高可达到10-8.5/0.1mL,且直到122 h也不见明显降低。病毒HA价也出现同样的平台期,但比TCID50的平台期出现得晚,到50 h才进入平台期。结果表明,用ST细胞培养CG-05株病毒,接种病毒培养56～96 h后,如病变达到80%以上,且细胞脱落已形成20%以上空斑,此时收获病毒可获得高效价的病毒液。该研究可为制备高效价的PPV病毒抗原提供数据资料。 展开更多

关键词 猪细小病毒 ST细胞 增殖规律

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伪狂犬病病毒Ra株体外感染ST细胞超微结构的研究

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作者 郭剑英 张晓战 +5 位作者 黄红亮 许冬蕾 刘碧涛 任常宝 邵定勇 唐兆新 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第11期34-37,共4页

本研究以伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)Ra株体外感染ST细胞为生物模型,通过透射电镜对PRV的增殖规律和致细胞病变的显微结构进行观察。结果显示,PRV能诱导ST细胞发生明显病变,细胞的病变程度与PRV感染时间密切相关。PRV Ra株感... 本研究以伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)Ra株体外感染ST细胞为生物模型,通过透射电镜对PRV的增殖规律和致细胞病变的显微结构进行观察。结果显示,PRV能诱导ST细胞发生明显病变,细胞的病变程度与PRV感染时间密切相关。PRV Ra株感染ST细胞,病毒吸附于ST细胞表面,以膜融合内陷的方式进入细胞和细胞核内,在细胞核内复制,出现包涵体结构,以出芽方式离开细胞核,在高尔基体等细胞内膜结构处完成病毒粒子的囊膜化过程。感染前期,病毒通过膜融合方式被释放到细胞外,完成细胞间病毒的传播;感染后期,细胞溶解,大量释放病毒粒子。感染细胞超微结构的变化主要体现为:线粒体肿胀、数目减少,嵴面积减少,核内出现包涵体,细胞融合,细胞内空泡化严重,溶细胞现象。 展开更多

关键词 伪狂犬病病毒Ra株 ST细胞 细胞病变效应 超微结构

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α-硫辛酸对Marc-145细胞感染高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒后氧化应激的影响

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作者 张浩 胡莲美 +3 位作者 邱先帅 肖熹玉 任常宝 唐兆新 《动物医学进展》 北大核心 2015年第8期24-27,共4页

为探讨高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)对Marc-145细胞抗氧化功能的影响及α-硫辛酸对感染病毒后细胞氧化应激的影响,将安全浓度的α-硫辛酸添加到接种HP-PRRSV的Marc-145细胞培养液中,将细胞分为病毒组(D组)、α-硫辛酸干预... 为探讨高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)对Marc-145细胞抗氧化功能的影响及α-硫辛酸对感染病毒后细胞氧化应激的影响,将安全浓度的α-硫辛酸添加到接种HP-PRRSV的Marc-145细胞培养液中,将细胞分为病毒组(D组)、α-硫辛酸干预病毒组(DLA)、α-硫辛酸干预组(LA组)和正常细胞对照组(NC组)。2h后开始检测α-硫辛酸对HP-PRRSV接种Marc-145细胞后细胞内过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性。结果表明,与NC组相比,D组细胞H2O2和MDA含量显著增加(P<0.05),SOD活性显著减小(P<0.05),CAT活性显著增强(P<0.05);α-硫辛酸干预后可改善上述指标(P<0.05)。说明HP-PRRSV能够显著引起细胞氧化应激反应;α-硫辛酸能够抑制氧化应激反应,对Marc-145细胞有保护作用。 展开更多

关键词 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 MARC-145细胞 氧化应激 Α-硫辛酸

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猪卵泡抑素基因成熟肽序列的克隆及其在大肠杆菌中的表达

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作者 刘玉鹏 陈瑞爱 +1 位作者 李超 施振旦 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第11期12-15,共4页

根据猪卵泡抑素(follistatin,FS)基因编码区序列(GenBank登录号:M36512.1)设计并合成1对引物,经PCR扩增获得了FS基因成熟肽序列,将其克隆入pMD18-T载体并转化E.coli DH5α感受态细胞,进行PCR、双酶切及测序验证。然后将其克隆到表达载体... 根据猪卵泡抑素(follistatin,FS)基因编码区序列(GenBank登录号:M36512.1)设计并合成1对引物,经PCR扩增获得了FS基因成熟肽序列,将其克隆入pMD18-T载体并转化E.coli DH5α感受态细胞,进行PCR、双酶切及测序验证。然后将其克隆到表达载体pRSET-A的BamHⅠ和HindⅢ酶切位点之间,构建重组质粒pR-FS并转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,再经PCR、双酶切和测序验证。转化重组质粒pR-FS的重组菌经IPTG诱导后的表达产物进行SDS-PAGE分析,分子质量与预期相符,为26.1ku左右,经0.2mmol/L IPTG诱导3h之后表达量达到最高,约占总菌体蛋白的30%。表达产物可经Ni-NTA凝胶纯化。以上结果表明正确完成了猪FS基因成熟肽序列的克隆及其在大肠杆菌中的表达及纯化。 展开更多

关键词 卵泡抑素 成熟肽序列 克隆 表达

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