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重组腺相关病毒介导癌胚抗原基因转染树突细胞的抗肿瘤作用研究
被引量：
2
1
作者
石敏
罗荣城
+2 位作者
郑大勇
Liu Yong
P. L Hermonat
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第12期1274-1277,共4页
目的探讨重组腺相关病毒(rAAV)介导癌胚抗原(CEA)基因转染DC对结直肠癌的治疗作用。方法构建rAAV/CEA质粒,制备病毒。采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)来源的DC前体细胞,经rAAV/CEA转染DC后,采用PCR、Southern blot、流式...
目的探讨重组腺相关病毒(rAAV)介导癌胚抗原(CEA)基因转染DC对结直肠癌的治疗作用。方法构建rAAV/CEA质粒,制备病毒。采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)来源的DC前体细胞,经rAAV/CEA转染DC后,采用PCR、Southern blot、流式细胞仪测定DC中CEA的表达,并检测rAAV/CEA的染色体整合情况及转染效率。加入GM-CSF、IL-4和TNF-α诱导DC前体细胞至成熟DC。将成熟DC和T淋巴细胞混合,加入IL-2和IL-7培养,获得细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。采用体外51铬(51Cr)释放实验测定CTL对恶性肿瘤细胞的杀伤作用,3H掺入法检测rAAV/CEA转染DC对被激活T淋巴细胞增殖能力的影响。结果rAAV成功介导了CEA基因转染DC,且在DC内高表达,超过90%的DC前体细胞表达CEA蛋白,且rAAV/CEA病毒基因成功地整合入DC基因组内。rAAV/CEA转染的DC可以诱导特异性CTL,有效地识别并杀伤CEA阳性的结直肠癌细胞株LoVo,并且具有MHCⅠ类限制性,而对CEA阴性的肿瘤细胞无杀伤作用。结论以rAAV/CEA转染DC疫苗能够诱导抗肿瘤活性,为以人CEA作为靶抗原的结直肠癌的基因治疗奠定了基础。
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关键词
树突细胞
癌胚抗原
腺相关病毒
结直肠肿瘤
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题名
重组腺相关病毒介导癌胚抗原基因转染树突细胞的抗肿瘤作用研究
被引量：
2
1
作者
石敏
罗荣城
郑大勇
Liu Yong
P. L Hermonat
机构
广州南方医科
大学
南方医院肿瘤科
美国阿肯色大学医学院基因治疗中心
出处
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第12期1274-1277,共4页
文摘
目的探讨重组腺相关病毒(rAAV)介导癌胚抗原(CEA)基因转染DC对结直肠癌的治疗作用。方法构建rAAV/CEA质粒,制备病毒。采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)来源的DC前体细胞,经rAAV/CEA转染DC后,采用PCR、Southern blot、流式细胞仪测定DC中CEA的表达,并检测rAAV/CEA的染色体整合情况及转染效率。加入GM-CSF、IL-4和TNF-α诱导DC前体细胞至成熟DC。将成熟DC和T淋巴细胞混合,加入IL-2和IL-7培养,获得细胞毒性T淋巴细胞(CTL)。采用体外51铬(51Cr)释放实验测定CTL对恶性肿瘤细胞的杀伤作用,3H掺入法检测rAAV/CEA转染DC对被激活T淋巴细胞增殖能力的影响。结果rAAV成功介导了CEA基因转染DC,且在DC内高表达,超过90%的DC前体细胞表达CEA蛋白,且rAAV/CEA病毒基因成功地整合入DC基因组内。rAAV/CEA转染的DC可以诱导特异性CTL,有效地识别并杀伤CEA阳性的结直肠癌细胞株LoVo,并且具有MHCⅠ类限制性,而对CEA阴性的肿瘤细胞无杀伤作用。结论以rAAV/CEA转染DC疫苗能够诱导抗肿瘤活性,为以人CEA作为靶抗原的结直肠癌的基因治疗奠定了基础。
关键词
树突细胞
癌胚抗原
腺相关病毒
结直肠肿瘤
Keywords
dendritic cells,carcinoembryonic antigen,adeno-associated virus,colorectal neoplasms
分类号
R730.51 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
发文年
被引量
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1
重组腺相关病毒介导癌胚抗原基因转染树突细胞的抗肿瘤作用研究
石敏
罗荣城
郑大勇
Liu Yong
P. L Hermonat
《解放军医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
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