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重组腺病毒CD82／KAI1对小鼠子宫基质细胞内α5、β3、MMP-9、E-cadherin和β-catenin蛋白表达的影响
被引量：
2
1
作者
尉晓蔚
张倩
+3 位作者
谭冬梅
赵邦霞
何通川
谭毅
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第7期572-576,共5页
目的研究CD82/KAI1对着床窗口期小鼠子宫基质细胞内整合素α5、β3、MMP-9、E-cadherin和β-catenin蛋白表达的影响。方法采用基因工程技术,构建CD82/KAI1腺病毒;用免疫细胞化学技术观察妊娠小鼠子宫基质细胞感染CD82/KAI1腺病毒后,细...
目的研究CD82/KAI1对着床窗口期小鼠子宫基质细胞内整合素α5、β3、MMP-9、E-cadherin和β-catenin蛋白表达的影响。方法采用基因工程技术,构建CD82/KAI1腺病毒;用免疫细胞化学技术观察妊娠小鼠子宫基质细胞感染CD82/KAI1腺病毒后,细胞内α5、β3、MMP-9、E-cadherin和β-catenin的表达变化情况。结果①构建的小鼠重组腺病毒的滴度达到6.5×1012pfu/ml,感染原代培养的小鼠子宫基质细胞48h后,CD82/KAI1蛋白有明显表达。②妊娠4d的小鼠子宫基质细胞中E-cadherin、β-catenin、α5、MMP-9均有表达,没有检测到β3的表达;对照组未妊娠小鼠细胞中均没有检测到E-cadherin、β-catenin、α5、MMP-9和β3的表达。③与导空腺病毒组相比,妊娠4d的小鼠子宫基质细胞感染CD82/KAI1腺病毒后,β-catenin和MMP-9表达显著上升(P<0.05),α5表达显著下降(P<0.05),E-cadherin的表达量没有显著变化(P>0.05),未检测到β3的表达。结论成功构建含小鼠CD82/KAI1全基因的重组腺病毒。胚胎植入前小鼠子宫基质细胞内整合素α5、MMP-9、E-cadherin和β-catenin的表达可能受CD82/KAI1的影响。
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关键词
CD82/KAI1基因
重组腺病毒
子宫基质细胞
原代培养
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职称材料
过表达CD82对植入期小鼠子宫内膜整合素αV、β3、E-cadherin和β-catenin表达的影响
被引量：
1
2
作者
尉晓蔚
谭冬梅
+2 位作者
张倩
何通川
谭毅
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2014年第3期57-61,I0011-I0012,共7页
目的探讨CD82对着床窗口期小鼠子宫内膜上皮细胞内整合素αV、β3、E-cadherin以及β-catenin蛋白表达的影响。方法将构建的CD82腺病毒转染原代培养的小鼠子宫内膜上皮细胞。检测妊娠小鼠子宫内膜上皮细胞转染CD82腺病毒后,细胞内整合素...
目的探讨CD82对着床窗口期小鼠子宫内膜上皮细胞内整合素αV、β3、E-cadherin以及β-catenin蛋白表达的影响。方法将构建的CD82腺病毒转染原代培养的小鼠子宫内膜上皮细胞。检测妊娠小鼠子宫内膜上皮细胞转染CD82腺病毒后,细胞内整合素αV、β3、E-cadherin和β-catenin的表达变化情况。结果提取的上皮细胞纯度为(93.2±0.6)%。构建的CD82腺病毒转染效率达到(92.0±4.5)%,转染原代培养的小鼠子宫内膜上皮细胞24 h后,RT-PCR检测发现CD82基因表达明显升高。转染48 h后,Western blot检测CD82蛋白水平明显升高。免疫细胞化学检测妊娠第4天的小鼠子宫内膜上皮细胞转染CD82腺病毒后,整合素αV、β3以及β-catenin的表达较未转染组均有明显上升(P<0.05),但E-cadherin的表达量无明显变化(P>0.05)。结论胚胎植入前,CD82可能影响小鼠子宫内膜上皮细胞内整合素αV、β3和β-catenin的蛋白表达。
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关键词
CD82基因
重组腺病毒
子宫内膜上皮细胞
原代培养
孕小鼠
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职称材料
人组织型纤溶酶原激活剂原核表达载体的构建及在大肠杆菌中的初步表达
被引量：
1
3
作者
杨震
杨可
+6 位作者
侯曼美
景丽丽
张睿
张丽
雷寒
何通川
周建中
《西南大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期71-77,共7页
目的:构建人组织型纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator,tPA)原核表达载体,检测其在大肠杆菌Escherichia coli中的初步表达.方法:以含有人tPA基因的质粒为模板,设计引物扩增出含有RGDS-tPA基因并构建到原核表达载体pET28a...
目的:构建人组织型纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator,tPA)原核表达载体,检测其在大肠杆菌Escherichia coli中的初步表达.方法:以含有人tPA基因的质粒为模板,设计引物扩增出含有RGDS-tPA基因并构建到原核表达载体pET28a中,测序证实为正确的rtPA序列,并将pET28a-tPA转化至菌株E.coli BL21(DE3).用IPTG诱导rtPA在E.coli中表达,并通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行验证.结果:琼脂糖凝胶电泳获得目的基因片段tPA的条带约在1 700bp处,鉴定为阳性重组体;聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定获得目的蛋白片段rtPA的条带约53KDa,为非活性的包涵体.结论:人组织型纤溶酶原激活剂原核表达载体构建成功,可在大肠杆菌中有效表达.
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关键词
组织型纤溶酶原激活剂
原核表达载体
转化
表达
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职称材料
题名
重组腺病毒CD82／KAI1对小鼠子宫基质细胞内α5、β3、MMP-9、E-cadherin和β-catenin蛋白表达的影响
被引量：
2
1
作者
尉晓蔚
张倩
谭冬梅
赵邦霞
何通川
谭毅
机构
重庆医科
大学
实验
动物中心
重庆医科
大学
美国芝加哥大学分子肿瘤实验室
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第7期572-576,共5页
基金
国家自然科学基金(30470654)~~
文摘
目的研究CD82/KAI1对着床窗口期小鼠子宫基质细胞内整合素α5、β3、MMP-9、E-cadherin和β-catenin蛋白表达的影响。方法采用基因工程技术,构建CD82/KAI1腺病毒;用免疫细胞化学技术观察妊娠小鼠子宫基质细胞感染CD82/KAI1腺病毒后,细胞内α5、β3、MMP-9、E-cadherin和β-catenin的表达变化情况。结果①构建的小鼠重组腺病毒的滴度达到6.5×1012pfu/ml,感染原代培养的小鼠子宫基质细胞48h后,CD82/KAI1蛋白有明显表达。②妊娠4d的小鼠子宫基质细胞中E-cadherin、β-catenin、α5、MMP-9均有表达,没有检测到β3的表达;对照组未妊娠小鼠细胞中均没有检测到E-cadherin、β-catenin、α5、MMP-9和β3的表达。③与导空腺病毒组相比,妊娠4d的小鼠子宫基质细胞感染CD82/KAI1腺病毒后,β-catenin和MMP-9表达显著上升(P<0.05),α5表达显著下降(P<0.05),E-cadherin的表达量没有显著变化(P>0.05),未检测到β3的表达。结论成功构建含小鼠CD82/KAI1全基因的重组腺病毒。胚胎植入前小鼠子宫基质细胞内整合素α5、MMP-9、E-cadherin和β-catenin的表达可能受CD82/KAI1的影响。
关键词
CD82/KAI1基因
重组腺病毒
子宫基质细胞
原代培养
Keywords
CD82/KAI1 gene
recombinant adenovirus
uterine stromal cells
primary cell culture
分类号
R322.65 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
R394-33 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
过表达CD82对植入期小鼠子宫内膜整合素αV、β3、E-cadherin和β-catenin表达的影响
被引量：
1
2
作者
尉晓蔚
谭冬梅
张倩
何通川
谭毅
机构
大连
大学
附属中山医院
重庆医科
大学
实验
动物中心
美国芝加哥大学分子肿瘤实验室
出处
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2014年第3期57-61,I0011-I0012,共7页
基金
国家自然科学基金(30470654)
重庆市自然科学基金(2009BB5409)
教育部博士点科研基金(20095503110006)
文摘
目的探讨CD82对着床窗口期小鼠子宫内膜上皮细胞内整合素αV、β3、E-cadherin以及β-catenin蛋白表达的影响。方法将构建的CD82腺病毒转染原代培养的小鼠子宫内膜上皮细胞。检测妊娠小鼠子宫内膜上皮细胞转染CD82腺病毒后,细胞内整合素αV、β3、E-cadherin和β-catenin的表达变化情况。结果提取的上皮细胞纯度为(93.2±0.6)%。构建的CD82腺病毒转染效率达到(92.0±4.5)%,转染原代培养的小鼠子宫内膜上皮细胞24 h后,RT-PCR检测发现CD82基因表达明显升高。转染48 h后,Western blot检测CD82蛋白水平明显升高。免疫细胞化学检测妊娠第4天的小鼠子宫内膜上皮细胞转染CD82腺病毒后,整合素αV、β3以及β-catenin的表达较未转染组均有明显上升(P<0.05),但E-cadherin的表达量无明显变化(P>0.05)。结论胚胎植入前,CD82可能影响小鼠子宫内膜上皮细胞内整合素αV、β3和β-catenin的蛋白表达。
关键词
CD82基因
重组腺病毒
子宫内膜上皮细胞
原代培养
孕小鼠
Keywords
CD82 gene
Recombinant adenovirus
Uterine epithelial cells
Primary cell culture
Pregnant mice
分类号
Q95-33 [生物学—动物学]
Q492 [生物学—生理学]
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职称材料
题名
人组织型纤溶酶原激活剂原核表达载体的构建及在大肠杆菌中的初步表达
被引量：
1
3
作者
杨震
杨可
侯曼美
景丽丽
张睿
张丽
雷寒
何通川
周建中
机构
重庆医科
大学
附属第一医院心血管内科
西南
大学
现代生物医药研究所
美国芝加哥大学分子肿瘤实验室
出处
《西南大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第4期71-77,共7页
基金
重庆市自然科学基金资助项目(CSTC2009BB5406)
文摘
目的:构建人组织型纤溶酶原激活剂(tissue-type plasminogen activator,tPA)原核表达载体,检测其在大肠杆菌Escherichia coli中的初步表达.方法:以含有人tPA基因的质粒为模板,设计引物扩增出含有RGDS-tPA基因并构建到原核表达载体pET28a中,测序证实为正确的rtPA序列,并将pET28a-tPA转化至菌株E.coli BL21(DE3).用IPTG诱导rtPA在E.coli中表达,并通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行验证.结果:琼脂糖凝胶电泳获得目的基因片段tPA的条带约在1 700bp处,鉴定为阳性重组体;聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定获得目的蛋白片段rtPA的条带约53KDa,为非活性的包涵体.结论:人组织型纤溶酶原激活剂原核表达载体构建成功,可在大肠杆菌中有效表达.
关键词
组织型纤溶酶原激活剂
原核表达载体
转化
表达
Keywords
tissue-type plasminogen activator prokaryotic expression vector transform expression
分类号
Q814 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
重组腺病毒CD82／KAI1对小鼠子宫基质细胞内α5、β3、MMP-9、E-cadherin和β-catenin蛋白表达的影响
尉晓蔚
张倩
谭冬梅
赵邦霞
何通川
谭毅
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
过表达CD82对植入期小鼠子宫内膜整合素αV、β3、E-cadherin和β-catenin表达的影响
尉晓蔚
谭冬梅
张倩
何通川
谭毅
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2014
1
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职称材料
3
人组织型纤溶酶原激活剂原核表达载体的构建及在大肠杆菌中的初步表达
杨震
杨可
侯曼美
景丽丽
张睿
张丽
雷寒
何通川
周建中
《西南大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2012
1
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