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2型大麻受体的克隆及真核表达体系的构建
1
作者
王颖莹
陈纯海
+2 位作者
裴莉萍
张伟
Norbert E.Kaminski
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第11期1003-1005,共3页
目的克隆人2型大麻受体(hCB2)基因,并构建相应的稳定表达细胞株。方法利用人T淋巴细胞株HPB-ALL的总RNA,以RT-PCR及酶切、连接等分子生物学方法克隆hCB2基因于质粒载体pFlag-CMV-3内,以HEK293细胞构建稳定表达细胞株,以Western blot方...
目的克隆人2型大麻受体(hCB2)基因,并构建相应的稳定表达细胞株。方法利用人T淋巴细胞株HPB-ALL的总RNA,以RT-PCR及酶切、连接等分子生物学方法克隆hCB2基因于质粒载体pFlag-CMV-3内,以HEK293细胞构建稳定表达细胞株,以Western blot方法利用蛋白标记Flag的单克隆抗体(Anti-Flag)和CB2多克隆抗体(Anti-CB2)同时检测质粒的表达。结果酶切及测序结果表明hCB2基因克隆成功,Western blot检测结果表明Anti-Flag和Anti-CB2都能检测Flag-hCB2蛋白。结论成功克隆hCB2基因,并获得稳定表达细胞株,同时证实Anti-CB2多克隆抗体有效。
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关键词
2型大麻受体
基因克隆
真核表达
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职称材料
2,3,7,8-TCDD对B淋巴瘤细胞株CH12.LX抗体分泌功能的毒性效应及机制研究
2
作者
王颖莹
裴莉萍
+2 位作者
陈纯海
张伟
Norbert E.Kaminski
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第12期1200-1202,共3页
目的探讨2,3,7,8-四氯二苯-对-二噁英(TCDD)对B淋巴细胞株CH12.LX的抗体分泌功能的毒性效应,及其可能的受体机制。方法以B淋巴细胞株CH12.LX为细胞模型,以ELISA法检测系列浓度TCDD处理对LPS活化CH12.LX的IgM分泌功能的影响,以RT-PCR和We...
目的探讨2,3,7,8-四氯二苯-对-二噁英(TCDD)对B淋巴细胞株CH12.LX的抗体分泌功能的毒性效应,及其可能的受体机制。方法以B淋巴细胞株CH12.LX为细胞模型,以ELISA法检测系列浓度TCDD处理对LPS活化CH12.LX的IgM分泌功能的影响,以RT-PCR和Western blot法检测CH12.LX细胞内芳香烃受体(AhR)的表达水平,以及TCDD对细胞色素P450Cyp1a1的诱导效应。结果较低浓度的TCDD(0.03nmol/L)即对CH12.LX的IgM分泌能力产生了显著的抑制效应(P<0·05),同时TCDD(10nmol/L)可显著诱导CH12.LX细胞内Cyp1a1 mRNA的表达(P<0·05),并于CH12.LX细胞内发现AhR有一定水平的表达。结论TCDD对B淋巴细胞株CH12.LX存在显著的抗体分泌抑制效应;同时,推测TCDD的这一免疫毒性效应主要可能由AhR介导。
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关键词
TCDD
B淋巴瘤细胞株CH12.LX
AHR
CYP1A1
免疫毒性
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职称材料
题名
2型大麻受体的克隆及真核表达体系的构建
1
作者
王颖莹
陈纯海
裴莉萍
张伟
Norbert E.Kaminski
机构
第三军医
大学
西南医院检验科
第三军医
大学
军事预防医学院劳动卫生学教研室
美国密西根州立大学药理与毒理系
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第11期1003-1005,共3页
基金
第三军医大学科研基金(XG200550
XG200554)
+1 种基金
总后115国际合作项目(06H024
06H028)~~
文摘
目的克隆人2型大麻受体(hCB2)基因,并构建相应的稳定表达细胞株。方法利用人T淋巴细胞株HPB-ALL的总RNA,以RT-PCR及酶切、连接等分子生物学方法克隆hCB2基因于质粒载体pFlag-CMV-3内,以HEK293细胞构建稳定表达细胞株,以Western blot方法利用蛋白标记Flag的单克隆抗体(Anti-Flag)和CB2多克隆抗体(Anti-CB2)同时检测质粒的表达。结果酶切及测序结果表明hCB2基因克隆成功,Western blot检测结果表明Anti-Flag和Anti-CB2都能检测Flag-hCB2蛋白。结论成功克隆hCB2基因,并获得稳定表达细胞株,同时证实Anti-CB2多克隆抗体有效。
关键词
2型大麻受体
基因克隆
真核表达
Keywords
CB2
gene cloning
eukaryotic expression
分类号
R392.2 [医药卫生—免疫学]
R394-33 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
2,3,7,8-TCDD对B淋巴瘤细胞株CH12.LX抗体分泌功能的毒性效应及机制研究
2
作者
王颖莹
裴莉萍
陈纯海
张伟
Norbert E.Kaminski
机构
第三军医
大学
西南医院检验科
第三军医
大学
军事预防医学院劳动卫生学教研室
美国密西根州立大学药理与毒理系
出处
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第12期1200-1202,共3页
基金
第三军医大学科研基金(XG200550
XG200554)
+1 种基金
总后"115"国际合作项目(06H024
06H028)~~
文摘
目的探讨2,3,7,8-四氯二苯-对-二噁英(TCDD)对B淋巴细胞株CH12.LX的抗体分泌功能的毒性效应,及其可能的受体机制。方法以B淋巴细胞株CH12.LX为细胞模型,以ELISA法检测系列浓度TCDD处理对LPS活化CH12.LX的IgM分泌功能的影响,以RT-PCR和Western blot法检测CH12.LX细胞内芳香烃受体(AhR)的表达水平,以及TCDD对细胞色素P450Cyp1a1的诱导效应。结果较低浓度的TCDD(0.03nmol/L)即对CH12.LX的IgM分泌能力产生了显著的抑制效应(P<0·05),同时TCDD(10nmol/L)可显著诱导CH12.LX细胞内Cyp1a1 mRNA的表达(P<0·05),并于CH12.LX细胞内发现AhR有一定水平的表达。结论TCDD对B淋巴细胞株CH12.LX存在显著的抗体分泌抑制效应;同时,推测TCDD的这一免疫毒性效应主要可能由AhR介导。
关键词
TCDD
B淋巴瘤细胞株CH12.LX
AHR
CYP1A1
免疫毒性
Keywords
TCDD
B lymphoma cell line CH12. LX
AhR
Cyplal
immunotoxicity
分类号
R12 [医药卫生—环境卫生学]
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
2型大麻受体的克隆及真核表达体系的构建
王颖莹
陈纯海
裴莉萍
张伟
Norbert E.Kaminski
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
0
在线阅读
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职称材料
2
2,3,7,8-TCDD对B淋巴瘤细胞株CH12.LX抗体分泌功能的毒性效应及机制研究
王颖莹
裴莉萍
陈纯海
张伟
Norbert E.Kaminski
《第三军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
0
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已选择
0
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