-
题名人乳腺珠蛋白基因亚型的原核表达及纯化
被引量：2
- 1
-
-
作者
刘秀娜
潘自铁
王仙园
周娟
赵力军
胡川闽
-
机构
第三军医大学护理管理学教研室
第三军医大学临床生化教研室
美国疾病控制与预防中心
-
出处
《医学研究生学报》
CAS
2006年第2期107-110,共4页
-
基金
重庆市科委应用基础研究基金资助项目(批准号:200407)
第三军医大学归国人员启动资金资助项目(批准号:XG200363)
-
文摘
目的:克隆人乳珠蛋白(hMAM)编码全长cDNA,原核表达并纯化蛋白产物,为后期研制乳腺癌早期诊断试剂盒奠定基础。方法:自乳腺癌组织及乳腺癌细胞株MD-MB453提取总RNA,通过RT-PCR克隆hMAM cD-NA,构建pQE40-hMAM表达质粒,在大肠杆菌M15中表达,利用镍-亚硝胺乙酸组氨酸(N i-NTA-H is)亲和层析法对重组蛋白进行纯化。结果:乳腺癌组织和乳腺癌细胞株中发现两种hMAM cDNA亚型,即hMAM和hMAM(Isoform),长度分别为279和270 bp,两者相差9个连续碱基,其翻译产物相差3个连续氨基酸残基;表达的融合蛋白以不溶性包涵体形式存在,纯化后得到纯度为97%的目的蛋白。结论:获得hMAM cDNA并发现一个新的hMAM突变体;融合蛋白的表达及纯化成功。
-
关键词
乳腺癌
人乳腺珠蛋白
原核表达系统
蛋白纯化
-
Keywords
Breast cancer
Human mammaglobin
Prokaryotic expression system
Protein purification
-
分类号
R730.53
[医药卫生—肿瘤]
R737.9
[医药卫生—肿瘤]
-
