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外周血中血脑屏障损伤新型标记物脑微血管内皮细胞检测方法的建立
被引量：
3
1
作者
李妍
杜蕾
+5 位作者
袁霖
陈德喜
邱嘉文
何肖龙
曹虹
黄胜和
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第12期1733-1737,共5页
目的建立检测人血脑屏障(BBB)损伤新型标记物外周循环血中脑微血管内皮细胞(c BMECs)的实验方法。方法选取33名AIDS脑病病例与13名健康对照分组实验,应用免疫磁珠吸附AIDS脑病病例组及健康对照组外周血中内皮细胞后涂片,免疫荧光三重染...
目的建立检测人血脑屏障(BBB)损伤新型标记物外周循环血中脑微血管内皮细胞(c BMECs)的实验方法。方法选取33名AIDS脑病病例与13名健康对照分组实验,应用免疫磁珠吸附AIDS脑病病例组及健康对照组外周血中内皮细胞后涂片,免疫荧光三重染色法检测涂片中的c BMECs及相关内皮细胞(c ECs和EPCs),并观察其与BBB损伤的关系。结果免疫荧光三重染色法成功检测到细胞型为CD146+/CD133-/S100B+的c BMECs细胞,CD146+/CD133-/S100B-的c ECs细胞和CD133+/CD146+/S100B-的EPCs细胞。结果显示,病例组三种细胞含量均高于对照组,差别有统计学意义(c BMECs、c ECs、EPCs分别为t=4.298,P<0.01;t=4.886,P<0.01;t=4.889,P<0.01)。此外,以c BMECs含量与HIV病毒载量做散点图,可见c BMECs含量随病毒载量增加而增加,且具有统计学意义(r=0.928,P<0.01)。结论用临床病人标本成功建立了在外周血中检测BBB损伤新型标记物c BMECs的实验方法。BBB损伤病人外周血中c BMECs含量显著高于健康人。新型标记物c BMECs在无创检测BBB损伤方面具有重要临床价值。
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关键词
外周血
生物标记物
脑微血管内皮细胞
血脑屏障损伤
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职称材料
CD44在新生隐球菌体外感染血脑屏障中对单核细胞迁移的影响
被引量：
2
2
作者
张立科
邱嘉文
+7 位作者
梁晓路
黄宝怡
李妍
杜蕾
龙敏
罗军
黄胜和
曹虹
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期468-473,共6页
目的：新生隐球菌（Cryptococcus neoformans, Cn）荚膜主要毒力因子透明质酸由CPS1基因编码，能与宿主细胞受体CD44结合介导真菌侵袭。本文目的明确CD44分子在Cn体外感染血脑屏障模型中对单核细胞黏附人脑微血管内皮细胞（HBMEC）并迁...
目的：新生隐球菌（Cryptococcus neoformans, Cn）荚膜主要毒力因子透明质酸由CPS1基因编码，能与宿主细胞受体CD44结合介导真菌侵袭。本文目的明确CD44分子在Cn体外感染血脑屏障模型中对单核细胞黏附人脑微血管内皮细胞（HBMEC）并迁移穿越血脑屏障的影响。方法用单层HBMEC铺趋化小槽构建体外血脑屏障模型，利用Cn野生株B4500FO2、CPS1基因缺失株TYCC645#32和CPS1基因回补株PCIP，分别感染模型中的HBMEC，然后在上槽液中加入人白血病单核细胞（THP-1），计数从上槽液中迁移到下槽液中的单核细胞数量，观察Cn感染与单核细胞迁移时间和剂量关系；用抗CD44单克隆抗体和CD44抑制剂Bikunin分别作用于模型中单层HBMEC，通过趋化实验检查抗CD44单克隆抗体和Bikunin对Cn感染模型中单核细胞迁移的抑制效应。结果黏附和趋化实验结果显示，Cn感染HBMEC后，相比PBS对照组，THP-1黏附率和趋化效应均明显增加（P〈0.01），且黏附率和迁移率随Cn感染量和感染时间的增加而显著上升（P〈0.05）。通过抗CD44单克隆抗体和CD44阻断剂Bikunin分别作用于Cn感染后的HBMEC，结果发现THP-1黏附率和迁移率均显著降低（P〈0.01），且在一定范围内分别随抗体（0-1μg）和抑制剂（0-20 nmol/L）剂量的增加而减低。不同Cn菌株荚膜透明质酸的表达差异对THP-1细胞黏附和迁移有一定影响：与野生株相比，TYCC645#32感染组的THP-1黏附率和迁移率均明显降低（P〈0.01，P〈0.05），而回补株PCIP的THP-1黏附率和迁移率有所增加。结论体外血脑屏障模型中人脑微血管细胞表达CD44分子可能对单核细胞黏附内皮细胞和迁移通过血脑屏障起重要作用；荚膜透明质酸能介导Cn诱导的单核细胞黏附和迁移。
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关键词
新生隐球菌
CD44
单核细胞
血脑屏障
迁移
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职称材料
题名
外周血中血脑屏障损伤新型标记物脑微血管内皮细胞检测方法的建立
被引量：
3
1
作者
李妍
杜蕾
袁霖
陈德喜
邱嘉文
何肖龙
曹虹
黄胜和
机构
南方医科
大学
公共卫生与热带医学学院微生物学系
首都医科
大学
附属北京佑安
医院
美国南加州大学洛杉矶儿童医院
Saban研究所
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第12期1733-1737,共5页
基金
国家自然科学基金(81171644
81370740)~~
文摘
目的建立检测人血脑屏障(BBB)损伤新型标记物外周循环血中脑微血管内皮细胞(c BMECs)的实验方法。方法选取33名AIDS脑病病例与13名健康对照分组实验,应用免疫磁珠吸附AIDS脑病病例组及健康对照组外周血中内皮细胞后涂片,免疫荧光三重染色法检测涂片中的c BMECs及相关内皮细胞(c ECs和EPCs),并观察其与BBB损伤的关系。结果免疫荧光三重染色法成功检测到细胞型为CD146+/CD133-/S100B+的c BMECs细胞,CD146+/CD133-/S100B-的c ECs细胞和CD133+/CD146+/S100B-的EPCs细胞。结果显示,病例组三种细胞含量均高于对照组,差别有统计学意义(c BMECs、c ECs、EPCs分别为t=4.298,P<0.01;t=4.886,P<0.01;t=4.889,P<0.01)。此外,以c BMECs含量与HIV病毒载量做散点图,可见c BMECs含量随病毒载量增加而增加,且具有统计学意义(r=0.928,P<0.01)。结论用临床病人标本成功建立了在外周血中检测BBB损伤新型标记物c BMECs的实验方法。BBB损伤病人外周血中c BMECs含量显著高于健康人。新型标记物c BMECs在无创检测BBB损伤方面具有重要临床价值。
关键词
外周血
生物标记物
脑微血管内皮细胞
血脑屏障损伤
Keywords
peripheral blood
biomarker
circulating brain microvascular endothelial cells
blood-brain barrier injury
分类号
R651.15 [医药卫生—外科学]
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职称材料
题名
CD44在新生隐球菌体外感染血脑屏障中对单核细胞迁移的影响
被引量：
2
2
作者
张立科
邱嘉文
梁晓路
黄宝怡
李妍
杜蕾
龙敏
罗军
黄胜和
曹虹
机构
南方医科
大学
公共卫生与热带医学学院//广东省热带病研究重点实验室
南方医科
大学
第一临床医学院
美国南加州大学洛杉矶儿童医院
出处
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第4期468-473,共6页
基金
国家自然科学基金(81171644)
2013年度广东省级大学生创新创业训练计划项目(1212113033)~~
文摘
目的：新生隐球菌（Cryptococcus neoformans, Cn）荚膜主要毒力因子透明质酸由CPS1基因编码，能与宿主细胞受体CD44结合介导真菌侵袭。本文目的明确CD44分子在Cn体外感染血脑屏障模型中对单核细胞黏附人脑微血管内皮细胞（HBMEC）并迁移穿越血脑屏障的影响。方法用单层HBMEC铺趋化小槽构建体外血脑屏障模型，利用Cn野生株B4500FO2、CPS1基因缺失株TYCC645#32和CPS1基因回补株PCIP，分别感染模型中的HBMEC，然后在上槽液中加入人白血病单核细胞（THP-1），计数从上槽液中迁移到下槽液中的单核细胞数量，观察Cn感染与单核细胞迁移时间和剂量关系；用抗CD44单克隆抗体和CD44抑制剂Bikunin分别作用于模型中单层HBMEC，通过趋化实验检查抗CD44单克隆抗体和Bikunin对Cn感染模型中单核细胞迁移的抑制效应。结果黏附和趋化实验结果显示，Cn感染HBMEC后，相比PBS对照组，THP-1黏附率和趋化效应均明显增加（P〈0.01），且黏附率和迁移率随Cn感染量和感染时间的增加而显著上升（P〈0.05）。通过抗CD44单克隆抗体和CD44阻断剂Bikunin分别作用于Cn感染后的HBMEC，结果发现THP-1黏附率和迁移率均显著降低（P〈0.01），且在一定范围内分别随抗体（0-1μg）和抑制剂（0-20 nmol/L）剂量的增加而减低。不同Cn菌株荚膜透明质酸的表达差异对THP-1细胞黏附和迁移有一定影响：与野生株相比，TYCC645#32感染组的THP-1黏附率和迁移率均明显降低（P〈0.01，P〈0.05），而回补株PCIP的THP-1黏附率和迁移率有所增加。结论体外血脑屏障模型中人脑微血管细胞表达CD44分子可能对单核细胞黏附内皮细胞和迁移通过血脑屏障起重要作用；荚膜透明质酸能介导Cn诱导的单核细胞黏附和迁移。
关键词
新生隐球菌
CD44
单核细胞
血脑屏障
迁移
Keywords
Cryptococcus neoformans
monocytes
blood-brain barrier
transmigration
分类号
R519 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
外周血中血脑屏障损伤新型标记物脑微血管内皮细胞检测方法的建立
李妍
杜蕾
袁霖
陈德喜
邱嘉文
何肖龙
曹虹
黄胜和
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2014
3
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职称材料
2
CD44在新生隐球菌体外感染血脑屏障中对单核细胞迁移的影响
张立科
邱嘉文
梁晓路
黄宝怡
李妍
杜蕾
龙敏
罗军
黄胜和
曹虹
《南方医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
2
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参考文献
引证文献
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