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Smurf2调控TGF-β1-TβRI-DLX2信号轴对非小细胞肺癌放疗抵抗性的影响
1
作者 王承红 田曼霖 《安徽医学》 2025年第5期544-551,共8页
目的探讨Smad泛素化调节因子2(Smurf2)调控非小细胞肺癌(NSCLC)放疗抵抗性的作用机制。方法收集2019年10月至2022年10月聊城市第二人民医院肿瘤放疗科收治的40例NSCLC患者手术切除癌组织,根据放疗疗效分为放疗敏感组(n=20)和放疗抵抗组(... 目的探讨Smad泛素化调节因子2(Smurf2)调控非小细胞肺癌(NSCLC)放疗抵抗性的作用机制。方法收集2019年10月至2022年10月聊城市第二人民医院肿瘤放疗科收治的40例NSCLC患者手术切除癌组织,根据放疗疗效分为放疗敏感组(n=20)和放疗抵抗组(n=20);采用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(q RT-PCR)、蛋白质印迹法(WB)和免疫组化染色法检测癌组织中Smurf2 m RNA与蛋白表达水平;利用X射线(4 Gy)照射构建放疗抵抗的NSCLC A549细胞株(A549-R);A549-R细胞转染si RNA Smurf2(si-Smurf2)或同时转染si-Smurf2和过表达同源盒转录因子基因2(DLX2)质粒(OE-DLX2),分为si RNA阴性对照(si-Con)组、si-Con+4 Gy组、si-Smurf2+4 Gy和si-Smurf2+OE-DLX2+4 Gy组;MTT法检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞凋亡;WB法检测A549-R细胞Smurf2、转化生长因子-β受体I(TβRI)和DLX2蛋白表达;酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定A549-R细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)分泌水平;建立A549-R细胞裸鼠皮下移植瘤模型,瘤内注射携带si-Smurf2的慢病毒(LV-si-Smurf2),分为LV-siCon组、LV-si-Con+4 Gy组和LV-si-Smurf2+4 Gy组,统计瘤体积和瘤质量。结果与放疗敏感组相比,放疗抵抗组癌组织Smurf2阳性表达比例升高(P<0.01);与A549细胞相比,A549-R细胞对4 Gy照射抵抗能力增强,TGF-β1分泌水平,以及Smurf2、TβRI和DLX2蛋白表达升高(P<0.05)。与si-Con+4 Gy组相比,si-Smurf2+4 Gy组A549-R细胞存活率和克隆形成能力降低,凋亡率增加(P<0.05);与si-Smurf2+4 Gy组相比,si-Smurf2+OE-DLX2+4 Gy组细胞存活率和克隆形成能力升高,凋亡率降低(P<0.05);与LV-siCon+4 Gy组相比,LV-si-Smurf2+4 Gy组瘤体积和瘤质量减小,瘤组织中TGF-β1水平,以及Smurf2、TβRI和DLX2蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论抑制Smurf2蛋白通过阻断TGF-β1-TβRI-DLX2信号降低NSCLC放疗抵抗性。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 放疗抵抗 A549细胞 Smad泛素化调节因子2 增殖 凋亡
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